血管紧张素II对脓毒症休克大鼠心脏功能的影响

本研究拟通过盲肠结扎穿孔制备大鼠脓毒症模型,观察血管紧张素II对脓毒症休克(sepsis-shock)大鼠心脏功能的影响。方法 48只(Sprague-Dawley,SD)雄性大鼠随机分为6组(n=8):对照(control)组、假手术(sham)组、脓毒症休克(SS)组、去甲肾上腺素(NE)治疗组、血管紧张素II (ANGII)治疗组。采用盲肠结扎穿孔制备脓毒症休克动物模型。监测大鼠心率、血压变化。监测过程中大鼠如出现平均动脉压下降至65mmHg以下,立即给予0.9%生理盐水进行液体复苏,观察10分钟后如效果不佳,按照分组给予不同血管活性药物泵入。分别在造模后6,12,18,24小时抽血行心肌酶学指标检测,同时在该时段行超声观察大鼠心脏超声检查。于术后24小时留取心脏组织进行氧化因子指标测定,并进行心脏组织病理学观察。结果 与对照组和假手术组对比,脓毒症休克、去甲肾上腺素组、血管紧张素组平均动脉压下降明显,液体复苏效果欠佳,需要血管活性药物干预。与对照组和假手术组对比,脓毒症休克、去甲肾上腺素组、血管紧张素II组炎症反应、乳酸指标明显升高,具有统计学差异(P<0.05)。脓毒症休克组与对照组、假手术组相比,心脏左室射血分数(LVEF)明显下降,具有统计学差异(P<0.05),应用血管活性药物后,左室射血分数明显提高,血管紧张素II组射血分数提高与脓毒症组相比,具有显著统计学差异(P<0.01)。脓毒症休克组与对照组、假手术组相比,心肌酶学指标明显升高,应用去甲肾上腺素或血管紧张素II干预后,心肌酶学指标下降,与脓毒症组相比,具有统计学差异(P<0.05),血管紧张素II组改善更为明显(P<0.01)。结论 血管紧张素II可改善脓毒症休克对大鼠的心肌损害,对脓毒症休克大鼠心肌有一定的保护作用。

基于“肺朝百脉”探讨肾素-血管紧张素系统在肺间质纤维化中的意义

“肺朝百脉”是指以肺气宣发肃降为动力,以肺生血为物质基础,调节周身血脉。肾素血管紧张素系对血管的作用同“肺朝百脉”有着密切联系。肾素血管紧张素系统通过ACE-Ang II-AT1R轴与ACE2-Ang-(1-7)-MasR轴在肺间质纤维化过程中起重要调节作用。基于“肺朝百脉”理论,阐述肾素血管紧张素系统在肺间质纤维化形成中的意义,为中医药改善间质性肺疾病提供新的思路和研究方法。

枸杞多糖对血管紧张素II诱导的血管内皮细胞衰老及P53和P16表达的影响

目的观察枸杞多糖对血管紧张素I(IAngII)诱导人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)衰老及对细胞衰老相关基因P53和P16表达的影响,以探讨其抗衰老作用及机制。方法体外培养HUVECs加入终浓度10-6mol/LAngII诱导细胞衰老,建立内皮细胞衰老模型。实验分为空白对照组、AngII模型组和枸杞多糖组;β-半乳糖苷酶染色法鉴定内皮细胞衰老状态;流式细胞技术分析细胞周期变化;CCK-8法检测细胞存活率情况;Westernblotting法检测P53、P16蛋白的表达。结果 AngII模型组与空白对照组比较,β-gal阳性染色率明显增多,细胞周期多停滞于G0/G1期,S期细胞逐渐减少,细胞存活率明显下降,P53、P16蛋白表达水平明显上调。给予枸杞多糖处理后改善了细胞衰老状态,β-gal阳性染色率减少,G0/G1期细胞减少,S期细胞逐渐增多,细胞存活率增多,P53、P16蛋白的表达较AngII组下调。结论枸杞多糖能够抑制AngII诱导HUVECs衰老,其作用机制可能是通过下调P53及P16的表达而实现的。

血管紧张素II对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响

为探讨血管紧张素II(angiotensin II,AngII)对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响,采用鸡尾酒法诱导3T3-L1前脂肪细胞分化,并用油红O染色法和还原型烟酰胺嘌呤二核苷酸(nicotinamide-adenine dinuceotid,NADH)氧化速率法检测了3T3-L1脂肪细胞分化过程中胞浆脂质的累积和甘油磷酸脱氢酶(glycerol phosphatedehydrogenase,GPDH)的活性。结果表明,100 nmol/L的AngII可显著增大3T3-L1前脂肪细胞分化过程中胞浆脂质累积和GPDH活性(P<0.01),外源性AngII可促进3T3-L1前脂肪细胞的分化,增加脂肪细胞中脂类合成和储存。

肾上腺髓质素对血管紧张素II的促血管平滑肌细胞增殖作用的影响

观察肾上腺髓质素前体N端20肽（PAMP）和肾上腺髓质素（ADM ）对血管紧张素II（AngII）诱导的血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响。用测定培养的大鼠VSMC3H-TdR掺入和蛋白激酶C（PKC）活性的方法。结果发现：10-8mol/L AngII刺激培养的VSMCs 3H-TdR掺入增加2.68倍（P＜0.01）、PKC活性增加1.02倍（P＜0.01）。而10-9mol/L-10-7mol/L的PAMP或ADM与10-8mol/L AngII同时孵育，则显著抑制AngII的上述作用（P＜0.01）。且两者的抑制作用无明显差异。PAMP和ADM均有抑制AngII所致的VSMC增殖作用，可能是通过抑制信号传导系统中的PKC活性来实现的。PAMP和ADM 与AngII相互作用，共同调节VSMC的增殖，从而维持循环系统功能的稳态。

血管紧张素II经酸性鞘磷脂酶/神经酰胺通路致动脉内皮功能障碍的作用

目的探讨酸性鞘磷脂酶(acid sphingomyelinase,ASM)/神经酰胺(ceramide,Cer)通路在血管紧张素II(angiotensin II,Ang II)致动脉内皮功能障碍中的作用和机制。方法针对对照组,低、中、高剂量AngⅡ组及ASM抑制剂地昔帕明(desipramine,Dpm)组,采用Western blot检测法、实时定量PCR和免疫荧光化学方法检测ASM、Cer、总内皮型一氧化氮合酶(total endothelial nitric oxide synthase,t-e NOS)和磷酸化e NOS(phosphorylated e NOS,p-e NOS)含量变化;采用血管环张力描记技术检测主动脉血管环的舒张功能;采用二氢乙啶(dihydroethidium,DHE)荧光探针检测血管环超氧阴离子(superoxide anion,O_2^-·)水平。结果与对照组相比,AngⅡ孵育后主动脉对乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)的舒张反应显著降低(P<0.05),呈剂量依赖性,对硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)的舒张反应无明显改变;AngⅡ孵育组动脉ASM表达显著增加(P<0.05),Cer含量显著增多(P<0.05);ASM抑制剂Dpm可显著抑制AngⅡ所致ASM和Cer改变(P<0.05),亦可使动脉对Ach的舒张反应恢复正常;AngⅡ可显著降低动脉p-e NOS含量(P<0.05),增加O_2^-·水平(P<0.05),Dpm则可使p-e NOS增加(P<0.05),降低O_2^-·(P<0.05)。结论 ASM/Cer可能通过抑制e NOS磷酸化并增加O_2^-·含量介导AngⅡI所致动脉内皮功能障碍。

齐墩果酸对血管紧张素II诱导的大鼠心肌成纤维细胞增殖的影响及其作用机制

目的研究齐墩果酸（OA）对血管紧张素II（Ang II）诱导的大鼠心肌成纤维细胞（CFs）增殖的影响,并探讨其可能的作用机制。方法采用胰酶消化法及差速贴壁法培养大鼠CFs,实验分为空白对照组、Ang II（10-6mol·L^-1）组、Ang II（10-6mol·L^-1）＋OA（60,80,100μmol·L^-1）组。细胞长至融合状态时,先加入OA（60,80,100μmol·L^-1）预处理1 h,然后加入Ang II（10-6mol·L^-1）作用24 h。应用二甲基四唑氮蓝（MTT）法测定细胞增殖活性,酶联免疫吸附法（ELISA）测定细胞上清中I型胶原含量,蛋白质印迹法（Western blotting）和激光扫描共聚焦显微镜分别检测各组CFs中结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）蛋白表达和活性氧（ROS）变化。结果 Ang II能诱导CFs增殖,并能增加细胞上清中I型胶原的含量,同时CTGF的蛋白表达及CFs中ROS水平也显著增加。OA在60～100μmol·L^-1浓度范围内呈浓度依赖性抑制Ang II诱导的CFs增殖,并且OA能减弱Ang II诱导的CTGF和ROS表达。结论 OA可通过ROS-CTGF途径抑制Ang II诱导的CFs增殖和胶原生成。

血管紧张素II体外诱导神经干细胞分化为多巴胺能神经元的机制研究

目的探讨血管紧张素II(AngiotensinII,AII)诱导神经干细胞(Neural stem cells,NSCs)定向分化为多巴胺(Dopamine,DA)能神经元的过程中血管紧张素1型(AT1)受体和血管紧张素2型(AT2)受体所起的作用。方法在无血清培养基中分离培养NSCs,通过巢蛋白(nestin)免疫细胞化学对神经前体细胞进行鉴定;在此基础上,将第二代的NSCs在含10%胎牛血清的培养基中按照实验设计分为6组,分别是,A:对照组,B:AII组,C:AT1受体拮抗剂ZD7155组,D:AT1受体拮抗剂ZD7155+AII组,E:AT2受体拮抗剂PD123319组,F:AT2受体拮抗剂PD123319+AII组,观察NSCs向DA能神经元定向诱导分化情况。通过酪氨酸羟化酶(TH)免疫细胞化学进行DA能神经元鉴定,并观察各组DA能神经元突触的长度变化,通过实时荧光定量RT-PCR检测各实验组中TH基因表达水平。结果细胞团中可以看到nestin免疫阳性着色,实时荧光定量RT-PCR法检测B组、D组的TH基因表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),C、E、F组的TH基因表达水平与对照组比较无差异(P>0.05),各组DA能神经元的突触长度没有明显差别(P>0.05)。结论AII诱导产生DA能神经元的作用是由AT2受体介导,激活AT1、AT2受体均不能诱导DA能神经元突触延长或抑制突触延长。

外源性棕榈酸减轻儿茶酚胺和血管紧张素II共同介导的大鼠乳鼠心肌细胞损伤机制的初步探讨

目的:初步探讨棕榈酸减轻儿茶酚胺和血管紧张素II共同介导的心肌细胞损伤的可能机制,以及外源性棕榈酸的心脏保护作用。方法:培养原代大鼠乳鼠心肌细胞,随机分为:正常对照组(Control),药物损伤组[进一步分为低(LDC),中(MDC),高(HDC)三种药物浓度]组和棕榈酸保护组(对照组及三种药物浓度组分别加入0.3 mmol/L棕榈酸Palmic acid,PA),通过倒置显微镜和苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察细胞形态学变化,测量心肌细胞表面积。噻唑兰(MTT)法检测心肌细胞活力,采用高效液相色谱法测定心肌细胞总ATP含量,全自动生化分析仪测定心肌细胞培养液中乳酸脱氢酶释放量。结果:与药物组相比,棕榈酸保护组细胞损伤减轻,乳酸脱氢酶(LDH)释放减少,达到形态学改善,心肌细胞存活率及细胞内三磷酸腺苷(ATP)含量升高。结论:儿茶酚胺和血管紧张素II可共同介导心肌细胞损伤,机制可能与药物作用使细胞耗氧量增加,能量代谢障碍,细胞内ATP含量下降有关。一定浓度的棕榈酸可增加代谢底物,提高心肌细胞内ATP含量,保护心肌细胞。

原发性高血压患者血单核细胞趋化因子-1含量与血管紧张素II及血压相关性研究

目的通过对原发性高血压(EH)患者血中单核细胞趋化因子-1(MCP-1)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量变化的检测,探讨彼此间的相关性。方法从我院健康检查人群中筛选35名高血压患者与33名正常人,取其外周血用ELISA法检测血浆MCP-1;用放射免疫法测定AngⅡ含量。结果EH患者血浆中MCP-1含量较对照组明显增高(18.75±2.46ng/LP<0.01);AngⅡ含量在两组差别无显著性;且MCP-1含量的增加与AngⅡ及血压升高的程度无明显相关性。结论MCP-1在EH患者血浆中含量明显增加,但与血中AngⅡ及血压升高的程度无明显相关性。MCP-1可能在高血压血管重构中起作用,但机制尚不清楚。

血管紧张素II受体2型在乳腺癌患者中的表达及生物学意义

目的:运用生物信息学的方法探讨血管紧张素II受体2型(AGTR2)基因在乳腺癌患者中的表达、预后意义及与免疫浸润之间的关系。方法:我们在多个数据库中探讨了AGTR2在乳腺癌中的表达模式和预后价值,包括Ualcan、Bc-GenExMiner v4.7和Kaplan-Meier Plotter数据库。然后,我们使用TIMER数据库研究了乳腺癌中AGTR2表达和免疫细胞浸润之间的相关性。结果:我们发现乳腺癌肿瘤组织中AGTR2的表达水平显著低于癌旁组织,AGTR2的高表达水平有助于乳腺癌患者的生存。在乳腺癌中,AGTR2表达与多种免疫细胞(包括CD8+ T细胞、CD4+ T细胞)之间存在显著正相关(p 【0.05),与肿瘤纯度显著负相关(p 【0.05)。总之,AGTR2可作为乳腺癌的预后生物标志物,并可能与免疫细胞浸润相关。

血管紧张素II通过PI3K/Akt/FOXO1信号通路诱导骨骼肌细胞萎缩

目的探讨血管紧张素II(Ang II)对骨骼肌细胞的调控作用及其作用机制。方法使用Ang II及其1型受体(AT1R)拮抗剂(ARB)奥美沙坦干预C2C12成肌细胞,分为Control、Ang II和Ang II+ARB三组。使用2%马血清诱导成肌细胞分化为肌管细胞。免疫荧光染色检测肌管细胞的平均面积改变,Western blot检测肌管细胞泛素连接酶、生肌调节因子(MRFs)和PI3K/Akt/FOXO1信号通路蛋白表达的变化。结果免疫荧光染色显示,Ang II干预后,肌管细胞的平均直径和面积减小(P<0.001);使用奥美沙坦干预后,肌管细胞平均直径和面积明显增大(P<0.01)。Western blot显示,Ang II干预后,肌管细胞p-PI3K/PI3K(P<0.01),p-Akt/Akt(P<0.001)和p-FOXO1/FOXO1(P<0.01)的比率降低;MURF1(P<0.05)和MAFbx(P<0.001)蛋白表达明显升高,MHC(P<0.01)和MyoD(P<0.05)蛋白表达明显降低;使用奥美沙坦处理后,能够减轻Ang II对肌管细胞的干预作用。结论Ang II能够通过抑制PI3K/Akt/FOXO1信号通路的磷酸化,促进蛋白的降解,抑制蛋白的合成,诱导骨骼肌细胞萎缩。

新型冠状病毒细胞受体血管紧张素转化酶II在消化道及其肿瘤中的表达

目的:由于新型冠状病毒(Corona Virus Disease 2019,COVID-19)可通过血管紧张素转化酶II(angiotensin-converting-enzyme II,ACE2)细胞受体进入宿主细胞,前期研究显示ACE2 mRNA在正常消化道细胞中表达,但ACE2蛋白在正常消化道中的表达以及ACE2 mRNA及其蛋白在消化道肿瘤中的表达未见报道。因此,本文旨在探索消化系统肿瘤中ACE2的表达情况,以期为消化系统肿瘤患者防治COVID-19提供参考。方法:通过GEPIA在线分析网站和HPA数据库对消化系统肿瘤中ACE2的mRNA和蛋白表达情况进行分析。结果:在所有正常组织中,消化道中的ACE2 mRNA及蛋白表达均较高。在所有肿瘤组织中,消化道肿瘤的ACE2蛋白表达也较高。ACE2 mRNA在肺癌、结肠癌、食管癌和胃癌中的表达均高于正常组织,且结肠癌和胃癌的ACE2 mRNA表达差异有统计学意义;此外,结肠癌和胃癌中ACE2的表达也高于肺癌。结论:ACE2在人类消化道中的表达相对更高,为消化道传播可能是COVID-19的感染途径提供了一定证据,并且消化道肿瘤患者的ACE2表达相对其正常组织表达更高,为预防消化道这一可能的感染途径,应高度重视消化道肿瘤患者的防护。

血管紧张素转化酶2对Ang Ⅱ诱导的牛乳腺上皮细胞炎症损伤的缓解作用

以不同浓度血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导牛乳腺上皮细胞(MAC-T)炎症损伤,探讨血管紧张素转化酶2(ACE 2)的变化及与AngⅡ的相互作用。研究包括:ELISA检测细胞上清中细胞炎性因子的分泌或释放;Western blot检测细胞ACE 2和ACE的蛋白表达变化,并进行相关性分析;添加ACE 2活性蛋白对AngⅡ诱导损伤的保护作用。结果显示:1)AngⅡ处理MAC-T,细胞上清中促炎因子TNF-α、IL-6、IL-8含量显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)增加,抗炎因子IL-10含量显著降低(P<0.05);2)不同浓度AngⅡ处理细胞后,ACE 2蛋白表达均有降低,10-6 mol·L^-1 AngⅡ处理后显著降低(P<0.05);ACE蛋白表达结果相反;ACE 2与AngⅡ浓度之间存在显著负相关;3)添加外源性ACE 2活性蛋白,细胞上清中TNF-α、IL-6和IL-8浓度均有一定程度的下降,IL-10浓度升高。本研究表明ACE 2/ACE轴的失衡是AngⅡ诱导细胞炎性损伤的主要原因。高水平AngⅡ可激活炎症因子促进炎症反应,是促进炎症反应的主要介质,ACE 2可以通过降解AngⅡ,抑制其对炎症反应的上调效应。

血管紧张素II受体与丝裂原激活蛋白激酶及对心血管系统的意义

血管紧张素II(Angiotensin II,AngII)是一种重要的心血管活性物质,其受体亚型的作用及信号途径各有特点,不同受体经同一信号途径的作用意义也不同。丝裂原激活的蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,MAPK)是广泛存在于哺乳动物体内的信号途径,在各种应激反应中可被激活。AngII经其不同受体激活MAPK信号途径在心血管系统中可发挥重要的病理生理作用。

阿利吉仑抑制糖尿病肾病大鼠血管紧张素Ⅱ/血管紧张素1-7(Ang Ⅱ/Ang1-7)信号途径

目的探讨阿利吉仑(AL)对于糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织局部血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)/血管紧张素1-7 (Ang1-7信号轴的调控作用。方法雄性SD大鼠40只,随机分为正常对照组、糖尿病组(模型组)、AL处理组、缬沙坦(Val)处理组,每组10只。采用高脂饮食加小剂量链脲佐菌素方法建立DN模型,AL处理组给予50 mg/(kg·d) AL灌胃,Val处理组大鼠给予30 mg/(kg·d) Val灌胃。造模后2、4、6周,考马斯亮蓝比色法测定大鼠24 h尿蛋白变化,全自动生化分析仪检测血清肌酐,测定肾脏指数[肾脏质量(g)/体质量(kg)]; HE和PAS染色评估肾脏病变情况,免疫组织化学染色法检测血管紧张素Ⅰ转化酶2(ACE2)、Ang1-7受体(MAS受体)、1型血管紧张素受体(AT1R)及AT2R在肾组织的表达。结果成模后6周,各组间肌酐水平无显著差异;模型组、AL处理组、Val处理组大鼠造模后血糖显著增高,24 h尿蛋白、肾脏指数显著增加,与模型组相比,AL处理组、Val处理组大鼠24 h尿蛋白、肾脏指数有改善。与模型组及Val处理组相比,AL处理组AT2R和ACE2显著降低、MAS受体表达显著增加,AT1R表达显著高于对照组及Val处理组,与模型组无显著变化。结论 AL下调AT2R和ACE2的表达抑制AngⅡ/Ang1-7信号轴改善糖尿病大鼠症状。

激动κ-阿片受体通过抑制血管紧张素II/AT1受体途径发挥抗心律失常作用的探讨

阿片样物质/κ阿片受体(κ-opioid receptor,κ-OR)途径和血管紧张素II(angiotensin II,Ang II)/AT1受体途径都是调节心血管系统功能的重要信号通路。多年以来,人们对激动κ-OR的心肌保护效应和激活Ang II/AT1受体途径促进心律失常发生和发展的作用分别进行了许多研究,但激动κ-OR是否可通过负性调节Ang II/AT1受体途径来发挥抗心律失常作用的问题迄今仍缺乏探索。本文在总结以往对以上两途径研究成果的基础上,探讨了激动κ-OR通过对Ang II/AT1受体途径的负性调节从而发挥抗心律失常的作用,可望为心律失常的防治提供新的研究思路。

miR-218对血管紧张素II诱导的心肌细胞肥大的影响

探讨miR-218对血管紧张素II(Ang II)诱导的心肌细胞肥大的影响。方法:Ang II处理心肌细胞48h,qPCR检测心房利钠肽(ANF)、miR-218和心肌锚定重复蛋白(Ankrd1)的表达。分别用mimic miR-218和inhibitor miR-218转染原代心肌细胞24h,随后用Ang II处理48h,利用免疫荧光染色技术检测心肌细胞面积。利用双荧光素酶报告基因技术检测miR-218对Ankrd1 3’UTR的调控,Western Blot检测Ankrd1的表达。结果:Ang II处理引起心肌细胞中miR-218表达下调;与对照组相比,mimic miR-218显著抑制了Ang II诱导的心肌细胞肥大,而inhibitor miR-218促进了Ang II诱导的心肌细胞肥大。Ang II处理引起Ankrd1表达增加,miR-218能靶向抑制Ankrd1的表达。结论:miR-218能抑制Ang II诱导的心肌细胞肥大,其作用机制可能与靶向抑制Ankrd1的表达相关。