自拟复方中药水煎剂抗炎作用的初步研究

为研究自拟复方中药的抗炎效果,设立生理盐水对照组、地塞米松组、低浓度中药组和高浓度中药组,以小白鼠为动物模型设计了小鼠耳廓肿胀试验、小鼠腹腔毛细血管通透性试验和小鼠棉球肉芽肿试验检测其抗炎效果。结果发现:高、低浓度中药组与生理盐水组相比均能显著地降低小鼠耳廓肿胀率(P<0.05);高浓度中药组与生理盐水组相比显著降低小鼠腹腔毛细血管通透性(P<0.05);高浓度中药组与生理盐水组相比极显著降低棉球肉芽组织增生(P<0.01),低浓度中药组显著降低棉球肉芽组织增生(P<0.05)。说明自拟中药有较好对抗急性和慢性炎症效果。

人血管内皮生长因子189在毕赤酵母中的表达、纯化及其活性

目的在毕赤酵母中表达人血管内皮生长因子189(vascular endothelial growth factor 189,VEGF189),并进行纯化,同时检测其在体外的生物活性。方法以人VEGF183为模板,经重叠PCR法获得VEGF189基因,亚克隆至pPIC9K中,获得重组表达质粒pPIC9K-VEGF189。将其转化至E.coli DH5α中进行扩增,提取质粒,用SacⅠ酶线性化,电转至毕赤酵母GS115中,经4 mg/ml G418-YPD平板筛选高拷贝克隆。采用甲醇进行诱导表达,并通过肝素琼脂糖树脂亲和层析进行纯化。血管通透性试验检测其生物活性。结果经PCR鉴定证明重组表达质粒pPIC9K-VEGF189构建正确。VEGF189蛋白的表达及纯化产物均可与兔抗人VEGF183多克隆抗体发生特异性结合,纯化蛋白纯度达95%以上,浓度为0.291 1 mg/ml,可增加血管的通透性。结论本实验通过酵母表达系统获得了具有活性的VEGF189蛋白,为在体外探讨该蛋白在血管生成中的作用奠定了基础。