清醒大鼠高胰岛素-正血糖钳夹技术的建立和应用

目的建立大鼠高胰岛素-正血糖钳夹模型,并探讨短期输注脂肪乳对清醒状态下大鼠葡萄糖输注率(GIR)的影响。方法 SPF级雄性SD大鼠10只,随机数字表法分为2组,每组5只。采用颈动、静脉插管技术,分别经颈静脉给予SD大鼠输注20%脂肪乳(脂肪乳组)和5%葡萄糖6 h(对照组),行高胰岛素-正血糖钳夹实验测定血浆游离脂肪酸(FFA)和GIR。结果与葡萄糖输注的对照组比较,脂肪乳组大鼠输注20%脂肪乳6 h后,血浆FFA水平升高到对照组的17.6倍(P<0.01),GIR下降了27%(P<0.001),胰岛素抵抗非常明显。结论成功建立大鼠高胰岛素-正血糖钳夹技术,给大鼠输注脂肪乳可导致明显的胰岛素抵抗。

高胰岛素正常血糖葡萄糖钳夹技术进行国产与进口重组人胰岛素注射液的生物等效性临床研究

目的采用高胰岛素正常血糖葡萄糖钳夹技术评估国产与进口重组人胰岛素注射液在健康人体内的生物等效性。方法回顾性选取2014年12月至2015年9月空军军医大学第一附属医院的健康志愿者481例,按照注射药物的不同将受试者分为实验组和对照组,各362、119例。2组患者均采用高胰岛素正常血糖葡萄糖钳夹技术进行10 h钳夹试验,实验组患者皮下注射国产重组人胰岛素注射液,对照组患者皮下注射进口重组人胰岛素注射液。比较2组受试者试验前后30 min体格检查、血常规、血生化指标[体重、舒张压(DBP)、收缩压(SBP)、心率、白细胞计数(WBC)、血小板计数(PLT)、血红蛋白(Hb)、中性粒细胞百分比、总胆红素(TBIL)、白蛋白(ALB)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)及天门冬氨酸氨基转移酶(AST)]变化差异。结果试验前2组受试者体格检查、血常规、血生化指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。试验后2组体重、DBP、SBP、心率与试验前比较差异无统计学意义(P>0.05),且实验组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。试验后2组WB、PLT与试验前比较明显升高(P<0.05),Hb与试验前比较明显降低(P<0.05),中性粒细胞百分比与试验前比较差异无统计学意义(P>0.05),实验组的WBC、PLT、Hb、中性粒细胞百分与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。试验后2组TBIL、ALB、ALT、AST与试验前比较明显降低(P<0.05),但实验组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论国产重组人胰岛素注射液和进口重组人胰岛素注射液在健康者体内试验后其体格检查、血常规、血生化指标比较差异不大,具有生物等效性,临床上可根据患者实际情况进行选择。

不同浓度胰岛素输注对胰岛素钳夹大鼠糖代谢的影响

大鼠正糖钳夹技术(Euglycemic clamp technique)是近年来国外广泛应用胰岛素抵抗动物模型的实验研究[1].国内虽有个别报道,但其钳夹术是在麻醉及手术状态下,且未作糖代谢研究[2].我们设计了清醒大鼠胰岛素钳夹模型,用6,6-D2葡萄糖作非放射性示踪剂,给予三种浓度胰岛素输注,观察了大鼠糖代谢及血浆游离脂肪酸(FFA)的改变.

胰岛素受体底物-1及其基因多态性与胰岛素抵抗及高血压

胰岛素抵抗（IR）是指一定量的胰岛素所产生的生物学效价低于正常预计水平；机体代偿性地分泌过多的胰岛素。临床上常表现为高胰岛索血症和糖耐量减低。1987年Ferrannini等第一次用正常血糖胰岛素钳夹技术证实原发性高血压患者存在。1988年Heaven提出IR与高血压具相关性后，许多学者对其进行了研究。近年来，大量研究报道高血压和IR的关联。胰岛素受体底物-1（IRS-1）是胰岛素信息传递中重要的介质。随着研究的不断的深入，其与IR及高血压的关系被逐渐重视。现将其作一综述。

马来酸罗格列酮对高果糖餐大鼠胰岛素抵抗的影响

目的观察马来酸罗格列酮对高果糖餐大鼠胰岛素抵抗的影响。方法♂SD大鼠45只,予普通饲料喂养4周后,将其随机分为正常对照组、模型对照组和试验组,各15只。正常对照组继续以普通饲料喂养;另2组以高果糖餐喂养4周后,试验组用马来酸罗格列酮治疗4周;用tail-cuff法测定收缩期血压(SBP);用正常血糖高胰岛素钳夹技术评价胰岛素敏感性。结果4,8周时,试验组和模型对照组的收缩压较正常对照组显著增高(P<0.05);而体质量较正常对照组显著下降(P<0.05)。游离脂肪酸、空腹胰岛素、胰岛素敏感指数:试验组较模型对照组有显著改善(P<0.05,0.01)。结论马来酸罗格列酮可显著改善高果糖餐大鼠的胰岛素抵抗;降低内源性胰岛素及游离脂肪酸和甘油三酯水平,并对血压降低有一定影响。

胰岛素抵抗大鼠脂肪组织chemerin mRNA的表达和意义

目的探讨胰岛素抵抗大鼠脂肪组织中脂肪因子chemerin mRNA的表达情况及其与胰岛素抵抗之间的关系。方法采用高脂饲料喂养建立胰岛素抵抗大鼠模型,将30只雄性SD大鼠随机分为正常饮食组(NC,n=15)和高脂饮食组(HF,n=15),喂养10周后,以大鼠清醒状态下正常血糖-高血浆胰岛素钳夹技术进行评估,处死后取肾周脂肪组织,应用Real-time PCR方法检测大鼠脂肪组织中chemerin mRNA的表达水平。结果 (1)与NC组比较,HF组60～120 min的平均葡萄糖输注率(GIR60～120)明显降低[分别为(13.87±1.45)mg·kg-·1min-1和(24.10±2.87)mg·kg-·1min-1,P<0.05];(2)与NC组比较,HF组大鼠脂肪组织中chemerin mRNA的表达明显升高[分别为(1.86±1.02)和(0.92±0.32),P<0.01]。结论胰岛素抵抗大鼠脂肪组织chemerin mRNA升高,提示脂肪因子chemerin可能参与胰岛素抵抗的发生。

喂养型胰岛素抵抗动物模型的建立与评价

目的 :以钳夹技术评估高脂膳食建立胰岛素抵抗 (IR)动物模型的可行性。方法 :以脂肪热比为 5 9%(其中猪油占 39% ) ,蛋白质热比为 2 1% (其中酪蛋白占 31% ) ,碳水化合物热比为 2 0 % (其中玉米淀粉占 30 % )的特殊高脂膳食 ,喂养 4周后建立SD大鼠钳夹技术。结果 :高脂膳食喂养大鼠 4周后 ,葡萄糖输注率 (GIR)显著低于正常膳食喂养大鼠 (P <0 .0 1) ,且GIR水平与大鼠体重显著负相关 (γ =- 0 .75 2 ,P <0 .0 1)。结论 :建立SD大鼠的钳夹技术各项指标可靠、准确、稳定 ;高脂膳食喂养 4周后 ,钳夹技术证明大鼠胰岛素敏感性下降 ,提示复制IR大鼠模型成功。

青春期胰岛素抵抗及青春期2型糖尿病动物模型的特点

目的 :分析高脂饮食诱导的青春期胰岛素抵抗大鼠及青春期 2型糖尿病大鼠的特点。方法 :通过正常血糖 -高血浆胰岛素钳夹实验评估两种大鼠模型的胰岛素敏感性 ;对两种模型大鼠的雄激素与胰岛素敏感性的相关性进行研究 ;并与高脂饮食的成年期大鼠比较异同。结果 :青春期胰岛素抵抗雄性大鼠的睾酮水平显著降低 ,且与胰岛素敏感性呈相关关系 ;小剂量链脲佐菌素 (STZ)并不明显破坏胰岛细胞 ,但可使青春期胰岛素抵抗大鼠发生糖尿病 (2型糖尿病 ) ;青春期大鼠高脂饮食后仅仅甘油三酯 (TG)和低密度脂蛋白胆固醇 (LDL -c)升高 ,而成年胰岛素抵抗大鼠血脂代谢已经全面异常。结论 :高脂饮食诱导的青春期大鼠胰岛素抵抗及 2型糖尿病的发生可能与其血浆睾酮水平异常有关。

大鼠创伤性脑损伤后胰岛素抵抗的研究

目的 :探讨大鼠创伤性脑损伤后是否存在胰岛素抵抗现象。方法 :采用大鼠自由落体脑损伤模型 (Feeney’smodel) ,分别在伤前 1/2h及伤后 6、12、2 4、4 8、72、12 0h测定轻、中、重型脑损伤动物的血糖和血清胰岛素值。运用正常血糖 -高血胰岛素钳夹技术 ,检测大鼠重型创伤性脑损伤后 2 4h后BG60 -12 0 、GIR60 -12 0 、ISI等 3个反映胰岛素敏感性的指标。结果 :中、重型创伤性脑损伤后大鼠血糖含量升高的同时血清胰岛素水平升高 ,大鼠重型创伤性脑损伤后 2 4hBG60 -12 0 显著地升高 ,GIR60 -12 0 、ISI显著地降低。结论 :在重型创伤性脑损伤急性期 ,大鼠血糖和血清胰岛素水平均显著地升高 ,高水平的胰岛素未能起到相应的降低血糖的作用 。

胰岛素抵抗大鼠模型的建立与评价

目的探讨应用高胰岛素—正葡萄糖钳夹技术(钳夹法)对模型动物进行胰岛素敏感性评价的可行性。方法雄性Wistar大鼠喂以富含不饱和脂肪酸的特殊高脂肪膳食5周。应用钳夹法评价大鼠的胰岛素敏感性。结果与常规喂养大鼠相比,高脂膳食组的葡萄糖输注率显著降低,空腹血浆胰岛素显著升高。同时,高脂膳食大鼠出现高脂血症。结论应用钳夹法评价大鼠的胰岛素敏感性较为灵敏、准确、可靠。

高脂喂养条件下胰岛素抵抗大鼠甲状腺功能状态的评估

目的评估高脂喂养胰岛素抵抗大鼠甲状腺的功能状态。方法采用高脂饲料喂养建立胰岛素抵抗大鼠模型，以大鼠清醒状态下正常血糖．高血浆胰岛素钳夹试验进行评估，留取血样后测定大鼠血清甲状腺功能指标和血脂指标。结果（1）与正常饮食组（NC组）比较，高脂饮食组（HF组）60～120min的平均葡萄糖输注率（GIR60-120）明显降低（P〈0．05），TC、TG、LDL-C、FFA水平明显升高，HDL-C水平明显降低，差异均具有统计学意义（P〈0．05）。（2）与NC组比较，HF组大鼠血清TSH、FT3、FT4，差异均无统计学意义（P〉0．05）。但HF组大鼠血清TSH水平与TG水平呈正相关（R=0．749，P〈0．05），与HDL．c水平呈负相关（R=-0．172，P〈0．05），与TC、LDL—C、FFA水平无相关关系（P〉0．05）。结论高脂喂养胰岛素抵抗大鼠的甲状腺功能较正常组大鼠无明显变化，但血清TSH水平与血脂水平密切相关。

瑞典人群中胰岛素抵抗与心衰有关

瑞典的研究者最近发现了一个新的充血性心衰的危险因子。一个包括1187个老年瑞典人的大型队列研究发现，胰岛素抵抗预示着心衰的发生。研究者用正常血糖胰岛素钳夹技术来检测胰岛素抵抗，并且发现胰岛素抵抗时α 1标准差的下降能降低大概1／3的心衰风险（危害比为0．66，95％可信区间0．51～0．86），而且这一分析是校正了心衰的其他危险因素，包括糖尿病。这些人在研究开始时都没有心衰或是其他的瓣膜疾病，随访了平均8.9年后有104人发展为充血性心衰。

正常血糖高胰岛素钳夹技术的应用及护理

通过对 98例拟评价外周组织对胰岛素敏感性的受检者进行正常血糖高胰岛素钳夹的护理 ,认为对受检者在钳夹实验前进行必要的心理护理 ,充分做好各项准备工作 ,是实验成功的必要条件 ;钳夹实验过程中严密 (每 10min)监测血糖 ,并使取血肢端持续保温是关键 ;钳夹实验结束时在停止泵入胰岛素后逐渐减少葡萄糖输入量 ,是防止输入的高浓度胰岛素在体内产生迟发效应而致低血糖发生的重要措施。

高胰岛素-正常血糖钳夹技术的护理研究与改进

目的探讨高胰岛素-正常血糖钳夹试验操作方法及护理改进方法。方法对33例代谢综合征(MS)患者和22名健康成人进行高胰岛素-正常葡萄糖钳夹试验,评估其胰岛素敏感性。分析高胰岛素-正常葡萄糖钳夹试验的操作要点及经验,总结护理方面的改进方法。结果55例受试者中50例成功实施了高胰岛素-正常血糖钳夹试验,5例操作失败。稳态时120～150min MS患者和正常人的葡萄糖代谢率(M)分别为(4.13±1.34)mg/(kg·min)和(8.33±1.59)mg/(kg·min),MS患者的M值显著低于正常人,差异有统计学意义(P<0.01)。结论进行高胰岛素-正常葡萄糖钳夹试验前应做好充分的物品及操作准备工作,在整个试验过程中保持血管通畅、取血侧上肢保温,以保证钳夹试验的顺利完成。

正常血糖-高胰岛素钳夹技术在胰岛素制剂药物代谢动力学研究中的应用进展

正常血糖-高胰岛素钳夹技术是评价胰岛素敏感性的金标准技术。葡萄糖钳夹技术在糖尿病和胰岛素抵抗相关疾病的研究中具有独特的价值。近年来,随着胰岛素制剂及其类似物的迅速发展,该技术在其药物代谢动力学和药物效应动力学研究中的应用日益广泛。该文就正常血糖-高胰岛素钳夹技术在胰岛素制剂的药物代谢动力学及药物效应动力学研究中的发展历程和应用进展作一简要综述。

白塞病患者外周组织胰岛素抵抗

Behcet’s In this study, we examined peripheral insulin resistance in patients with disease (BD) characterized by chronic inflammation and endothelial dysfunction. Fourteen patients with BD and 15 healthy controls were recruited to the study. Insulin resistance was investigated by the hyperinsulinaemiceuglycaemic glucose clamp technique. BD patients displayed an enhanced rate of insulin resistance compared to healthy controls (P = 0.014). The insulin sensitivity (M), measured as the glucose utilization rate under steady-state conditions of euglycaemia, was significantly decreased (P =0.001) in BD patients compared to the controls (4.09±0.16 vs. 5.60±0.27 mg/kg/ min). The C-reactive protein (CRP) level, but not the erythrocyte sedimentation rate (ESR), was significantly related to the presence of insulin resistance (CRP: rs = 0.589, P = 0.27; ESR: rs= 0444, P = 0112), whereas no relationship was found between the M-value and ESR or CRP. We conclude that patients with BD exhibit peripheral insulin resistance; this could be explained as the diverse consequences of inflammation and endothelial dysfunction in BD.

内脂素基因过表达对胰岛素抵抗大鼠胰岛素敏感性的影响

目的探讨内脂素基因过表达对高脂诱导胰岛素抵抗（IR）大鼠胰岛素敏感性的影响。方法构建大鼠内脂素基因真核表达质粒，并用该质粒转染高脂喂养诱导的IR大鼠模型。在转染前后采用两次高胰岛素-正糖钳夹技术评价大鼠胰岛素敏感性的变化。结果成功构建了内脂素真核表达载体pcDNA3．1内脂素。实验组大鼠在pcDNA3．1内脂素质粒注射后3d血浆内脂素水平较注射前明显升高（2．19±0．36 vs 0．98±0．27，P〈0．01）；在两次胰岛素钳夹中，pcDNA3．1内脂素质粒注射后葡萄糖输注率较注射前明显升高[（32．6±1．2）mg·kg^-1·min^-1 vs （24．0±1．2）mg·kg^-1·min^-1，P〈0．01]；总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇则较质粒注射前明显降低[（2．36±0．22）mmol／L vs （1．60±0．21）mmol／L和（1．41±0．24）mmol／L vs（0．88±0．11）mmol／L，均P〈0．05]；在转染前后基础血糖和胰岛素水平无明显变化。结论内脂素质粒转染使IR大鼠血浆内脂素水平升高，胰岛素敏感性增强。

二甲双胍对高脂诱导胰岛素抵抗大鼠vaspinmRNA表达水平的影响

采用高脂喂养并利用清醒状态下正糖一高胰岛素钳夹技术评估胰岛素抵抗大鼠模型。胰岛素抵抗大鼠脂肪组织vaspin mRNA表达量明显低于对照组（P〈0．05），二甲双胍治疗后表达升高（P〈0．05），提示二甲双胍在改善大鼠胰岛素抵抗状态的同时能上调胰岛素抵抗大鼠内脏脂肪组织vaspinmRNA的表达。

短效重组人胰岛素在人体内的药动学及药效学研究

目的采用正常血糖-高胰岛素钳夹技术评估短效重组人胰岛素在健康人体内的药动学及药效学。方法采用单中心、随机、双肓、平行交叉研究,22名健康志愿者在正常血糖—高胰岛素钳夹平台基础上,分别前后接受皮下注射短效重组人胰岛素和优泌林R两次10 h钳夹试验,于给药前120、90、60、30 min及给药后0、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、150、180、210、240、270、300、330、360、390、420、450、480 min取血测定血清胰岛素水平,同时计算给药后的前2 h每10 min的葡萄糖输注速率和后6 h的每15 min的葡萄糖输注速率(GIR),计算药动学和药效学参数。结果 20名志愿者纳入分析,平均25.8±1.76岁,体重指数21.52±1.21 kg.m-1。受试制剂和参比制剂在钳夹基线稳态期组间的葡萄糖GIR和C肽抑制率接近,差异无统计学意义。短效重组人胰岛素和优泌林R皮下给药后有关药动学参数如下:胰岛素的Cmax分别为108.64±18.98、111.92±118.02 mU.L-1;Tmax分别为78.00±31.56、86.00±38.44 min;AUC0～480分别为20.6801±5.5153、21.3471±5.4641 U.L-1,葡萄糖GIRmax分别为5.55±1.73、6.16±1.69 mg.kg-1.min-1,结果表明:短效重组人胰岛素和优泌林R之间的药动学参数差异无统计学意义。结论正常血糖-高胰岛素钳夹技术可准确评估胰岛素制剂的药动学和药效学。两种制剂的药动学参数无显著差异,具生物等效性。