血红素氧化酶Ⅰ型蛋白在胶质瘤中的表达及其临床意义

目的研究血红索氧化酶Ⅰ型（HO-1）在胶质瘤组织中的表达及意义。方法（1）选择中山大学孙逸仙纪念医院神经外科自2010年1月至2015年1月采用手术治疗的胶质瘤患者56例。其中WHO分级Ⅰ级4例，Ⅱ级16例，Ⅲ级10例，Ⅳ级26例。将Ⅰ、Ⅱ级胶质瘤分为低级别胶质瘤组，将Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤分为高级别胶质瘤组。免疫组化染色检测胶质瘤中HO-1的表达。（2）采用R语言survival工具包分析癌症基金组图谱（TCGA）数据库中1107例胶质瘤患者的预后与HO-1蛋白表达的关系。结果（1）免疫组化染色结果显示高级别胶质瘤中HO-1高表达率（75％）高于低级别胶质瘤（30％），差异有统计学意义（P〈0．05）。高级别胶质瘤中HO-1的表达水平高于低级别胶质瘤．差异有统计学意（P〈0．05）。用HO-1评分绘制ROC曲线，曲线下面积为0．747（P=0．002），说明HO-1的表达水平对胶质瘤分级的判断有参考价值。Log-rank检验显示HO-1低表达组患者的累积生存率高于HO-1高表达组，差异有统计学意义（P〈0．05）。（2）TCGA数据库中HO-1低表达组患者的同期生存率高于HO-1高表达组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论胶质瘤中H0-1蛋白表达水平与胶质瘤恶性程度及预后相关，有望作为反映胶质瘤诊断及治疗的新生物学指标，并成为胶质瘤治疗和研究的新靶点。

蓝莓对急性肝损伤大鼠抗氧化能力的影响

目的探讨蓝莓对四氯化碳(CCl4)所致急性肝损伤大鼠肝组织核转录相关因子2(Nrf2)和Ⅰ型血红素氧化酶(HO-1)mRNA表达的影响。方法 SD大鼠48只随机分为正常对照组10只、蓝莓汁低、高剂量各组10只(1g/100g、2g/100g)、齐墩果酸(7.5mg/100g)组及模型组各9只,用CCl4致大鼠急性肝损伤模型。采用TRIzol提取肝组织总RNA,实时荧光定量PCR技术测定大鼠肝组织Nrf2及HO-1 mRNA的表达。结果与正常对照组比较,模型组肝组织Nrf2、HO-1 mRNA表达有所增加,差异无统计学意义。与模型组比较,蓝莓汁低、高剂量组及齐墩果酸组肝组织Nrf2、HO-1 mRNA表达明显增高,P<0.05。结论蓝莓可激活大鼠肝脏Nrf2增加HO-1的表达,提高机体的抗氧化应激能力,这可能是蓝莓预防CCl所致大鼠急性肝损伤的机制之一。

槲皮素通过促进Nrf2转位拮抗人肝细胞酒精性氧化损伤

目的探讨槲皮素诱导Ⅰ型血红素氧化酶(HO-1)对肝细胞酒精性氧化损伤的保护效应及相关信号通路。方法乙醇(100 mmol/L)孵育的人原代肝细胞经槲皮素(100μmol/L)处理24h后,测定细胞HO-1活性、Nrf2转位表达及细胞相应的氧化损伤程度;在此基础上,联合应用HO-1及各(MAPK)通路抑制剂,观察上述指标的变化。结果槲皮素处理使HO-1进一步升高,并明显减轻乙醇孵育所导致的细胞GSH耗竭、MDA升高及胞内门冬氨酸转氨酶(AST)与乳酸脱氢酶(LDH)的释放;HO-1诱导剂血红素也具有类似的效应,而HO-1抑制剂锌原卟啉Ⅸ及p38与细胞外信号调节激酶(extracellular regulated protein kinase,ERK)抑制剂(SB203580与PD98059)则明显抑制了Nrf2的转位活化及槲皮素的保护效应。结论槲皮素通过诱导HO-1保护肝细胞免受酒精性氧化损伤,其信号通路与p38及ERK活化促使Nrf2转位入核启动HO-1表达有关。

槲皮素对大鼠原代肝细胞HO-1蛋白表达及活性的影响

目的研究槲皮素对大鼠原代肝细胞中I型血红素氧化酶(HO-1)蛋白表达及酶活性的影响。方法二步胶原酶技术分离培养大鼠原代肝细胞。用不同剂量(25、50、100、200 mol/L)槲皮素作用大鼠原代肝细胞12 h,或用50 mol/L槲皮素作用肝细胞不同时间(2～12 h)后,提取肝细胞微粒体,检测HO-1酶活性变化,并用WesternBlot方法检测HO-1蛋白表达水平的变化。结果大鼠原代肝细胞经50～200 mol/L槲皮素处理12 h,或用50 mol/L槲皮素处理4～12 h后,HO-1蛋白表达水平和酶活性与对照组比较明显升高(P<0.05)。结论槲皮素能够诱导大鼠原代肝细胞的HO-1蛋白表达,提高肝细胞内HO-1的酶活性。

齐墩果酸通过激活Nrf2/HO-1信号通路减轻小鼠肝脏缺血-再灌注损伤

目的探讨齐墩果酸(OA)对小鼠肝脏缺血-再灌注(I-R)损伤的作用及可能机制。方法取24只小鼠建立部分肝脏I-R模型后均分为四个实验组:I-R组(模型对照)、OA组(OA预处理)、二价锌原卟啉Ⅸ(ZnPPⅨ)组(ZnPPⅨ预处理)、OA+ZnPPⅨ组(OA+ZnPPⅨ预处理)。另外取24只小鼠作为I-R模型的假手术对照(S)组。实验组小鼠再灌注6h后处死。检测各组血清ALT、肝组织丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性,Western blot检测核转录相关因子2(Nrf2)和Ⅰ型血红素氧化酶(HO-1)的表达。结果与S组比较,I-R组血清ALT和MDA水平升高(P<0.05),SOD活性降低(P<0.05)。与I-R组比较,OA组ALT和MDA水平降低(P<0.05),SOD活性升高(P<0.05),Nrf2和HO-1表达升高(P<0.05)。与OA组比较,OA+ZnPPⅨ组HO-1蛋白表达降低(P<0.05),血清ALT和MDA水平升高(P<0.01或P<0.05),SOD活性降低(P<0.01)。结论 OA预处理可通过激活Nrf2/HO-1信号通路减轻小鼠肝脏I-R损伤。