HO-1活性变化对HIF-1基因表达的影响

目的:探讨血红素氧化酶1(HO-1)活性变化对缺氧诱导因子1(HIF-1)基因表达的影响及其可能机制。方法:利用乏氧培养箱建立胃癌细胞株的缺氧诱导模型,采用RNA干扰技术使HO-1基因沉默,设为转染组(Z组);利用血晶素(Hemin)诱导使HO-1活性升高,设为Hemin组(H组);对照组(D组)仅做乏氧培养。分别用RT-PCR和免疫组织化学技术测定各组HO-1和HIF-1的mRNA及蛋白质含量。结果:Z组HO-1和HIF-1的mRNA和蛋白质水平明显低于D组(P<0.01),而H组明显高于D组(P<0.01)。结论:HO-1在接受HIF-1调节的同时,对HIF-1有正反馈的作用。这为今后利用RNA干扰等基因技术治疗恶性肿瘤提供了实验依据和理论基础。

HIF-1α基因沉默对食管鳞癌细胞功能性基因的影响

目的观察食管鳞癌细胞中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因与血管内皮生长因子(VEGF)、血红素加氧酶(HO-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)基因之间的关系及其对细胞周期的影响。方法以HIF-1α基因沉默的Eca-109细胞、化学模拟缺氧细胞及未干预细胞为研究对象,通过Western blot检测VEGF、HO-1、MMP-2基因在三种细胞中的表达差异以了解其与HIF-1α基因的关系,并通过流式细胞术分析了解HIF-1α基因沉默后细胞周期的变化。结果Western blot检测发现,同空白及模拟缺氧组比较,HIF-1α基因沉默后HIF-1α蛋白表达明显下调,同时VEGF、HO-1、MMP-2的蛋白表达均出现了明显下降。流式细胞分析表明,HIF-1α基因沉默后的Eca-109细胞组同对照组相比G1、G0期细胞明显增加,G2、M期细胞变化不大,S期细胞比例明显减少。结论HIF-1α与上述三种基因存在明显相关性,进而可能影响着食管鳞癌的血管生成、侵袭、应激保护等生物学行为,HIF-1α沉默可将食管鳞癌细胞阻滞于G、G期。