牛血红蛋白肽的酶解工艺优化及其亚铁螯合物结构、稳定性研究

本研究以牛血为原料,提取牛血红蛋白进行酶解,筛选最适的酶解蛋白酶,采用单因素结合响应面试验探究最佳酶解工艺,通过扫描紫外光谱,傅里叶红外光谱,扫描电镜和全自动氨基酸分析仪等技术对制备的牛血红蛋白肽铁螯合物(Bovine Hemoglobin Peptide Iron Chelate,BHP-Fe)进行结构表征,并通过热重分析和体外模拟胃肠道消化探究其体外稳定性。结果表明:胃蛋白酶和碱性蛋白酶分步酶解为最适酶解方法。在胃蛋白酶初步酶解的基础上,得到碱性蛋白酶最佳酶解条件:料液比1:3,酶解pH9.8,酶解温度41℃,酶添加量5900 U/g,酶解时间2 h。在此条件下,酶解得到牛血红蛋白肽(Bovine Hemoglobin Peptide,BHP)的Fe^(2+)螯合能力达72.11%,牛血红蛋白水解度达35.07%。紫外光谱和傅里叶红外光谱结果显示,Fe^(2+)与BHP肽链上的羧基氧和氨基氮发生螯合反应生成了不同于多肽的新物质;扫描电镜结果显示,多肽与Fe^(2+)螯合后从表面光滑的碎片状变成表面粗糙的块状,两者存在明显差异;氨基酸含量变化显示天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸为多肽与金属离子的结合提供结合位点;热重分析结果表明,BHP与BHP-Fe在300℃高温状态下依然能保持较好的稳定性;体外模拟消化稳定性分析结果表明,BHP-Fe相较于其它铁补充剂在胃肠道中能保持较高的稳定性。本实验制备的多肽源性补铁剂螯合力强、消化稳定性好、具有广阔应用前景,可为牛血副产物的高效利用和新型多肽源补铁剂的未来发展前景提供建设性参考。

猪血血红蛋白肽的研究进展

对猪血血红蛋白肽的营养成分、加工工艺、结构及功能、应用领域及前景等进行阐述。猪血血红蛋白肽是一种生物活性肽,是通过现代生物技术将猪血中的珠蛋白转化成的小分子肽,分子质量更小,免消化、直接吸收,生物利用度高,附加值高,氨基酸平衡,具有营养强化作用;具有促进胃肠道的早期发育及调节胃肠运动、提高免疫力、促进氨基酸的吸收、加速蛋白质的合成、降低血压和血脂及抗氧化功能。因此,可以应用到食品、饲料、日化及医药等领域。

驴血血红蛋白肽的制备工艺研究

为了优化驴血血红蛋白肽的制备工艺,促进驴血产品的深度开发,试验采用分光光度法确定驴血总蛋白分离工艺参数,测定驴血血红蛋白对DPPH和羟基(·OH)自由基的清除能力筛选最佳酶解用酶,并通过响应面法优化驴血血红蛋白酶解工艺。结果表明:4000 r/min离心15 min分离效果最好;4种蛋白酶中以碱性蛋白酶对DPPH和羟基自由基的清除能力最强;驴血血红蛋白肽酶解工艺为酶添加量8260 U/g、pH值9.79、酶解温度55.75℃,此时DPPH自由基清除率达75.99%。

大孔吸附树脂对猪血红蛋白肽脱盐的研究

采用大孔吸附树脂DA 201-CⅡ对猪血红蛋白肽进行脱盐,研究血红蛋白肽的脱盐工艺。结果表明,大孔吸附树脂DA 201-CⅡ对血红蛋白肽脱盐的工艺条件为:pH值为6.0,多肽浓度为40 mg/mL,上样流速为1 BV/h,解析剂为75%乙醇。在此工艺条件下,经过脱盐处理后的血红蛋白肽的蛋白质含量由84.49%上升到95.10%,肽含量由62.5%提高到81.89%,灰分由11.69%降低到0.27%,脱盐效果明显。

新型血红蛋白抗菌肽抑菌活性及溶血性研究

对分离的血红蛋白抗菌肽进行生物活性鉴定。通过微量稀释法测定血红蛋白抗菌肽对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌的最小抑菌浓度(MIC);以血红蛋白释放量测定其溶血性;琼脂平皿试验测定其热稳定性;并进一步在扫描电镜(SEM)下观察血红蛋白抗菌肽对测试菌株形态结构的影响。结果表明,血红蛋白抗菌肽对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的MIC分别为0.5、1.0、0.25mg/mL;在2.0mg/mL的浓度下,可造成6.7%的红细胞发生溶血;经过高温处理,仍表现出较好的热稳定性;SEM观察到血红蛋白抗菌肽作用的细菌形态发生严重的皱缩、变形并大量的聚集,细胞膜裂解、破碎。说明血红蛋白抗菌肽具有良好的抗菌活性且溶血性较低,具有良好的生物安全性。

血红蛋白多肽螯台铁的抗贫血功能研究

以Wistar品系初断乳大鼠为缺铁贫血模型,研究了血红蛋白多肽螯合铁对改善大鼠缺铁性贫血的效果,并与葡萄糖酸亚铁和氯化亚铁进行了对比。研究结果表明,血红蛋白多肽螯合铁可使贫血大鼠的体重、血红蛋白、红细胞计数、血清铁水平显著升高(P<0.05),说明血红蛋白多肽螯合铁可显著改善大鼠的生长以及缺铁性贫血,并且其补铁效果明显好于葡萄糖酸亚铁和氯化亚铁。

血清C肽、糖化血红蛋白与N-乙酰β-D-氨基葡糖苷酶联合检验在诊断2型糖尿病早期肾损伤中的应用

目的探讨血清C肽、糖化血红蛋白与N-乙酰β-D-氨基葡糖苷酶联合检验在诊断2型糖尿病早期肾损伤中的应用。方法选择2018年1月~2019年6月我院收治的50例2型糖尿病早期肾损伤患者作为为研究组,另选取同时间段收治的50例单纯2型糖尿病患者作为对照1组,另选取同时间段来我院进行常规体检的50例自愿者作为对照2组。三组均接受血清C肽、糖化血红蛋白与N-乙酰β-D-氨基葡糖苷酶联合检验诊断,并进行比较分析。结果研究组的糖尿病病程长于对照1组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组的空腹血糖、尿微量白蛋白/肌酐比值水平均高于对照1组、对照2组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组的糖化血红蛋白、N-乙酰β-D-氨基葡糖苷酶水平均高于对照1组、对照2组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组的血清C肽水平低于对照1组、对照2组,差异有统计学意义(P<0.05);对照1组的空腹血糖、尿微量白蛋白/肌酐比值水平均高于对照2组,差异有统计学意义(P<0.05);对照1组的糖化血红蛋白、N-乙酰β-D-氨基葡糖苷酶水平均高于对照2组,差异有统计学意义(P<0.05);对照1组的血清C肽水平低于对照2组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在临床检查诊断糖尿病早期肾损伤过程中,应用血清C肽、糖化血红蛋白与N-乙酰β-D-氨基葡糖苷酶联合检验方法可以起到有效作用,能够提供准确检查诊断参考依据,具有重要应用价值。

血清C肽与糖化血红蛋白联合检测在糖尿病诊断中的应用

目的观察血清C肽与糖化血红蛋白(HbA1c)联合检测在糖尿病患者临床诊断中的应用效果。方法选择2013年3月—2014年3月间于该院就诊的48例糖尿病患者,将其中24例单纯2型糖尿病患者作为糖尿病组,24例糖尿病肾病患者作为糖尿病肾病组,另筛选同期该院体检中心健康成人体检人员24例作为对照组。然后进行HbA1c、空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖、血清C肽等相关指标的统计学分析。结果实验组患者血清HbA1c、FBG、餐后2 h血糖明显高于对照组(P<0.05);且糖尿病肾病组患者的血清C肽水平低于对照组患者,HbA1c含量明显高于对照组(P<0.05);糖尿病组和糖尿病肾病组患者的血清HbA1c含量与血清C肽呈负相关和FBG呈正相关关系(P<0.05)。结论糖尿病患者HbA1c与血清C肽水平发生异常,检测结果可以作为反映胰疾病严重程度的指标,血清c肽与糖化血红蛋白联合检验对糖尿病肾病辅助诊断有一定价值。

血清C肽与糖化血红蛋白联合检验对糖尿病诊断符合率的影响研究

目的:讨论分析糖尿病的有效诊断方案,评估糖化血红蛋白、血清C肽在诊断中的实际价值。方法:2018年3月至2020年3月为研究时间跨度,纳入102例糖尿病患者为研究组,另选取此时间段健康体检人员102例为对照组,两组在常规血糖检验的基础是增加血清C肽、糖化血红蛋白等指标,对比具体指标。结果:对比两组血清C肽、糖化血红蛋白、空腹血糖指标,存在显著差异(P<0.05)。结论:临床诊断糖尿病在常规血糖评估中加入血清C肽、糖化血红蛋白能够提高检出率,可全面推广。

谷胱甘肽血红蛋白与氧化应激状态

氧化应激 (OxidativeStress)状态是组织氧化损伤的表现 ,是危害人类最严重疾病如糖尿病、动脉粥样硬化及相关心血管疾病、癌症、尿毒症、爱滋病及衰老等多种疾病共有的潜隐性组织病理渐进性变化过程。谷胱甘肽血红蛋白是上述病症中氧化损伤最新标志物 ,在氧化损伤时明显增加 ,并具有高度敏感性及特异性。检测其含量变化 ,有助于识别氧化损伤的病理过程 ,为预防和有效治疗上述疾病提供依据。

血清C肽与糖化血红蛋白联合检验诊断糖尿病的应用效果研究

目的:研究血清C肽与糖化血红蛋白联合检验诊断糖尿病的应用效果。方法:抽取2017年4月到2018年4月期间我院收治的糖尿病患者40例,设为患者组,抽取同期我院接收的健康体检者40例,设为健康组,研究2组血清C肽与糖化血红蛋白联合检验结果。结果:患者组患者空腹血清C肽水平值(0.97±0.46)ug/L、餐后2h血清C肽水平值(4.75±0.81)ug/L、糖化血红蛋白水平值(9.92±1.52)%,均明显高于健康组(p<0.05)。结论:血清C肽与糖化血红蛋白联合检验诊断糖尿病的应用效果显著,可推广应用。

血红蛋白多肽的降压机制研究进展

文章对血红蛋白的分子结构、分离纯化及功能特性和血红蛋白多肽制备方法的研究进行了综述,并探讨了血红蛋白多肽的降压机制研究现状,最后提出了Hb多肽存在降压机制研究的问题以及开发利用的方向,以期为Hb降压肽产品的进一步开发利用提供参考。

单环刺螠重组血红蛋白酶解组分hemocidins的初步抗菌活性分析

目的:研究重组血红蛋白酶解片段抗菌活性,以发现活性强的抗微生物多肽。方法:本研究分别采用糜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶和木瓜蛋白酶4种酶水解单环刺螠重组血红蛋白(Uu Hb-F-I),然后通过超滤将酶解产物分成不同分子量段组分(> 10k,3～10k,<3k),并琼脂扩散法初步测定各组分抗菌活性。结果:血红蛋白源的各酶解组分对所用菌种有不同程度的抗菌作用,其中胃蛋白酶和胰蛋白酶水解组分对阳性菌的抑制作用强于阴性菌,而糜蛋白酶和木瓜蛋白酶水解组分(> 10k)对阴性菌的抑制作用强于阳性菌;此外,4种酶水解后的各组分对真菌均无抑制作用。另外,研究结果发现抗菌活性随着肽链的长度缩小而降低,抗菌活性强的多肽片段可能位于酶解组分(> 10k,3～10k)中。结论:血红蛋白酶解片段具有抗菌活性,且抗菌活性强的是相对较长的多肽,进一步水解可能导致活性丧失。本研究结果有助选择具有较好抗菌性的酶解多肽片段,为研发新型抗微生物多肽提供思路。

Molecular Evolutionary Rate Calculation of Hemoglobin α Chain and γ Chain at Different Stages in Vertebrate Evolution Process

Pseudogene and fibrin peptide which has rapid evolve speed and good stability are used in this study to determine the divergence date among groups.Through calculating the evolutionary rate of hemoglobin α chain,γ chain in vertebrate（including birds and mammals）,it is concluded that the evolutionary rate of hemoglobin α chain,γ chain is not invariable.It shows different evolutionary rates in different periods,that is,faster in early evolution stage and relatively slow in later stage.