不同浓度过氧化氢处理红细胞对血红蛋白释放的影响

为观察不同浓度过氧化氢处理红细胞对血红蛋白(Hb)释放的影响,分别用8%、4%、2%、1%、0.5%、0.25%和0.125%的过氧化氢溶液处理等体积的红细胞悬液,然后测定红细胞相对溶解度及上清液中丙二醛的含量,并利用血红蛋白释放试验(HRT)比较不同浓度过氧化氢处理红细胞后血红蛋白释放的差异。结果表明,随着过氧化氢浓度逐渐增高,血红蛋白的释放逐渐增多,但继续增高过氧化氢的浓度,可使血红蛋白释放减少。说明不同浓度过氧化氢对血红蛋白释放影响不同。

血红蛋白释放试验与血液流变学检测结果相关性的研究

目的:研究血红蛋白释放试验(HRT)与血液流变学检测结果之间的相关性,探讨有关机制和临床意义。方法:对48例门诊随机标本配对做低渗37℃HRT。将血液流变学测试报告中的3项全血黏度(低切、中切、高切)值与HRT测定值进行比较,分析两者的相关性。结果:HRT与血液流变学结果呈一定的正相关,其与各种黏度值的相关系数分别为:低切r=0.642(P<0.001),中切r=0.636(P<0.001),高切r=0.641(P<0.001)。结论:HRT的反应机制中,至少有一部分与血液黏度增加有关。

普通外科患者血红蛋白释放试验的比较研究

目的研究一些普外患者血红蛋白释放试验(HRT)结果的差异,探讨其临床意义。方法普通外科住院患者,取静脉血做HRT,采用3种HRT定点释放技术:等渗室温HRT、等渗37℃HRT、低渗37℃HRT各项处理结束后,进行淀粉-琼脂糖混合凝胶薄层电泳,第一次电泳后,停电一段时间后继续第二次电泳,丽春红、联苯胺染色后观察血红蛋白的释放情况。结果①等渗室温HRT:8例患者中有1例出现阳性结果;②等渗37℃HRT:10例患者中有3例出现阳性结果;③低渗37℃HRT:同上10例患者中有5例出现明显阳性结果。结论各种类型HRT的结果不同,灵敏度有差异,临床意义也有区别,可以提供多种疾病信息。HRT的基本原理是观察不同状态下红细胞膜释放血红蛋白的能力,详细机制有待于进一步研究。

尿毒症患者低渗血红蛋白释放试验的初步结果

目的建立低渗血红蛋白定时释放试验,比较研究慢性肾衰(CRF)患者红细胞中血红蛋白的存在状态,探讨其机制和临床意义。方法用低渗血红蛋白释放试验(HRT)五管法比较研究CRF患者与正常人的血红蛋白释放情况。再用低渗HRT一管法比较研究5例CRF与4例非CRF患者的血红蛋白释放结果。结果与正常对照比较,CRF患者标本出现以下特点:白蛋白前移、血红蛋白A2稍前移、定时释放增多、原点残留和泄漏明显。5例CRF的血红蛋白释放强于4例非CRF患者。结论与正常人或非CRF患者比较,CRF患者血液成分的电泳释放行为变化较大。白蛋白前移可能是它与血中毒素结合有关、血红蛋白释放方面的变化也可能来自毒素对红细胞的影响。

肝硬化患者血红蛋白释放试验明显异常

目的利用血红蛋白释放试验对肝硬化患者血液标本进行比较研究。方法对化验室38例检测凝血酶原的全血标本进行筛查,发现一例反常标本,回查大生化全项,发现它是肝功多项异常的肝硬化、腹水标本。在此基础上,从上述38个标本中取一例肝功正常的标本,对比之下做等低渗全程试验和双向双层对角线电泳。结果与对照标本相比,肝硬化标本的等低渗全程试验和双向双层对角线电泳明显不同。结论肝硬化患者血液标本的血红蛋白释放试验结果明显异常。

低渗血红蛋白释放试验与慢性肾衰竭

目的建立低渗血红蛋白定时释放试验,比较研究慢性肾衰竭(CRF)患者红细胞中血红蛋白的存在状态,探讨其机制和临床意义。方法用低渗HRT五管法,比较研究CRF患者与正常人的血红蛋白释放情况。再用低渗HRT一管法,比较研究5例CRF与4例非CRF肾病患者的血红蛋白释放结果。用交叉电泳研究CRF患者血浆成分对非CRF肾病患者红细胞的影响。结果与正常对照比较,CRF患者标本出现以下特点:白蛋白前移、血红蛋白A2稍前移、定时释放增多、原点残留和泄漏明显。5例CRF的血红蛋白释放强于4例非CRF肾病患者。交叉电泳结果表明,CRF患者血浆成分对非CRF肾病患者红细胞有一定影响。结论与正常人或非CRF肾病患者比较,CRF患者血液成分的电泳释放行为变化较大。白蛋白前移可能是它与血中毒素结合有关、血红蛋白释放方面的变化也可能来自毒素对红细胞的影响。

应用血红蛋白释放试验研究维生素C对红细胞氧化损伤的保护作用

为了研究维生素C对氧化损伤红细胞的保护作用,用终浓度为0、2.5、5、10、20、40mL/L的过氧化氢(H2O2)溶液处理等体积维生素C作用后红细胞悬液(维生素C保护组)和维生素C未作用红细胞悬液(对照组),测定红细胞相对溶解度和高铁血红蛋白(MetHb)含量,并用血红蛋白释放试验比较血红蛋白(Hb)释放差异。结果表明,维生素C保护组Hb释放量和相对溶解度均明显低于对照组(P<0.001),MetHb含量虽然低于对照组(P<0.05),但与H2O2浓度无相关性。说明维生素C对红细胞膜氧化损伤具有保护作用,并能减弱Hb释放和MetHb的生成量。

不同浓度戊二醛对红细胞血红蛋白释放的影响

为研究不同浓度戊二醛对红细胞细胞膜脆性及血红蛋白(Hb)释放的影响,用0.25、0.125、0.01、0.075、0.05、0.025mL/L的戊二醛溶液处理等体积的红细胞悬液,对照组用等体积的生理盐水处理,然后测定红细胞膜的渗透脆性,并利用血红蛋白释放试验(HRT)比较不同浓度戊二醛处理红细胞后血红蛋白释放的差异。结果表明,随着戊二醛浓度逐渐增高,红细胞渗透脆性变化不明显,但血红蛋白的释放逐渐减少。说明戊二醛可明显减弱红细胞血红蛋白释放。

红细胞血红蛋白释放试验的临床研究进展

研究组在2007年发现并创建了红细胞内血红蛋白电泳释放试验技术,该技术具有操作简单,费用低和效率高的优点。近年来,研究组将此技术不断发展,并应用于临床多种疾病患者的红细胞血红蛋白研究,发现了血液成分及红细胞自身变化均会导致血红蛋白释放的明显差异,提示了血红蛋白释放技术的临床应用价值。目前对血红蛋白释放的分子机制的研究已经取得了一些进展,但仍有很多尚待解决的问题,需要进行更加深入的研究。

剖宫产前后血红蛋白释放试验的连续观察

目的观察剖宫产手术前后红细胞释放血红蛋白情况。方法 1例剖宫产孕妇,分别于剖宫产术前、术后1、5、13 d采血,对这4份血液标本进行双向多层电泳,对其中术后5天的血液标本进行等低渗全程电泳,再对术后1天和5天的标本的血浆进行单向电泳试验。结果剖宫产术后5 d标本血红蛋白释放的变化较大。即在血红蛋白A1前方出现快泳联苯胺阳性成分,血浆中也有此联苯胺阳性成分,在白蛋白前出现丽春红阳性物质,涉及急性期反应蛋白。结论剖宫产手术前后血红蛋白释放结果有差异。

应用血红蛋白释放试验研究红细胞保存液甘露醇腺嘌呤磷酸二氢钠对红细胞的保护作用

为了研究红细胞保存液甘露醇腺嘌呤磷酸二氢钠(mannitol adenine sodium dihydrogen phosphate,MAP)对红细胞的保护作用,将红细胞悬液分为对照组和MAP组,将对照组加入等体积生理盐水和红细胞悬液,将MAP组加入等体积MAP液和红细胞悬液,4℃保存。取作用不同时间的两组反应液,利用血红蛋白释放试验(hemoglobin releasing test,HRT)比较血红蛋白释放差异,并测定相对溶解度。结果显示,相同时间MAP组的Hb释放量明显弱于对照组,红细胞的相对溶解度也较对照组显著降低。说明红细胞保存液能减弱Hb再释放,降低红细胞破膜率,保护红细胞。

肿瘤患者红细胞的血红蛋白释放实验初步研究

目的在已建立"血红蛋白释放试验HRT"的基础上,研究肿瘤患者的HRT情况。方法同时比较研究全血中红细胞和从中分离出来红细胞的HRT(简称"两种红细胞的HRT"),做淀粉-琼脂糖混合凝胶电泳。第1次电泳后停电一段时间,再进行第2次或更多次电泳。观察红细胞中血红蛋白的释放情况,同时加入了定量因素。结果各种肿瘤标本都有"两种红细胞的HRT",梯带强度可有不同。本次标本中,游离红细胞梯带相对最强的是肝癌、胰腺癌、胃癌,最弱的是鼻咽癌、甲状腺癌、皮肤癌。全血红细胞的梯带强度普遍较弱,变化相对较小。结论肿瘤患者标本中的血浆因素可能影响全血中红细胞的梯带释放。不同肿瘤其血浆因素可能不一样,具体机制有待深入研究。

血浆代用品的血红蛋白释放研究

目的:应用血红蛋白释放试验研究血浆代用品对红细胞是否产生影响。方法:将红细胞悬液分为三组,分别加入等体积生理盐水(normal saline,NS)、羟乙基淀粉(hydroxyethyl starch,HES)和右旋糖酐,保存2 h。利用血红蛋白释放试验(hemoglobin releasing test,HRT)比较血红蛋白(hemoglobin,Hb)释放差异,并测定相对溶解度。结果:HES组HRT电泳图谱呈现拖尾,右旋糖酐组的Hb释放量与生理盐水组比较,没有明显改变,三组的红细胞相对溶解度没有显著变化。结论:血浆代用品没有减弱Hb再释放,也没有降低红细胞破膜率。

抗-A和抗-B单克隆抗体对红细胞内血红蛋白释放情况的影响

目的:探讨抗-A、抗-B单克隆抗体对红细胞内血红蛋白电泳释放的影响。方法:用A、B、O、AB 4种血型红细胞与抗-A及抗-B单克隆抗体反应后的产物进行淀粉-琼脂粉混合凝胶电泳,常规电泳后停电30 min再继续电泳,观察血红蛋白的释放情况。结果:A、B、O、AB型红细胞与单克隆抗体反应后血红蛋白释放情况不同,与此同时HbA2的电泳行为也发生变化。结论:单克隆抗体对各型红细胞的血红蛋白释放有影响。

血红蛋白释放试验在轻型β-地中海贫血的应用

目的探讨血红蛋白释放试验的意义。方法对轻型β-地中海贫血患者的红细胞做琼脂糖混合胶电泳,经过第一次电泳后,再接着做第二次或更多次电泳,并且观察轻型β-地中海贫血患者的血红蛋白释放情况。结果通过第二次电泳试验发现,原点再次释放出血红蛋白,通过此次研究发现,轻型β-地中海贫血患者所释放出来的血红蛋白数量远远多于正常人所释放出的血红蛋白。结论在人体红细胞中,血红蛋白以不同的状态存在,在经过第一次电泳试验后,绝大部分血红蛋白会被释放,残存少量血红蛋白在红细胞中,通过第二次电泳试验会被全部释放。

不同存储时间对红细胞血红蛋白再释放的影响

目的:观察不同存储时间对红细胞(red blood cells,RBCs)血红蛋白(hemoglobin,Hb)再释放的影响。方法:募集健康成人志愿献血者,分别采集200 mL全血,滤白后离心去除血浆,将RBCs重悬于50 mL红细胞保护液(MAP)中,4℃保存。于储存期0 d、7 d、14 d、21 d、28 d、35 d、42 d抽取血样5 mL,分别检测红细胞Hb再释放、RBCs形态、聚集指数、相对溶血率、上清丙二醛(MDA)含量及高铁血红蛋白分数(FMet Hb)。结果:随着存储时间延长,红细胞Hb再释放增多,同时伴随RBCs相对溶血率、MDA含量、FMet Hb、变形RBCs、RBCs聚集指数的逐渐增高。结论:RBCs存储损伤可以导致Hb再释放增多。

小鼠肝切除使红细胞内血红蛋白的电泳释放增强

目的红细胞内血红蛋白的电泳释放在人类肝脏疾病已经有所发现,推测肝切除时血红蛋白释放试验,故利用小鼠来研究肝切除时血红蛋白的释放情况。方法取2016年12月—2017年4月于包头医学院生物化学与分子生物学实验室行小鼠肝切除术后0~7、14d的血红细胞做血红蛋白释放电泳,与未做手术小鼠及假手术组的小鼠的血红蛋白释放试验进行对比,观察其多带释放情况。结果未做手术和做过假手术的标本再释放强度较低,肝切除后0~7d、14d标本的再释放强度几乎都明显提高。结论肝切除影响到红细胞内血红蛋白电泳释放。

中药穿心莲和当归对小鼠红细胞血红蛋白再释放的影响

目的:探讨穿心莲和当归对小鼠红细胞血红蛋白再释放的影响。方法:将实验用小鼠雌雄各半按体重均匀分为7组(6个用药组和1个对照组),按实验设计分别对穿心莲和当归高、中、低浓度用药组小鼠用穿心莲和当归水煎液进行灌胃,对照组用生理盐水灌胃,每天1次,连续灌胃15 d,然后分别采血分离红细胞观察其血红蛋白再释放的情况,并用BandScan扫描定量,进行统计分析。结果:中、高浓度的穿心莲和高浓度的当归都能使小鼠红细胞血红蛋白的再释放增强。结论:穿心莲和当归水煎液均能影响实验小鼠的血红蛋白再释放,但影响程度随浓度不同而有差异。

遗传性球形红细胞增多症患者红细胞内快泳血红蛋白缺失

目的:利用我室创建的血红蛋白释放试验,研究遗传性球形红细胞增多症患者红细胞释放血红蛋白情况。方法:采用一系列血红蛋白释放试验:单向释放电泳、双向释放电泳、全血多组分电泳和等低渗全程释放电泳(室温、37℃),比较研究患者与正常人红细胞的差异。结果:患者红细胞经单向电泳释放出的血红蛋白快泳部分缺失或明显减少。双向电泳结果,患者红细胞除快泳血红蛋白减少或缺失外,还可见红细胞及全血Hb A2沿对角线分布,而且全血出现高铁血红素白蛋白。全血多组分实验中可见,患者红细胞及全血均无再释放。等低渗全程电泳显示,患者红细胞及全血的再释放都明显减弱或消失。结论:从电泳释放角度证明患者的红细胞明显异常,发现患者红细胞内快泳血红蛋白明显减少或缺失。

ABO血型的双向全程释放电泳图谱

目的:创建双向全程电泳图谱,比较研究A型、B型、AB型、O型4种血型的差异。方法:取10支试管,第1管只加全血20μL,不加蒸馏水,第2管加全血18μL,蒸馏水2μL,第3管加全血16μL,蒸馏水4μL,以此类推,第10管加全血2μL,蒸馏水18μL。用这10种标本做双向十层电泳,第一向时加入前进和后退两种再释放,第二向为普泳。丽春红-联苯胺复染后观察结果。结果:从10个前进区带和10个后退区带可以看出A型、B型、AB型、O型4种血型的电泳图谱互不相同。结论:各种血型的血红蛋白释放结果不同,说明红细胞表面的A抗原和B抗原对红细胞释放血红蛋白有影响。