超高效液相色谱-质谱联用技术快速检测二甲基甲酰胺职业接触者血红蛋白中新型生物标志物

建立了二甲基甲酰胺（N,N-dimethyl formamide,DMF）职业接触者血红蛋白中N-甲基氨甲酰加合物超高效液相色谱-质谱联用（UPLC/MS/MS）快速检测方法。准确称取0.1 g血红蛋白样品置于15 mL离心管中,加入40μmol/L3-甲基-异丁基海因（3-methy-5-isobutylhydantion,MIH）内标溶液250μL,再加入HCl-醋酸（2∶1,V/V）溶液4.75 mL,振荡混匀3 min。将试管置于沸水浴中加热降解1 h,取出冷却。混匀后取200μL到96孔板,加入600μL1%甲酸乙腈溶液,混匀。控制真空泵压力,使样品在2~4 min流出。将净化后样品混匀转移到样品瓶,用UPLC/MS/MS检测N-甲基氨甲酰加合物的降解产物3-甲基-异丙基乙内酸脲（3-Methyl-5-isopropylhydantoin,MVH）。质谱采集方式为多反应监测模式,内标法定量。结果表明,MVH浓度在0.01~1.0μmol/L范围内线性关系良好,相关系数为0.999。空白人群血红蛋白MVH加标回收率为97.3%,相对标准偏差为1.7%,血红蛋白中MVH检出限为0.01μmol/g。本方法能很好地应用于二甲基甲酰胺职业接触者血红蛋白中新型生物标志物N-甲基氨甲酰加合物的快速、准确测定。

基于一步电沉积层状甘氨酸-N,N-双甲基膦酸锆/海藻酸钠/血红蛋白的生物传感器的研究(英文)

一种新的有机-无机杂化层状甘氨酸-N,N-双甲基膦酸锆被合成并成功的用于固定血红蛋白.层状甘氨酸-N,N-双甲基膦酸锆/海藻酸钠/血红蛋白成功的电沉积到金电极的表面.血红蛋白的电子转移系(α)和电子转移速率常数(ks)分别为0.91和0.647 s-1,表明了血红蛋白酶和金电极之间的电子转移速率较快.在优化的实验条件下,响应电流与过氧化氢的浓度在1.4μmol/L to 3.5 mmol/L范围内呈良好的线性关系,检出限为4.7×10-7mol/L(S/N=3),传感器具有好的灵敏度、重现性、稳定性.

N-乙酰半胱氨酸对二甲基甲酰胺所致急性肝损伤的保护作用

目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对二甲基甲酰胺(DMF)所致急性肝损害的保护作用。方法 给小鼠腹腔注射一次1800mg/kg DMF后用NAC灌胃。测定血清山梨醇脱氢酶(SDH)、丙氨酰氨基转移酶(ALT)、甘胆酸(CG)、肝脏谷胱甘肽(GSH)、Na^+K^+-ATP酶、Ca^(2+)-ATP酶,观察肝脏病理改变。结果 与单纯染毒组比较,染毒后连续口服NAC组血清SDH、ALT、CG明显降低(P<0.05),肝脏GSH含量升高,Na^+K^+-ATP酶、Ca^(2+)-ATP酶活性增高(P<0.05),肝脏病理改变减轻。结论 NAC对DMF所致急性肝损伤有一定保护作用。

去乙酰酶抑制剂N-(2-氨苯基)-4-[N-(吡啶-3-甲氧羰基)氨甲基]苯甲酰胺的合成

以3 羟甲基吡啶为起始原料,采用碳酰二咪唑(CDI)法在0～10℃下搅拌反应,合成中间体4 [N (吡啶 3 甲氧羰基)氨甲基]苯甲酸(Ⅰ),收率为83 9%;然后与氯甲酸乙酯及三乙胺在0～10℃下搅拌反应,制得酸酐活性中间体(Ⅱ);它不经分离直接与邻苯二胺在室温条件下反应10h即得目标产物:N (2 氨苯基) 4 [N (吡啶 3 甲氧羰基)氨甲基]苯甲酰胺,经硅胶柱层析提纯后,收率为45 0%,总收率为37 8%,合成具有一定绿色化学特性;经质谱、核磁和红外等谱学方法鉴定了目标分子结构。

N-甲基-N-丙烯醛基-甲酰氨与甲基-AICA 一碳单元转移反应的量子化学研究

本文用量子化学方法研究了N-甲基-N-丙烯醛基-甲酰氨向甲基-AICA转移一碳单元的反应机理,阐明了亲核进攻和质子转移先后分步进行的反应机制。计算表明反应通道A所需的活化能较低,在竞争反应中占优势。此外,本文同时分析了甲基-AICA中C(4)上取代的甲酰胺基对该反应的影响。所有计算结果与实验结论一致。

血液中N-甲基氨甲酰血红蛋白加合物作为二甲基甲酰胺接触生物标志的研究

目的 探讨血液中N-甲基氨甲酰血红蛋白加合物（N-methylcarbamoylated haemoglobin,NMHb）作为N,N-二甲基甲酰胺（N,N-dimethylformamide,DMF）接触生物标志的可行性.方法 选择某合成革厂72名DMF作业工人为接触组,选择不接触DMF的某食品厂12名工人为对照组.接触组中选择有代表性45名工人进行工作场所空气长时间个体采样,同时问卷调查,并收集尿液和血液,分别用于测定尿甲基甲酰胺（N-methylformamide,NMF）、尿肌酐（Cr）和血液中NMHb.空气中的DMF和尿NMF用气相色谱进行测定,血液中的NMHb经埃德曼降解法降解为3-甲基-5-异丙基乙内酰脲（3-methyl-5-isopropylhydantoin,MVH）后,通过GC/MS进行测定.结果 工作场所空气中DMF浓度和班末尿NMF含量均与血液中NMHb含量相关,回归方程式分别为lgNMHb（nmol/g globin）=0.32×Lg DMF（mg/m3）＋1.8（r=0.60,P＜0.01）,lgNMHb（nmol/g globin）=0.47×lg NMF（mg/g Cr）＋ 1.4（r=0.56,P＜0.01）.结论 NMHb可作为反映DMF接触工人长期接触的生物标志物.

气相色谱法测定氨磷汀原料药中N,N-二甲基甲酰胺残留量

建立气相色谱法测定氨磷汀中N，N-二甲基甲酰胺的残留量。采用RTX一624色谱柱（30m×0．53mm×3．μm），以氮气为载气，FID检测，顶空进样，测定残留溶剂的含量。N,N-二甲基甲酰胺在34．9-251．1μg／mL浓度范围内线性关系良好，相关系数r=0．9992，回收率为102．2％，最低检测限为13．53μg／mL。

N-甲基氨甲酰血红蛋白加合物生物接触限值研究

目的探索我国职业接触二甲基甲酰胺(DMF)工人血液N-甲基氨甲酰血红蛋白加合物(NMHb)的生物接触限值。方法将某皮革生产企业168名DMF接触工人和30名不接触DMF的行政人员分别纳入同质暴露组和对照组,采用个体采样器采集空气并检测DMF浓度,采集研究对象血液检测NMHb浓度,并进行职业健康检查。比较两组肝功能异常率,分析DMF暴露浓度与血液NMHb浓度的相关性,提出我国NMHb生物接触限值。结果该皮革企业DMF暴露浓度为0.100~648 mg/m3,同质暴露组研究对象血液NMHb浓度为2.38~761 nmol/g Hb。同质暴露组肝功能异常检出率为50.60%,高于对照组的3.33%(P<0.001)。血液NMHb浓度与DMF暴露浓度呈对数线性关系,回归方程为lg(NMHb)=0.552 lg(DMF)+1.319(r=0.862,P<0.01);参考美国政府工业卫生医师协会DMF时间加权浓度30 mg/m3推算得NMHb为136.3 nmol/g Hb。低内暴露组(NMHb≤135 nmol/g Hb)肝功能异常检出率为42.39%,低于高内暴露组(NMHb>135 nmol/g Hb)的60.53%(P<0.05)。在DMF暴露浓度<20 mg/m3组中,93.5%职业接触劳动者血液NMHb浓度<135 nmol/g Hb。结论 DMF暴露与肝功能异常和血液NMHb浓度升高相关,建议我国NMHb生物接触限值设置为135 nmol/g Hb。

新型甾体N,N-二甲基缩氨硫腙类化合物的合成及其抗肿瘤活性

以乙醇(或甲醇为溶剂),冰醋酸为催化剂,去氢表雄酮、孕烯醇酮、雌酮和3,5-二羟基-6-甲酰基-B-降胆甾烷分别与N,N-二甲基硫代氨基脲经缩合反应,合成了4个新型的具有不同甾核结构特征的甾体N,N-二甲基缩氨硫腙类化合物(1~4),其结构经1H NMR,^(13)C NMR,IR和HR-EI-MS表征。采用MTT法测定了1~4对肝癌细胞(HepG)、人鼻咽癌细胞(CNE-2)和人肾上皮细胞(HEK-293T)的体外抑制细胞生长增殖活性。结果表明:1~3对HepG和CNE-2具有明显的抑制活性。

血液中N-甲基氨甲酰加合物作为二甲基甲酰胺职业接触标志物可行性探讨

目的探讨血液中N-甲基氨甲酰加合物作为二甲基甲酰胺(DMF)职业接触标志物可行性。方法选择不同生产部门、不同DMF接触水平的职业人群87人,不接触DMF等有机溶剂的人员22人作为对照。气相色谱-质谱法测定N-甲基氨甲酰加合物经过一系列降解后的产物3-甲基-异丙基乙内酸脲(MVH)浓度。结果各类DMF职业接触人员血红蛋白中均检出了不同含量的MVH,而对照人群均未检出。血液中N-甲基氨甲酰加合物水平与DMF接触情况呈正相关。结论血液中N-甲基氨甲酰加合物有望成为反映DMF长期接触的标志物。

气相色谱-质谱法测定二甲基甲酰胺职业接触者血液中N-甲基氨甲酰加合物

建立二甲基甲酰胺(DMF)职业接触者血液中N-甲基氨甲酰加合物测定方法。收集DMF职业接触人群血液,制备成粉末状血红蛋白,经降解、提取等步骤处理后,用GC/MS分析血液中N-甲基氨甲酰加合物降解产物3-甲基-异丙基乙内酸脲(MVH)水平。SIM模式检测,基体匹配标准外标法定量。结果显示,浓度为2～30μmol/L时相关系数为0.976,平均加标回收率为89%～93%,相对标准偏差为8.7%～9.2%,血红蛋白中MVH检出限为0.16μg/g。方法能很好地应用于DMF职业接触者血液中N-甲基氨甲酰加合物的测定。

氨氮胁迫对厌氧处理高浓度有机氮废水的影响

以实际制膜废水为例,探究了氨胁迫下高浓度有机氮废水甲烷化及微生物群落的动态响应,明确了氨抑制阈值,抑制形态,抑制机制和应对策略.结果表明,氨对AD处理高浓度有机氮废水的主要氨抑制形态为游离氨(FA),抑制阈值为(145±10)mg/L,半抑制浓度为(244±10)mg/L.在AD处理高浓度有机氮废水时,乙酸营养型产甲烷菌Methanosaeta,甲基营养型产甲烷菌Methanomassiliicoccus和Methanomethylovorans是主要产甲烷微生物.Methanosaeta和Methanomethylovorans分别在氨氮高于300mg/L和900mg/L时活性下降,同时产氢产二氧化碳相关功能微生物在FA高于140mg/L时受到抑制,使含碳数大于1的小分子有机物在系统内累积,最终导致高FA条件下化学需氧量去除率降低和氨氮释放不完全.在受到高氨抑制后,可通过调控pH值的方式实现系统的恢复,但无法通过微生物驯化的方式缓解.

二甲基甲酰胺职业接触者血中N-甲基氨甲酰加合物的测定

目的建立二甲基甲酰胺(DMF)职业接触者血中N-甲基氨甲酰加合物(NMHb)的测定方法。方法收集DMF职业接触人群血液,用分子生物技术提取法制备成血红蛋白粉末。经降解、提取等处理后,用GCMS测定血中NMHb的降解产物3-甲基-5-异丙基乙内酰脲(MVH)的水平。结果当MVH浓度在5~300μmol/L范围内,与峰面积呈线性相关,其相关系数为0.9992,平均加标回收率为92.13%~97.44%,相对标准偏差为3.78%~4.97%,检出限和定量下限分别为0.1和0.33μmol/L。结论该方法的各项性能指标都符合GBZ/T 201.5—2008,能很好地应用于二甲基甲酰胺职业接触者血中N-甲基氨甲酰加合物的测定。

UPLC-MS联用技术测定职业接触二甲基甲酰胺人群血液中N-甲基氨甲酰加合物

应用超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS)联用技术快速测定二甲基甲酰胺(DMF)职业接触者血红蛋白中N-甲基氨甲酰加合物水平,探讨DMF职业接触水平与血液N-甲基氨甲酰加合物之间的关系。选择某皮革生产企业445人为调查对象。其中以职业接触DMF的339人作为接触组,以不接触DMF及其他有机溶剂的106人作为对照组。应用UPLC-MS联用技术快速测定血液中N-甲基氨甲酰加合物的降解产物3-甲基-异丙基乙内酸脲(MVH)水平。结果显示,MVH浓度在0.01~1.0μmol/L范围内与峰面积线性关系良好,相关系数为0.999。血红蛋白中MVH检出限为10 nmol/g。随着DMF职业接触水平的增加,血液中N-甲基氨甲酰加合物浓度明显升高(P<0.01)。提示,血液中N-甲基氨甲酰加合物可作为反映DMF长期接触的标志物。UPLC-MS联用技术可应用于职业接触DMF人群血液生物标志物的快速测定。

持续性高正加速度下大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核及三叉神经节内神经活性物质蛋白表达的变化

目的研究持续性高正加速度(+Gz)下三叉神经脊束核尾侧亚核(spinal trigeminal nucleus caudal subnucleus,Vc)内P物质(substance P,SP)与N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptor antagonists,NMDAR),以及三叉神经节(trigeminal ganglia,TG)内前速激肽原A(preprotachykinin A,pp TA)、β-降钙素基因相关肽(β-calcition-generelated peptide,β-CGRP)、PN3与Na N的蛋白表达的变化。方法采用随机法选取36只SD大鼠,分为对照组(N),+5 Gz组(5 G),+10 Gz组(10 G),将各组大鼠依次固定于实验用小动物离心机。在不同+Gz数值条件下行高+Gz模拟处理程序:在+5 Gz条件下(+5 Gz峰值持续作用时间为30 s,间隔峰值为+1 Gz、60 s)持续离心5 min,每天连续离心5次,每周4 d,持续3周;在+10 Gz条件下(+10 Gz峰值持续作用时间为30 s,间隔峰值+1 Gz、60 s)保持离心5 min,每天连续离心5次,每周4 d,持续3周;对照组大鼠依照上述同样作用时间和频次,只在离心机的相同固定装置上保持固定5 min,不做任何持续高+Gz离心实验干预。实验完成后即刻取大鼠三叉神经节与三叉神经脊束核尾侧亚核,提取总蛋白,Western-Blot检测SP、NMDAR、p p TA、β-CGR P、PN3与Na N的蛋白表达。结果和对照组比较,+5 Gz组、+10 Gz组TG与Vc内的SP、NMDAR、pp TA、β-CGRP、PN3与Na N的蛋白表达明显增高(P<0.05)。结论说明在高压环境下,初级感觉神经元的生化特征发生了显著变化,这些神经活性物质在颞下颌关节疾病(temporomandibular disorder,TMD)引起的疼痛传导中发挥了非常重要的作用,表明高压环境下上述神经活性物质与颞颌关节疼痛的外周及中枢的传导作用机制密切相关。

L-苯丙氨醇在DMF-H_2O混合溶剂中的体积性质

用振动管密度计Anton Paar DMA 602测定了303.15 K下,L-苯丙氨醇在N,N-二甲基甲酰胺-水混合溶剂中的密度,计算了L-苯丙氨醇的表观摩尔体积和极限偏摩尔体积,并由此得到L-苯丙氨醇的迁移偏摩尔体积.实验结果表明,当X_(DMF)≈0.035 0和X_(DMF)≈0.3940时L-苯丙氨醇的迁移偏摩尔体积分别出现最小值和最大值.用结构贡献和结构破坏效应对结果进行了讨论.

棉氨混纺织物定量检测方法分析

文中对棉氨混纺织物的定量检测方法进行了分析。指出手工拆分法花费时间长,对于密度较大的织物试验结果会出现偏差;对于N,N-二甲基甲酰胺试剂法,使用N,N-二甲基甲酰胺在25℃处理棉氨混纺织物10 min并不能完全去除其中的氨纶;而使用N,N-二甲基甲酰胺在50℃或沸腾状态下均可以完全去除,且试验结果的误差范围符合标准规定。对比分析发现,N,N-二甲基甲酰胺试剂(50℃,10min)法比行业标准规定的N,N-二甲基甲酰胺试剂(沸腾,20 min)法,试验条件更加温和,试验时间更短,在一定程度上提高了试验效率,且不影响检测结果质量,更具有可行性。

二甲基甲酰胺职业暴露人群血清甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶、丙氨酸氨基转移酶水平与尿液N-甲基甲酰胺含量的相关性

选取某企业170名员工作为研究对象,依据其二甲基甲酰胺(DMF)暴露情况分为对照组(105人)和DMF接触组(65人)。对所有研究对象进行问卷调查并采集血样和尿样,分别检测尿液N-甲基甲酰胺(NMF)含量和血清甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶(BHMT)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平,Spearman法分析并比较血清BHMT、ALT和尿液NMF两两之间的相关性。结果显示,DMF接触组血清BHMT、ALT水平和尿液NMF含量均显著高于对照组,且三项检测指标之间的两两相关性分析均具有显著正相关。提示DMF暴露可导致机体血清BHMT、ALT水平均升高,血清BHMT与ALT水平联合检测可更好的反映DMF所致的肝损伤程度。

纤维素纤维/氨纶针织产品定量分析研究

为了准确、快速地定量分析纤维素纤维/氨纶针织产品,采用对比试验的方法分析了20%盐酸法定量分析纤维素纤维/氨纶针织产品的可行性。试验结果表明:20%盐酸法中氨纶质量修正值d=1.00;20%盐酸法试验标准偏差小于手工分解法和N,N-二甲基甲酰胺法;其试验结果较手工分解法和N,N-二甲基甲酰胺法更准确。

二甲基甲酰胺职业接触对作业工人氧化或抗氧化状态的影响

目的 探讨职业接触二甲基甲酰胺（DMF）对作业工人氧化或抗氧化状态的影响.方法 2012年5月选取某DMF生产企业104名DMF接触工人和101名对照作为研究对象,调查职业史、年龄、性别、吸烟和饮酒等信息.测定车间空气中DMF浓度.采用血红蛋白N-甲基氨甲酰加合物（NMHb）水平作为内剂量标志物,结果以NMHb降解产物3-甲基-异丙基乙内酸脲（MVH）水平表示;测定血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平反映肝功能;测定血清中超氧化物歧化酶（SOD）活力、谷胱甘肽-S转移酶（GST）活性、丙二醛（MDA）水平、3-硝基酪氨酸（3-NT）水平反映机体氧化或抗氧化状态.结果 工作岗位作业场所空气中DMF浓度在3.3～ 12.4 mg/m3范围内,并未超过国家标准.接触组MVH水平为（19.69±12.52） mg/kg,对照组未检出.接触组血清SOD活力为（125.30 ±21.23） U/ml,高于对照组[（118.35 ±18.48）U/ml,￡=-2.47,P=0.014].SOD活力随MVH水平的增加,表现出不同的变化趋势.当MVH≤24 mg/kg时,SOD活力随MVH水平的增加而增加（r =0.356,P=0.002）;而当MVH＞ 24 mg/kg时,SOD活力随MVH水平的增加反而出现了降低的趋势（r=-0.260,P =0.150）.两组人群MDA、GST、3-NT、ALT、AST的差异无统计学意义.结论 较低的DMF暴露浓度对机体的抗氧化系统存在一定程度的刺激作用,在机体能够代偿防御的范围内,并未造成明显的脂质/蛋白的过氧化损伤.