血红铆钉菇多糖对RAW264.7巨噬细胞免疫调节作用研究

目的研究血红铆钉菇多糖对RAW264.7小鼠单核巨噬细胞的免疫调节作用。方法将小鼠的巨噬细胞进行复苏培养,制备细胞悬液,设置空白对照组以及不同质量浓度的血红铆钉菇多糖(CRPS25-Ⅱ)组(1、20、40、80和160μg/ml)。采用MTT法测定血红铆钉多糖对小鼠巨噬细胞RAW264.7的细胞毒性;采用RT-PCR法检测血红铆钉菇多糖对小鼠巨噬细胞RAW264.7分泌免疫调节因子IL-6和TNF-α的影响;采用Western-blot法检测血红铆钉菇多糖对小鼠巨噬细胞RAW264.7的NF-κB信号通路中p-P65蛋白表达的影响。结果实验证明血红铆钉菇多糖在1~160μg/ml的范围内没有明显的细胞毒性,CRPS25-Ⅱ质量浓度在1~160μg/ml可提高细胞因子的分泌量,从而促进细胞因子IL-6和TNF-α的mRNA表达;CRPS25-Ⅱ可促进p-P65蛋白的磷酸化,激活NF-κB信号通路从而促进细胞的免疫调节作用,1~160μg/ml浓度范围内均可促进p-P65蛋白的增加,1~40μg/ml呈上升趋势,40~160μg/ml促进作用逐渐减弱。结论血红铆钉菇多糖对小鼠巨噬细胞无毒性,且可以促进炎症因子IL-6和TNF-α的分泌以及激活NF-κB信号通路,从而起到免疫调节作用。