内皮素与脊髓损伤后血脊屏障损害的关系

目的 :阐明内皮素 (ET)与脊髓损伤 (SCI)后血脊屏障损害的关系 ,为临床治疗SCI提供指导。方法 :SD大鼠 2 4只 ,分为 4组 ,即生理盐水组、ET 1组、损伤 +生理盐水组和损伤 +PD1 4 5 0 6 5组。实验一 :无损伤组分别于鞘内注射生理盐水或ET 1。实验二 :压迫法致伤脊髓 (5 0 g ,1min) ,分别于伤前 1 0min鞘内注射生理盐水或非选择性ET受体拮抗剂PD1 4 5 0 6 5。伊文思兰 (EB)定量法评价血脊屏障功能 ,干湿重法测定脊髓中水含量。结果 :鞘内注射ET 1 1 0ng增加了脊髓组织中EB和水含量 (P <0 0 1 ) ,SCI后脊髓中EB和水含量明显升高 (P <0 0 1 ) ,PD1 4 5 0 6 5 (5 0 μg)降低了损伤脊髓中EB和水含量 (P <0 0 1 )。结论 :ET参与SCI后血脊屏障损害 。

β-七叶皂甙钠对大鼠实验性急性脊髓挤压损伤后血脊屏障通透性改变的保护作用

目的 观察 β -七叶皂甙钠对大鼠局部脊髓损伤后血脊屏障通透性改变以及局部组织水肿抑制性的干预作用。方法 通过静脉注射偶氮蓝 (EB) ,紫外分光光度计测量其在脊髓中的含量 ,判断相邻脊髓微循环的变化。切取损伤部位脊髓组织 ,应用电子天平测量标本干、湿重量 ,根据ElliottandJasper公式计算出干预前后水含量的变化。结果 β -七叶皂甙钠预处理后 ,损伤脊髓组织的水含量及EB含量均较对照组明显降低。 结论 静脉注射 β-七叶皂甙钠能抑制由于急性挤压损伤导致的大鼠脊髓血脊屏障通透性增加并由此导致的组织水肿的形成 ,因此 β -七叶皂甙钠对于急性脊髓损伤具有潜在治疗作用。

内皮素-1对正常大鼠脊髓血流及血脊屏障的影响

目的观察外源性内皮素 -1(ET-1)对正常脊髓血流及血脊屏障的影响。方法大鼠蛛网膜下腔注射10ngET-1或生理盐水。激光多普勒血流仪监测脊髓血流 ,伊文思兰 (EB)评价血脊屏障功能。干湿重法测定脊髓中水含量。结果ET-110ng鞘内注射明显减少脊髓血流至少达4h,注射ET-115min后各时点脊髓血流与对照组比较差异有显著性意义(P<0.05),注射ET-1组脊髓中EB与水含量高于对照组 ,两者比较差异有显著性意义(P<0.01)。结论鞘内注射ET-1能引起正常大鼠脊髓缺血 ,破坏血脊屏障。

糖尿病介导的周细胞损伤对脊髓损伤后血脊屏障破坏的作用

糖尿病是一种常见的慢性代谢异常性疾病,可通过血糖异常诱导体内内环境紊乱,引起一系列急性或慢性并发症。慢性高血糖可引起大血管和微血管病变,该过程由错综复杂的分子机制协同调控,例如炎症反应、细胞内应激作用、细胞焦亡和细胞铁死亡等。糖尿病可抑制脊髓损伤后血脊屏障修复,加重神经功能损伤,从而不利于运动功能恢复。周细胞是神经血管单元的重要组成部分,参与调控血管再生、毛细血管血流量以及血脊屏障渗透性。脊髓损伤后,血脊屏障遭到破坏,周细胞覆盖率显著降低,血管正常功能受到巨大影响。糖尿病不仅参与调控周细胞的收缩表型和信号传导,而且改变周细胞分泌基因组谱,影响周细胞正常功能。此外,有研究证实,糖尿病促进脊髓损伤后周细胞丢失。本综述系统阐述了糖尿病对血管系统中周细胞的调控作用,及其介导的周细胞损伤对脊髓损伤后血脊屏障修复影响的研究进展。

双重介导脑靶向脂质体增强荷载阿霉素的体外血-脑脊液屏障渗透率

目的探讨双重介导脑靶向脂质体(RVGPR9-SSL)作为递送载体对阿霉素(doxorubicin,DOX)血-脑脊液屏障(blood brain barrier,BBB)渗透率的影响,为脑部药物递送提供新的策略。方法利用前期构建的双重介导脑靶向脂质体(RVGPR9-SSL)作为载体包载DOX(DOX@RVGPR9-SSL)。培养脑毛细血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMVEC),在体外构建BBB模型,通过4h渗漏实验、跨膜电阻值(transmembrane resistance value,TEER)测量、扫描透射电镜(scanning transmission electron microscope,SEM)观察细胞间的紧密连接等,鉴定体外BBB模型构建是否成功。在BBB模型构建成功后,利用荧光共振能量转移(fluorescence a resonance energy transfer,FRET),通过激光共聚焦显微镜,考察RVGPR9-SSL体跨越BBB后的完整性。通过对比分析脂质体给药前后,BBB的形态以及TEER值,考察RVGPR9-SSL跨越BBB后对BBB完整性的影响。通过荧光分光光度计,考察DOX@RVGPR9-SSL的BBB渗透率。结果RVGPR9-SSL的包封率为97.25%。构建的BBB模型的TEER值均>200Ω·cm 2,并通过SEM观察到BMVEC细胞排列紧密,存在着明显的紧密连接,说明体外BBB模型成功建立,可用于考察BBB渗透率。DOX@RVGPR9-SSL4h累积BBB渗透率>10%,显著高于游离DOX的4h累积BBB渗透率。给药后BBB与DOX@RVGPR9-SSL均能保持较好的完整性。结论RVGPR9-SSL可以显著提高所包载的DOX的BBB渗透率,并且具有较好的安全性,是非常有前景的脑部药物递送载体。

利多卡因通过HMGB1/RAGE信号改善缺血性卒中大鼠血-脑脊液屏障通透性研究

目的探讨利多卡因对缺血性卒中模型大鼠血-脑脊液屏障(BCFB)的影响及其机制研究.方法100只雄性健康的SD大鼠,随机分为假手术组(Sham),缺血性卒中组(MCAO),利多卡因低、中、高剂量组(Lidoc-L,M,H,1 mg·kg^(-1),5 mg·kg^(-1),10 mg·kg^(-1)).采用Longa线栓法构建中动脉缺血(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,静脉注射不同剂量的利多卡因,2 h后拔出线栓恢复缺血区血流灌注.24h后,参考Longa-Zea标准进行神经功能评分.将大鼠处死,取全脑组织分别开展脑梗死区域染色,BCFB通透性检测,脑水肿程度检测,取缺血侧脑组织分别进行mRNA与蛋白表达检测.结果与Sham组相比,MCAO组大鼠神经功能评分、脑梗死体积、透过BCFB的伊文思蓝含量与脑水肿程度明显增加(P<0.05),HMGB1与RAGE的mRNA与蛋白表达明显增加(P<0.05),凋亡蛋白Cleaved-Caspase-3、Bax蛋白表达增加(P<0.05),BCFB紧密连接蛋白Claudin-5与ZO-1蛋白表达减少(P<0.05);与MCAO组相比,Lidoc-M与Lidoc-H组大鼠神经功能评分、脑梗死体积、透过BCFB的伊文思蓝含量与脑水肿程度明显减少(P<0.05),高迁移率族蛋白B1(HMGB1)与糖基化终产物受体(RAGE)的mRNA与蛋白表达明显减少(P<0.05),凋亡蛋白Cleaved-Caspase-3、Bax蛋白表达减少(P<0.05),BCFB紧密连接蛋白Claudin-5与ZO-1蛋白表达增加(P<0.05).结论利多卡因可能通过HMGB1/RAGE信号以通路保护BCFB紧密连接完整性,发挥抗缺血性卒中作用.

血-脑脊液屏障通透性改变和术后认知功能障碍

手术等因素引起的外周炎性细胞因子升高通过血-脑脊液屏障可以导致中枢性炎症和术后认知功能障碍的发生,血-脑脊液屏障作为外周炎症向中枢传递的重要环节,其屏障作用在围术期的改变对于术后认知功能障碍的发病机制,治疗手段,预防措施具有重要意义。探讨围术期血-脑脊液屏障的结构功能的改变和干预方法。从以下4个方面进行综述,血-脑脊液屏障的构成和功能,损害血-脑脊液屏障的机制,影响围术期血-脑脊液屏障通透性的因素和血-脑脊液屏障通透性改变的干预方法。为寻找适宜的干预方法提供理论基础,对于术后认知功能障碍的预防和治疗具有潜在前景。

超声微泡技术开放脑胶质瘤血-脑脊液屏障的研究进展

血-脑脊液屏障是脑胶质瘤综合治疗药物入脑最重要的屏障结构,超声微泡技术能够有效开放血-脑脊液屏障,具有无创、可逆等独特优势。笔者通过对国内外超声微泡技术增强血-脑脊液屏障通透性实现药物进入脑组织的相关文献进行研读,阐述了超声微泡技术开放血-脑脊液屏障的安全性及其在脑胶质瘤中的研究进展。

银杏内酯注射液对老年高血压脑出血患者血-脑脊液屏障功能及神经功能的影响分析

目的 观察银杏内酯注射液对老年高血压脑出血(HICH)患者血-脑脊液屏障功能及神经功能的影响。方法 选取2020年1月至2022年8月本院收治的HICH患者82例,采用随机数字表法分为对照组和观察组各41例。对照组进行常规治疗,在此基础上,观察组进行银杏内酯注射液治疗,疗程2周。于治疗前、治疗后,比较两组治疗前、后神经功能[改良爱丁堡-斯堪的纳维亚评分(MESSS)]、血-脑脊液屏障功能[血清白蛋白(S-ALB)、脑脊液白蛋白(CSFAlb),并计算血脑屏障指数]、血清相关指标[神经元特异性烯醇化酶(NSE)、脑源性神经营养因子(BDNF)]。结果 治疗后,两组MESSS评分显著低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组S-ALB、BDNF升高,CSF-Alb、血脑屏障指数、NSE均低于治疗前,且观察组S-ALB、BDNF高于对照组,CSF-Alb、血脑屏障指数、NSE低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 银杏内酯注射液应用于老年HICH患者中,可减轻患者神经功能损伤,改善血-脑脊液屏障功能。

血清IL-1β、MMP-9与急性脑梗死患者血-脑脊液屏障损伤的相关性

目的探讨血清白细胞介素-1β(IL-1β)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与急性脑梗死(ACI)患者血-脑脊液屏障(BCFB)损伤的相关性。方法选取2020年1月至2021年6月宜宾市中医医院收治的98例ACI患者,根据脑脊液和血清白蛋白商值(QAlb)评估BCFB损伤情况,检测血清IL-1β、MMP-9水平,分析血清IL-1β、MMP-9表达与BCFB功能状况的关系。结果98例ACI患者发生BCFB损伤71例,损伤率为72.45%。BCFB损伤患者NIHSS评分、梗死体积以及血清IL-1β、MMP-9水平高于未损伤患者(P<0.05)。Logistic回归显示,NIHSS评分高、梗死体积大以及血清IL-1β、MMP-9高表达是ACI患者发生BCFB损伤的危险因素(P<0.05)。随着损伤程度的加重,血清IL-1β、MMP-9水平呈显著升高趋势(P<0.05)。ACI患者血清IL-1β、MMP-9水平与QAlb值呈显著正相关(P<0.05)。结论血清IL-1β、MMP-9水平与ACI患者BCFB损伤及损伤程度密切相关。

穿心莲内酯通过Nrf2/HO-1通路对脑出血大鼠血-脑脊液屏障的保护作用

目的探讨穿心莲内酯(andrographolide,AND)对脑出血大鼠血-脑脊液屏障(blood-brain barrier,BBB)的保护作用及机制。方法采用自体血注射法制备脑出血大鼠模型,分别1次/天灌胃给予0.9%氯化钠溶液(模型组)、尼莫地平(NMP)10mg/kg或AND低、中、高剂量(25、50、100mg/kg)进行治疗,疗程7天;另设假手术组。根据mNSS行神经功能缺失评分;测定脑血肿体积、脑含水量和BBB通透性;分光光度法检测氧化应激指标,ELISA法检测炎性细胞因子水平,Western blot法检测Claudin-5、Occludin、ZO-1、Nrf2、血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)、核因子(nuclear factor,NF)-κB、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)9表达。结果与假手术组比较,模型组神经功能缺失评分、脑血肿体积、含水量、BBB通透性升高(P<0.01);丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(tumor necrosis facter,TNF)-α水平升高,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活性降低(P<0.01);Claudin-5、Occludin、ZO-1、Nrf2、HO-1表达量降低而NF-κB、MMP9表达量升高(P<0.01)。与模型组比较,AND中、高组剂量和NMP组神经功能缺失评分、脑血肿体积、含水量、BBB通透性降低(P<0.05或P<0.01);MDA含量和IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低,SOD、CAT活性升高(P<0.05或P<0.01);Claudin-5、Occludin、ZO-1、Nrf2、HO-1表达量升高且NF-κB、MMP9表达量降低(P<0.05或P<0.01);AND高剂量组效果优于NMP组(P<0.05或P<0.01)。结论AND对脑出血大鼠BBB结构和通透性具有保护作用,可能与激活Nrf2/HO-1通路,抑制氧化应激和炎性反应、下调MMP9表达有关。

铅暴露对大鼠血脑脊液屏障通透性、分泌及转运功能的影响

目的探讨铅暴露对血脑脊液屏障通透、分泌和转运功能的影响,为铅神经毒性机制研究提供依据。方法 SD大鼠分别饮用含有0.05%,0.1%和0.2%醋酸铅饮水8周(相当于醋酸铅80,160和320 mg·kg-1)。应用激光共聚焦免疫荧光法检测血清、脉络丛和脑脊液中铅含量;Morris迷宫测试潜伏期延长和穿台次数。股动脉灌注伊文氏蓝(EB)和荧光索钠(NaFI),检测脑脊液中EB和NaFI含量;应用激光共聚焦法进行脉络丛中紧密连接黏附分子(JAM)、闭合蛋白的表达分布;ELISA方法检测血清和脑脊液中甲状腺素运载蛋白和瘦素含量。结果染铅大鼠血清、脉络丛和脑脊液中的铅含量明显上升,尤其以CSF中铅含量的增加尤为显著。水迷宫数据显示,醋酸铅160和320 mg·kg-1染毒组大鼠的潜伏期分别为52±12和(89±19)s,显著高于正常对照组的(28±7)s(P<0.05);穿台次数显著低于正常对照组(P<0.05)。3个醋酸铅染毒组大鼠脑脊液中NaFI含量分别为0.94±0.09,1.02±0.03和(1.08±0.18)mg·L-1,均显著高于正常对照组(P<0.05)。与正常对照组比较,醋酸铅160和320 mg·kg-1染毒组大鼠脑脊液中EB含量明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。激光共聚焦免疫荧光检测结果显示,醋酸铅160和320 mg·kg-1染毒组大鼠脉络丛紧密连接蛋白JAM表达分别为正常对照组的44.9%和42.9%;且闭合蛋白表达也呈下降趋势。醋酸铅320 mg·kg-1染毒组大鼠脑脊液中转甲状腺素蛋白含量为(32.3±11.7)ng·g-1蛋白,显著低于正常对照组(P<0.05)。醋酸铅160和320 mg·kg-1组大鼠脑脊液瘦素含量显著下降(P<0.05)。结论铅染毒可导致血脑脊液屏障通透性增加、分泌和转运功能下降,这可能是铅致中枢神经系统损伤的机制之一。

孕酮对局灶脑缺血再灌注大鼠血-脑脊液屏障变化的影响

目的 探讨孕酮 (PROG)减轻缺血 /再灌注 (I/ R)时脑水肿的机制。方法 采用大鼠局灶性脑 I/ R模型 ,分光光度计定量测定大脑中动脉阻塞 (MCAO) 2 h再灌注 2 2 h后脑皮层伊文思蓝 (EB)含量的变化及 PROG的影响。结果 MCAO侧 EB含量 I/ R组为 5 .89± 1.37μg/ g湿重 ,溶剂 (DMSO)组为 5 .0 3± 2 .70μg/ g湿重 ,PROG组为 2 .0 7± 0 .96μg/ g湿重 ;PROG组显著低于 I/ R组和 DMSO组 (P <0 .0 5 )。结论 PROG显著降低缺血 2 h再灌注 2 2 h时血 -脑脊液屏障 (BBB)的通透性 ,这可能是其减轻 I/

冰片对克林霉素透过小鼠血-脑脊液屏障的促进作用

目的建立高效液相色谱-质谱联用(LC/MS)定量分析方法测定小鼠脑组织中的克林霉素,采用正交实验设计分析不同剂量冰片在不同时间促进克林霉素的跨血-脑脊液屏障作用。方法灌胃给予小鼠0,150,300,600mg·kg-1冰片溶液(PEG400溶解),尾静脉注射克林霉素磷酸酯溶液40mg·kg-1,分别在15,30,45min取样,脑组织匀浆样品经碱化醋酸乙酯提取后氮吹浓缩,采用双通道选择性离子抽提测定克林霉素和内标枸橼酸芬太尼,克林霉素和枸橼酸芬太尼的选择检测离子分别为m/z425.20([M+H]+)、m/z337.30([M+H]+)。结果该法可准确测定脑组织中克林霉素的浓度。300mg·kg-1冰片灌胃在30min时克林霉素在脑组织中的浓度较高与对照组比较差异有显著性。结论该分析方法准确、快速、专一性好。冰片可以促进克林霉素进入脑组织。

脑脉通对老龄大鼠脑缺血再灌注血-脑脊液屏障损伤的保护作用

目的研究脑脉通对老龄大鼠脑缺血再灌注(I/R)血-脑脊液屏障(BBB)损伤的保护作用。方法采用线栓法复制局灶性脑缺血模型,分为假手术组、模型组、脑脉通组、尼莫地平组,后3组又分为脑缺血(I)3 h和I/R 6、12、24 h、3、6 d时间点。观察脑组织含水量、病理变化、免疫球蛋白(IgG)表达。结果模型组脑组织含水量升高,IgG漏出增加,BBB通透性增加。脑脉通降低脑组织含水量(I/R 24 h、3 d)、减少IgG漏出(I/R 24 h^6 d)、降低BBB通透性。结论脑脉通改善I/R脑损伤作用显著,其机制可能与改善BBB通透性、降低脑水肿有关。

铅暴露对体外血脑脊液屏障功能及ZO-1和闭合蛋白表达的影响

目的通过建立体外血脑脊液屏障(BCB)模型,研究铅诱导BCB损伤的可能机制。方法使用Z310细胞建立BCB体外细胞模型,分别加入Pb(AC)22.5,5.0和10.0 mmol·L-1,暴露24,48和72 h。采用跨内皮电阻(TEER)检测法及葡聚糖法检测BCB模型通透性;Western蛋白印迹法和免疫荧光法检测BCB中紧密连接蛋白ZO-1和闭合蛋白表达及分布。结果与细胞对照组相比,Pb(AC)22.5,5.0和10.0 mmol·L-1暴露48 h对Z310细胞存活率和密度均无明显影响。暴露后第12天,与细胞对照组比较,Pb(AC)25.0和10.0 mmol·L-1组TEER值明显降低(P<0.05),葡聚糖通过率显著增高(P<0.05)。Western蛋白印迹法和免疫荧光法检测结果显示,与细胞对照组相比,Pb(AC)2各浓度暴露48 h后,ZO-1和闭合蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论铅暴露能够破坏BCB模型的通透性,其机制可能与抑制紧密连接蛋白的表达有关。

促红细胞生成素通过早产儿血脑脊液屏障的观察

目的研究外源性重组人促红细胞生成素(rhu—EPO)能否通过早产儿血脑脊液屏障。方法将胎龄28-35周、体质量<2500g的早产儿随机分为治疗组20例,对照组16例。治疗组给予rhu-EPO750IU/(kg·周).3次/周,隔日1次,疗程2周;对照组按早产儿常规治疗。用酶联免疫法测两组早产儿治疗前后血清、脑脊液EPO浓度。结果1.治疗组治疗2周后血清、脑脊液EPO浓度均明显高于对照组(P均<0.01)。2.治疗组治疗前后血清、脑脊液EPO浓度相比,治疗后明显高于治疗前(P<0.01)。3.对照组血清、脑脊液EPO浓度在2周后同出生时相比均有所降低,但无显著差异(P>0.05)。结论外源性应用rhu—EPO能通过早产儿血脑脊液屏障。

丁苯肽对慢性低灌注大鼠血-脑脊液屏障保护作用的研究

目的:观察慢性低灌注大鼠血-脑脊液屏障(BBB)通透性的变化及丁苯肽对其通透性的影响。方法:Wistar大鼠144只,双侧颈总动脉结扎方法制作慢性低灌注模型,随机分为假手术组,缺血组和丁苯肽组,各48只,于术后7、14、306、0 d(每时间点12只)比较各组大鼠脑组织BBB通透性。结果:伊文思蓝染色显示缺血组7 d亚组大鼠脑组织伊文思蓝含量显著高于假手术组(P<0.01),高于丁苯肽组(P<0.05),缺血组14 d亚组大鼠脑组织伊文思蓝含量高于假手术组和丁苯肽组(P<0.05),30 d、60 d亚组大鼠脑组织伊文思蓝含量在各组间差异无统计学意义。结论:慢性低灌注状态下,大鼠的BBB通透性增高,丁苯肽可缓解BBB通透性的增高。

炎症和高渗溶液对莫西沙星透过血-脑脊液屏障影响的研究及疗效评价

目的:探讨炎症以及高渗溶液对血-脑脊液屏障通透性的影响。方法:比较健康小鼠与结核性脑膜炎小鼠模型脑组织中莫西沙星的含量,以及利用自身对照的方法,测定患者不用和用甘露醇后脑脊液中莫西沙星含量的变化。结果:当炎症存在时,莫西沙星进入脑组织的含量增加,药物的药-时曲线下面积(AUC)增加了21.5%,经t检验,P<0.05,有显著性差异;药效学试验表明在单药治疗8周后,脑组织中活菌计数(cfu)降低,经t检验,P<0.05,有显著性差异,具有统计学意义;患者在口服莫西沙星2h后给予甘露醇,使得药物在脑脊液的含量增加了1～4倍。结论:在炎症和(或)高渗溶液存在情况下,药物透过血-脑脊液屏障的量将增加。

桂皮醛对局灶性脑缺血小鼠血-脑脊液屏障的保护作用及抗炎作用

目的 探讨桂皮醛(CA)对局灶性脑缺血小鼠血-脑脊液屏障(BBB)的保护作用及抗炎症损伤作用。方法 采用成年健康雄性CD-1小鼠,随机分为大脑中动脉闭塞(MCAO)组和CA干预(CA50)组。依据改良线栓法建立小鼠右侧永久性大脑中动脉闭塞(MCAO)模型。术后的24h评估神经功能缺损,脑梗死体积及脑组织含水量,并应用伊文思蓝渗透性评价BBB的通透性,应用Western-blot法及明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达及活性,应用实时荧光定量PCR法测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL-1β)及单核细胞趋化因子(MCP-1)在脑组织中的表达。结果 与MCAO组相比,CA干预组(50mg·kg-1)的BBB通透性显著改善,神经功能缺损评分、脑组织含水量、脑梗死体积、MMP-9蛋白表达和活性、炎症递质TNF-α、IL-1β及MCP-1mRNA水平显著降低(P<0.05)。结论 CA能够降低局灶性脑缺血小鼠BBB通透性及减轻神经炎症。