补阳还五汤对线栓大鼠模型脑损伤和血脑屏障通透性的影响

目的:观察补阳还五汤对线栓大鼠模型脑损伤和血脑屏障通透性的影响。方法:通过线栓法建立大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,分为MCAO组(生理盐水)、补阳还五汤组(灌胃补阳还五汤)、血塞通组(尾静脉注射血塞通)及联合组(补阳还五汤+血塞通),另设假手术组(生理盐水)。评估大鼠行为学,检测血清中枢神经特异性蛋白(S-100β)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)及脑组织伊文思蓝(EB)含量、Wnt3a、β-连环蛋白(β-catenin)、水通道蛋白-4(AQP-4)、紧密连接相关蛋白(Claudin-5)mRNA和蛋白表达。结果:与MCAO组比较,补阳还五汤组、血塞通组及联合组神经功能评分、贴纸去除时间及S-100β、NSE、EB含量、AQP-4 mRNA和蛋白表达量均降低,且联合组最低,Wnt3a、β-catenin、Claudin-5 mRNA和蛋白表达量均升高,且联合组最高(P<0.05)。结论:补阳还五汤可减轻MCAO大鼠脑损伤,降低血脑屏障通透性,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。

桃红四物汤对脑缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障通透性的保护作用及机制

目的观察桃红四物汤对脑缺血再灌注损伤的治疗作用,以及其对血脑屏障的保护作用和机制。方法建立左侧大脑中动脉阻塞模型,将大鼠随机分为假手术组、模型组、桃红四物汤组和尼莫地平组。采用Longa评分法观察大鼠神经功能损伤程度,行为学实验观察大鼠的运动神经功能,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色法观察大鼠脑梗死面积,苏木精—伊红染色观察大鼠缺血侧脑部皮质组织病理变化,干湿法测定脑含水率,伊文思蓝(Evans blue,EB)灌注染色法检测血脑屏障通透性,透射电子显微镜观察血脑屏障紧密连接超微结构,免疫组织化学法检测脑组织紧密连接蛋白occludin、胞质附着蛋白-1(zona occludens-1,ZO-1)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotein-9,MMP-9)表达水平。结果大鼠神经功能损伤程度与运动神经功能经桃红四物汤给药后呈现改善的趋势。TTC结果显示,与模型组比较,桃红四物汤与尼莫地平组大鼠脑梗死面积明显减少(P<0.05)。苏木精—伊红染色显示,与模型组比较,桃红四物汤与尼莫地平组大鼠脑皮质组织神经元细胞质浓缩,核固缩、分裂或溶解,细胞排列紊乱,层次不清晰的情况得到改善。与模型组比较,桃红四物汤与尼莫地平组大鼠脑含水率、脑出血性转化程度以及EB渗出量显著降低(P<0.05)。免疫组织化学检测结果显示,与模型组比较,桃红四物汤组大鼠脑梗死区occludin、ZO-1蛋白表达水平显著升高,MMP-9表达水平显著降低(P<0.05)。透射电子显微镜观察发现,模型组大鼠血脑屏障紧密连接明显受损,桃红四物汤组和尼莫地平组大鼠血脑屏障紧密连接损伤明显改善。结论桃红四物汤可改善脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能,缩小梗死面积及减轻脑水肿。其作用机制可能与改善血脑屏障紧密连接超微结构,减少紧密连接相关蛋白表达,进而降低血脑屏障通透性有关。

缺血预处理对脑缺血血脑屏障通透性和MMP-9表达的影响

目的 研究缺血预处理 (IP)对再缺血脑组织血脑屏障通透性和MMP 9表达的影响。方法 3组SD大鼠分别给予 :①一侧颈内动脉注射生理盐水 (SI) ;②双侧颈总动脉夹闭 (BCAO) ;③双侧颈总动脉夹闭同时一侧颈内动脉注射生理盐水 (BS)处理。 2 4h后 ,应用动脉腔内线栓法作大脑中动脉阻断 (MCAO) ,观察 3种预处理对再缺血脑组织含水量、血脑屏障 (BBB)通透性和MMP 9表达的影响。结果 缺血 2 4和 48hBS组脑含水量均值分别为 82 .92 %和 83.12 % ,SI组和BCAO组分别为 85 .2 9%、85 .96 %和 86 .17%、85 .5 8% ;缺血 2 4和 48hBS组脑EB含量均值分别为 14.0 1和 11.74μg/mm3 ,明显低于SI和BCAO组 (P <0 .0 1) ;BS组MMP 9mR NA和蛋白水平的表达水平明显低于其他两组 (P <0 .0 1)。结论 诱导脑缺血耐受的BS预处理能明显减轻再缺血性脑水肿和BBB损伤 ,降低MMP

炎症介质在高原暴露下血脑屏障通透性改变中的作用及相互关系

目的:探讨炎症介质在高原暴露下血脑屏障通透性改变中的作用及与脑含水量的关系。方法:应用放射免疫法测定脑组织内TNFα、ET含量,化学法测定脑内NO含量,应用伊文思蓝(EB)透过率测定血脑屏障(BBB)通透性,脑湿干比重法测定脑含水量百分率。结果:高原暴露下,大鼠脑内TNFα、ET、NO含量随着海拔增高而逐渐增高,随着暴露时间延长而逐渐增高,以暴露于5000m的高海拔区第9d增高最明显。与此同时,脑内EB含量和脑内含水量逐渐增高。脑内TNFα、ET、NO含量与脑含水量之间有明显的正相关关系。结论:TNFα、ET、NO在BBB通透性增高中起了重要作用,是高原环境下BBB通透性增高的重要因素。

白矾中的铝在正常及血脑屏障通透性升高小鼠血、脑内的分布

目的：研究正常及血脑屏障通透性升高小鼠腹腔注射白矾后的血、脑铝含量。方法：原子吸收分光光度法测小鼠血、脑铝含量；用尾静脉注射戊四氮造成小鼠血脑屏障通透性升高模型。结果：正常小鼠只有腹腔注射（ｉｐ）１ｇ／ｋｇ白矾组，脑铝含量比对照组增加１０７％；而戊四氮致血脑屏障通透性升高小鼠ｉｐ０．２５，１ｇ／ｋｇ白矾后，脑铝含量均分别高于对照６７．７％和１９７．１％。结论：说明白矾中的铝在ｉｐ大剂量（１ｇ／ｋｇ）时可进入小鼠脑中，由戊四氮引起小鼠血脑屏障通透性升高对铝进入脑中有促进作用。

900MHz电磁辐照对大鼠学习记忆能力和血脑屏障通透性的影响

目的研究900 MHz电磁辐照对大鼠学习记忆能力、血脑屏障通透性和脑组织超微结构的影响。方法 48只健康成年雄性SD大鼠分为辐照14 d组(EMF 14 d组)、辐照28 d组(EMF 28 d组)、假辐照14 d组(Sham 14 d组)和假辐照28 d组(Sham 28 d组)4组,每组12只。辐照组分别连续暴露于900 MHz电磁波(功率密度为1 mW/cm2)14 d和28 d,3 h/d。Morris水迷宫观察大鼠神经行为学,血清白蛋白免疫组化观察海马神经元受损情况和反映血脑屏障通透性变化,透射电镜观察组织超微结构。结果 Morris水迷宫实验结果显示EMF 28 d组通过目标象限百分比和穿越平台次数明显少于其他组(P<0.05)。900 MHz电磁辐照后,与假辐照组(0 mW/cm2)相比,辐照组(1 mW/cm2)血清白蛋白在脑内高表达(P<0.05)。透射电镜结果显示辐照组较多神经元损伤,血脑屏障结构破坏。结论 900 MHz电磁辐照可致大鼠学习记忆能力下降,增加血脑屏障通透性,造成海马神经元的损伤,其与微波辐照的时间可能有一定的关系。

丁苯酞对脑缺血再灌注损伤大鼠MMP-9活性和血脑屏障通透性的影响

目的探讨丁苯酞对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用。方法通过线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,腹腔注射丁苯酞,于脑缺血再灌注后6h、12h、24h后用免疫组织化学的方法观察损伤侧脑组织MMP-9活性及基底膜成分Ⅳ型(collagenⅣ)胶原表达的变化。同时测定伊文思兰的含量观察损伤侧脑组织血脑屏障通透性。结果随缺血再灌注时间延长,MMP-9活性、EB含量逐渐增加,24h达峰,Ⅳ型胶原的表达逐渐减少,各组之间表达均具有统计学意义(P<0.05);丁苯酞处理组MMP-9活性、EB含量各个时间点明显低于缺血再灌注组,相同时间点Ⅳ型胶原的表达增加(P<0.05)。结论丁苯酞可抑制脑缺血再灌注损伤大鼠MMP-9的表达,增加基底膜Ⅳ型胶原的表达,降低血脑屏障通透性,从而发挥脑保护作用。

大鼠实验性脑出血后水通道蛋白4 mRNA表达与血脑屏障通透性的关系

目的 研究大鼠脑出血后水通道蛋白4mRNA表达与血脑屏障通透性的关系。方法 采用自体非抗凝动脉血注入尾状核法制作大鼠脑出血模型，逆转录聚合酶链反应法观察水通道蛋白4mRNA的表达，伊文思兰法检测血脑屏障通透性，干湿重法计算脑含水量以代表脑水肿情况。结果 与对照组比较，脑出血组水通道蛋白4mRNA表达6h即开始升高（1．06±0．12），3天时达到高峰（1．34±0．14），7天时仍高于正常组（P〈0．05）；血脑屏障通透性于出血后6h开始升高（0．5955±0．0956），1天-3天最高（0．8889±0．0968、0．7914±0．0520），5天-7天逐渐降低（P〈0．05）。水通道蛋白4mRNA表达与血脑屏障通透性呈显著正相关（r=0．686，P〈0．01），与脑水肿变化趋势相一致。结论 脑出血后可能通过上调水通道蛋白4mRNA表达，增加血脑屏障通透性，参与脑水肿形成。

大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障通透性的改变

目的探讨大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障(BBB)通透性的改变。方法采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,通过测定脑组织中伊文蓝(EB)含量及免疫组化法来观察血脑屏障通透性的改变。结果缺血2h再灌注3h,BBB通透性开始增加,24h达高峰,72h后明显减弱。结论缺血再灌注后BBB的通透性在24h内逐渐增加,提示脑梗死超早期给予溶栓是可行的。

氧自由基在高原暴露下血脑屏障通透性改变中的作用及其与高原脑水肿的关系

目的 观察高原环境暴露下脑内氧自由基与脑含水量的变化，探讨氧自由基在高原脑水肿血脑屏障改变中的作用。方法 取不同海拔梯度下小鼠脑组织匀浆化学法测定脑内SOD、MDA、GSH和GSH-PX活性，比色法测定脑组织内伊文思蓝（EB）含量，湿干比值法测定脑含水量。结果 高原暴露下，小鼠脑内SOD、MDA、GSH活性是随着海拔增高而逐渐增高，随着时间延长而逐渐增高，以暴露于5000m的高海拔区第7-9d增高最明显，而GSH-PX则相反。与此同时，脑内EB含量和脑内含水量逐渐增高。脑内氧自由基活性与脑内EB含量和脑含水量之间有明显的正相关关系。结论 氧自由基在高原脑水肿形成中起了重要作用，是高原环境下血脑屏障通透性增高的重要因素。

金纳多对脑缺血再灌注损伤大鼠MMP-9活性和血脑屏障通透性的影响

目的探讨金纳多对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,将成模大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、金钠多治疗组,各组按缺血再灌注6、12、24 h三个时间点分为3个亚组,每组10只。用RT-PCR方法测定损伤侧脑组织中MMP-9活性变化,用伊文思蓝方法测定同侧脑组织血脑屏障通透性。结果 (1)随缺血再灌注时间延长,MMP-9含量、EB含量开始逐渐增加,各组之间表达差异均具有统计学意义(P<0.05)。(2)金纳多治疗组MMP-9活性及EB含量各个时间点明显低于缺血再灌注组(P<0.05)。结论金纳多通过抑制脑缺血再灌注大鼠MMP-9的活性,减轻血脑屏障通透性,可能是其发挥脑保护作用的机制之一。

脑表面大体摄影评价小鼠局灶性脑缺血后24h内血脑屏障通透性变化

目的:建立脑表面大体摄影结合图像分析的方法,观察小鼠局灶性脑缺血后24 h内血脑屏障通透性的变化。方法:采用线栓法诱导小鼠局灶性脑缺血,于缺血后10、30 m in和1、3、6、12、24 h取脑,用数码相机拍摄全脑及脑切片照片,观察脑表面和切面的出血和伊文思蓝(EB)渗出,以及血脑屏障通透性变化;并用荧光法测定脑内EB含量,以干湿重法检测脑水分含量。结果:脑表面图像分析显示,缺血后3 h开始出现明显的出血和EB渗出,与脑切片的结果一致,具有较好的相关性;荧光法显示缺血后30 m in缺血侧脑组织EB含量开始增高,缺血后1 h脑水分含量开始增加。结论:脑表面大体摄影结合图像分析,可对局灶性脑缺血后血脑屏障通透性的变化进行半定量评价,还发现脑缺血后早期血脑屏障的通透性就有增加。

基于分子参数的血脑屏障通透性预测模型

目的建立血脑屏障通透性的定量预测模型,并确定药物通过血脑屏障的主要影响因素。方法选择190个化合物作为数据集,采用主成分分析和多元线性回归分析相结合的方法,使用10个分子结构参数建立数学模型。结果与结论所得模型统计结果良好(R2:0.642,SEE:0.496),应用于检验集时结果也比较令人满意(R2:0.642,SEP:0.495),模型表现出一定的可靠性和预测性。同时确定了对血脑屏障通透性影响较大的分子参数,这些参数及所建模型有助于指导进一步的新药筛选和开发。

鼠脑液压伤后血脑屏障通透性变化对磷脂酶A_2和脑水肿的影响

目的：研究颅脑损伤早期血脑屏障通透性（ＢＢＢＰ）、磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）与脑水肿的改变及其相关关系；以及地塞米松和尼莫地平治疗的影响。方法：应用鼠脑液压伤模型，观测伤后不同时间伊文氏蓝在伤侧脑组织内吸光度变化、ＰＬＡ２和脑含水量改变；并观测经腹腔注射地塞米松和尼莫地平后上述指标的改变。结果：液压伤后１小时伤侧脑组织伊文氏蓝吸光度开始升高，伤后６小时至峰值，随后逐渐降低，伤后１２小时～７２小时仍维持在高于对照组１倍以上的水平；ＰＬＡ２于液压伤后１小时发生改变，１２小时～２４小时达峰值，４８小时～７２小时仍高于对照组；脑含水量在伤后２４小时～７２小时呈阶梯状升高；创伤早期ＢＢＢＰ的改变程度较ＰＬＡ２和脑含水量明显；ＢＢＢＰ与ＰＬＡ２和脑含水量均呈正相关。结论：①创伤早期ＢＢＢＰ增加是由脑血管功能紊乱和机械物理损伤所致，也是ＰＬＡ２升高和血管源性脑水肿形成的诱因；②创伤后２４小时～７２小时ＰＬＡ２的升高，导致细胞毒性脑水肿，促使血脑屏障结构破坏，ＢＢＢＰ增加，脑继发性损伤加重，３者间呈互相增强作用；③早期应用大剂量地塞米松和尼莫地平治疗对抑制ＰＬＡ２的活性。

尼莫地平对脑缺血再灌注后大鼠血脑屏障通透性的影响

目的 研究尼莫地平对脑缺血再灌注后大鼠血脑屏障 (BBB)通透性的影响。方法 采用线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞的局灶性脑缺血模型。缺血 1h后再灌注 ,分别于缺血前及再灌注后静脉注射尼莫地平。采用免疫组织化学 SABC法 ,观察再灌注 12 h时 ,内源性免疫球蛋白 G(Ig G)在脑组织中的表达 ,比较缺血前注射尼莫地平组、未注射尼莫地平组及再灌注后注射尼莫地平组三组大鼠脑组织中 Ig G的表达水平。结果 未注射尼莫地平组大鼠 ,在再灌注 12 h时 ,缺血侧大脑半球纹状体及新皮层可见广泛的 Ig G表达。再灌注后注射尼莫地平组大鼠 ,Ig G的表达更加明显。缺血前注射尼莫地平组大鼠 ,Ig G的表达在新皮层仅见于微血管壁内 ,在纹状体可见局灶性 Ig G的表达。结论 脑缺血再灌注后注射尼莫地平可加重 BBB的损伤 ,使其通透性增加。缺血前注射尼莫地平 ,可使再灌注后 BBB的损伤减轻。

血管紧张素1-7对蛛网膜下腔出血后血脑屏障通透性的保护作用

目的分析血管紧张素Ang-(1-7)对蛛网膜下腔出血(SAH)后血脑屏障通透性的作用及机制。方法枕大池二次注血法制备SAH大鼠,伊文思蓝(Evans blue)检测Ang-(1-7)处理后SAH大鼠血脑屏障通透性及脑组织含水量;实时荧光定量PCR(RT-PCR)与蛋白免疫印迹法(Western blot)分析脑组织黏连蛋白ICAM-1、VCAM-1的表达。人工血性脑脊液(BCSF)刺激血管内皮细胞(HBMEC),检测细胞通透性及细胞增殖与凋亡情况。结果 Ang-(1-7)可降低SAH大鼠脑组织中Evans blue渗透量及脑组织含水量,具有剂量和时间依赖性,以10^(-5) mol/L Ang-(1-7)处理24h时变化最为显著,SAH大鼠脑组织中ICAM-1、VCAM-1表达水平显著上调。同时Ang-(1-7)作用的BCSF刺激的血管内皮细胞中Evans blue的渗透量明显减少,ICAM-1、VCAM-1的表达水平及细胞增殖活力显著增加,细胞凋亡减少。结论 Ang-(1-7)具有保护蛛网膜下腔出血后血脑屏障通透性作用。

通窍活血汤对脑缺血再灌注小鼠血脑屏障通透性及脑内单胺类神经递质含量的影响

目的观察通窍活血汤(TQHXD)对脑缺血再灌注损伤小鼠血脑屏障(BBB)通透性及脑组织中单胺类神经递质的影响。方法将昆明种小鼠随机分为假手术组,模型组,尼莫地平组,脑脉泰组,通窍活血汤低、中、高剂量组(分别为3.85,7.7,15.4g·kg-1)。于给药第7天采用双侧颈总动脉结扎法制造急性脑缺血再灌注模型,通过测定渗出脑血管外的伊文思蓝含量分析药物对BBB通透性的影响,及采用酶联免疫法(ELISE)测定脑组织中单胺类神经递质去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)的含量。结果 TQHXD各剂量组均能降低小鼠脑中伊文思蓝的含量,且均能阻止脑损伤后单胺类神经递质的降低。结论 TQHXD对脑缺血再灌注模型小鼠有一定的保护作用。

异丙酚对成年大鼠血脑屏障通透性的影响

目的 观察静脉输注不同剂量异丙酚对大鼠血脑屏障 (BBB)通透性的影响。方法 30只成年大鼠随机分为三组 :对照组 (C组 ,不用全麻药 ,n =6 ) ,异丙酚 70mg·kg-1·h-1组 (P1组 ,静脉注射异丙酚 2 0mg/kg继以静脉输注 5 0mg·kg-1·h-11小时 ,n =12 ) ,异丙酚 12 0mg·kg-1·h-1组 (P2组 ,静脉输注异丙酚 12 0mg·kg-1·h-11小时 ,n =12 )。取脑做EB染色观察、镧醛灌注后电镜观察及HE染色光镜观察。结果 P1、P2组EB染色、HE染色及电镜观察结果与C组相比均无明显差别。结论 本实验结果提示 ,静脉输注产生脑电图爆发抑制剂量的异丙酚 (70mg·kg-1·h-1)及更大剂量(12 0mg·kg-1·h-1) 1小时 ,虽然后者产生明显的循环抑制 ,但两者均未增加大鼠BBB对大分子 (EB 白蛋白 )和小分子 (镧离子 )的通透性 ,对中枢神经系统形态也无明显影响。

复方红花饮对大鼠脑挫裂伤后血脑屏障通透性和SOD、MDA水平影响的实验研究

目的通过大鼠脑挫裂伤后对血脑屏障通透性和SOD、MDA水平的影响,观察复方红花饮对大鼠脑挫裂伤的作用。方法 SD大鼠随机分为假手术组、模型组、治疗组(予复方红花饮),每组10只。采用自由落体打击法制备大鼠脑挫裂伤模型,观察各组在6 h、24 h、72 h、7 d不同时间点脑组织中EB含量、SOD活力和MDA含量。结果治疗组在6 h、24 h、72 h能显著降低伊文思蓝含量,在6 h、24 h、72 h、7 d能显著升高SOD活力,在24 h、72 h、7 d能显著降低MDA含量,与模型组比较具有显著差异(P<0.05或P<0.01)。结论复方红花饮对大鼠脑挫裂伤后具有抑制脑挫裂伤后血脑屏障的过度开放和明显抗氧化作用。

七氟醚对成年大鼠血脑屏障通透性的影响

为观察不同浓度七氟醚对大鼠血脑屏障 (blood brainbarrier,BBB)通透性的影响 ,将 30只成年大鼠随机分为对照组、七氟醚 1MAC(肺泡气最低有效浓度 ,minimalalveolarconcentration)及 1 5MAC组 (各维持呼气末浓度在 2 2 %及 3 3% ,1h)。实验结束前静脉注射伊文思蓝 (EB)溶液 ,取脑做EB染色观察、镧醛灌注后电镜观察及HE染色光镜观察。结果显示吸入 1MAC和 1 5MAC的七氟醚均未增加大鼠BBB对大分子 (EB 白蛋白 )和小分子 (镧离子 )的通透性 ,对中枢神经系统形态也无明显影响。