LC-MS/MS法测定肿瘤患者血浆中帕米帕利浓度

目的建立液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)法测定肿瘤患者血浆中帕米帕利浓度的方法。方法使用乙腈沉淀血浆蛋白,以呋塞米为内标,采用LC-MS/MS测定帕米帕利的血药浓度。采用GL Sciences ODS-4色谱柱,以含0.1%甲酸水溶液为流动相A,甲醇为流动相B,进行梯度洗脱,流速为0.25 mL·min-1,柱温35℃,进样量为2μL;采用电喷雾离子源,负离子扫描,多反应监测模式,用于定量分析的帕米帕利离子对为m/z 297.3→253.1。结果帕米帕利检测质量浓度的线性范围为100~10000 ng·mL-1(r=0.9954),定量下限为100 ng·mL-1;批内和批间准确度在92.0%~106.5%之间,批内和批间精密度均小于8.3%,基质效应、稳定性、选择性、残留均符合指导原则要求。临床患者帕米帕利体内随机血药浓度在330~1693 ng·mL-1之间。结论所建方法操作简便、快速,可用于帕米帕利的血药浓度测定。

高原环境下LC-MS/MS法测定利福平血浆浓度及临床应用

就当前的发展情况而言,根据利福平药物浓度测定的经典方法,采用SCIEX QTRAP色谱质谱联用法(LC-MS/MS)对我院55例患者使用利福平药物进行测定。结合文献进行比较于分析,结果显示测定浓度与平原地区推荐目标值有较大的差异,建议在西藏高原地区,对于治疗效果不佳的患者,通过TDM来调整用药方案是非常必要的。本研究旨在高原环境下建立简便、可靠的液相色谱-串联质谱(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)分析方法,检测人血浆中RFP的血药浓度,建立高原缺氧环境下利福平LC-MS /MS药物浓度监测方法,研究高原缺氧环境RFP在体内药物代谢动力学特征,可以帮助临床医生在考虑患者的生理特征和药物特征的情况下,优化治疗方案,减少治疗失败和不良反应风险。

LC-MS/MS法测定人血浆中比阿培南浓度

目的 建立LC-MS/MS法测定人血浆中比阿培南的浓度。方法 以法罗培南为内标、乙腈溶液沉淀蛋白并稀释后进样分析。色谱柱为Kinetex HILIC(2.1 mm×50 mm,2.6μm),流动相为0.1%甲酸-水(含10 mmol·L^(-1)乙酸铵)和95%乙腈-水(含10 mmol·L^(-1)乙酸铵),梯度洗脱,进样量为5μL,流速为0.4 mL·min^(-1),分析时间为5 min。采用电喷雾离子源(ESI),正离子多反应监测(MRM)模式扫描,用于定量分析的离子对分别为m/z351.0→110.0(比阿培南)、m/z 308.0→178.0(内标法罗培南)。结果 比阿培南在0.20~50.00μg·mL^(-1)与峰面积线性关系良好(r≥0.9950),准确度为97.80%~111.25%,批内和批间精密度RSD均<15%。提取回收率为80.25%~84.11%,基质效应为109.19%~117.91%。血浆样品室温放置1 h,4℃冰箱放置6 h,-80℃冰箱放置14 d,经过3次冻融循环及处理好的样本于自动进样器(15℃)中放置6 h后,均符合生物样本分析的要求。应用本研究方法测定15例发生感染并使用比阿培南患者的血浆谷浓度,测得比阿培南谷浓度为0.30~11.82μg·mL^(-1)。结论 该法专属性强,准确度和重现性好,分析效率高,适用于比阿培南的临床治疗药物监测。

LC-MS/MS法测定桃红四物汤中芍药苷的含量

目的建立LC-MS/MS测定桃红四物汤中芍药苷含量的方法。方法色谱分离采用Agilent Eclipse Plus C_(18)(2.1 mm×50 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇和水(含0.1%甲酸),梯度洗脱。质谱采集选用ESI负离子及多反应监测模式。结果芍药苷在0.1~50μg/ml范围内线性关系良好,专属性、回收率、精密度、均一性均符合要求。结论本法专属性强、灵敏度高、分析时间短,可作为桃红四物汤中芍药苷的含量测定。

HPLC-MS法测定犬血浆中三七皂苷R_1的血药浓度及其药代动力学

目的:建立用于测定三七皂苷R1血药浓度的液相色谱-质谱联用分析方法,并研究三七皂苷R1在犬体内的药代动力学.方法:Beagle犬6只iv0.7131 mg·kg-1三七皂苷R1后采集系列血样,利用LC-MS联用系统测定血浆药物浓度,并用3P97软件拟合求算药代动力学参数.结果:三七皂苷R1浓度在5.0～2 000μg·L-1内,线性关系良好(γ=0.9996).绝对回收率高于90%,日内、日间RSD均小于15%,符合生物样品分析要求.6只Beagle犬iv 0.7131 mg·kg-1三七皂苷R1后的血药浓度-时间曲线符合二室模型,其分布和消除相的半衰期分别为38.59 min和230.06min.曲线下面积(AUC)、中央室分布容积(V)和血浆清除率(CL)分别为67353.75 mg·min·ml-1,3.53 L·kg-1和0.1068L·kg-1·min-1.结论:建立的LC-MS联用方法专属性强,灵敏度高,可用于三七皂苷R1的体内定量分析.

LC-MS/MS法测定人血浆中阿哌沙班的浓度

目的建立LC-MS/MS法测定人血浆中阿哌沙班的浓度。方法以阿哌沙班-^(13)C-d_(3)为内标,血浆经乙腈沉淀蛋白后,采用Poroshell 120 EC-C_(18)(4.6 mm×50 mm,2.7μm)色谱柱分离,以5%乙腈水溶液为流动相A,乙腈为流动相B,流速0.7 mL·min^(-1),线性梯度洗脱,电喷雾离子化源(ESI)正离子模式,以选择反应监测(SRM)模式监测阿哌沙班(m/z 460.08→443.17)和内标阿哌沙班-^(13)C-d_(3)(m/z 464.08→447.08)。结果人血浆中的阿哌沙班标准曲线方程为Y=2.303X+0.121(R^(2)=0.994),经验证阿哌沙班在0.500~200ng·mL^(-1)内线性关系良好。结论本法操作灵敏简便,具有可靠性,可用于阿哌沙班人体内血药浓度的测定及药代动力学和生物等效性研究。

基于LC-MS/MS方法的大鼠血浆中舒必利的血药浓度检测及药代动力学研究

目的建立一种LC-MS/MS方法用于大鼠血浆中舒必利血药浓度的测定及其药代动力学研究。方法血浆样本经过液液萃取方法处理后,采用电喷雾离子化(ESI),正离子多重反应监测模式(MRM)。舒必利和奥美拉唑用于定量分析的离子对为m/z 342.2→112.2和346.4→198.1。色谱柱为Hedera ODS-2柱(150 mm×2.1 mm,5μm),流动相是甲醇(含0.1%甲酸)-水(0.05%甲酸铵和0.1%甲酸),按照等度洗脱方式(7∶3,V/V)进行。结果该方法的定量下限是0.5 ng·mL^(-1),舒必利在0.5~200 ng·mL^(-1)内与峰面积比值线性关系良好,舒必利和内标奥美拉唑的提取回收率在70%~80%,批间和批内精密度均小于15%,方法学验证的结果符合生物样本分析指导原则要求。结论建立的LC-MS/MS方法特异性强,分析时间短,适用于大量生物样本的检测,成功应用于大鼠血浆样本的药代动力学研究,可为舒必利的临床药物浓度监测方法的开发提供参考。

LC-MS测定白桦脂酸在大鼠体内的血药浓度

建立LC-MS检测大鼠血清中白桦脂酸浓度的方法。取内标物齐墩果酸,加100μL血清,乙酸乙酯萃取,取上清液以氮气吹干,乙腈复溶,进样1μL,在电喷雾离子源下进行负离子检测(SIM)分析。色谱柱为BEHC18柱(2.1mm×50mm,1.7μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液(62:38)。白桦脂酸和内标物的质荷比(m/z)均为455.4。白桦脂酸在3.328~832ng·mL^-1内线性良好,检出限为3.328ng·mL^-1,提取回收率均大于80%.日内、日间精密度RSD值均小于10%,日内、日间准确度为92%~96%,本法成功检测了白桦脂酸在大鼠体内的血药浓度。且本方法稳定、灵敏度较好,适用于白桦脂酸在大鼠体内血药浓度测定。

LC-MS法同时测定大鼠血浆中咪达唑仑、右美沙芬及奥美拉唑的浓度

目的：LC-MS法同时测定大鼠血浆中咪达唑仑、右美沙芬及奥美拉唑浓度，并用于药代动力学高通量筛选中“鸡尾酒法”的研究中。方法：色谱柱为Shim-pack ODS（250mm×2．0mm ID，5．0μm）；流动相为0．01％醋酸铵．甲醇（30：70）。检测仪为岛津LC-MS-2010四极杆质谱检测器，电喷雾离子化（ESI），内标为地西泮。检测离子：咪达唑仑为[M＋H]^＋m／z：326．0，右美沙芬为[M＋H]^＋m／z：272．1，奥美拉唑为[M＋H]^＋m／z：346．0，地西泮为[M＋H]^＋m／z：284．9。血浆样品处理方法为碱化后用乙醚提取。结果：咪达唑仑、右美沙芬和奥美拉唑的线性范围为2-2000ng／mL，方法的回收率均大于85％，日内和日间的精密度均小于10％，且没有基质效应。结论：该方法符合血浆样品的测定要求，可用于药代动力学高通量筛选中的“鸡尾酒法”研究。

LC-MS法测定人血浆中克拉霉素的浓度

目的 :建立正常人血浆中克拉霉素浓度的LC MS测定方法。方法 :血浆样品经碱化后用乙醚提取 ,采用选择性离子检测方法测定其血药浓度。检测仪器为岛津LCMS 2 0 10四极杆质谱检测器 ,离子源为ESI源 ,检测离子 :克拉霉素m/z:748 5[M +H] + ,罗红霉素m/z :83 7 5[M +H ] + ,14 羟基克拉霉素m/z :764 5[M +H] + ;色谱柱为Shim packODS(5 0 μm ,2 50mm× 2 0mmI D ) ;流动相为 0 0 5%醋酸 乙腈 (40∶60v/v)。 结果 :克拉霉素的线性范围为 0 0 62 5～ 8 0 0 μg/ml ,方法的回收率为 86%～ 98% ,日内和日间的精密度均小于 17%。 结论 :该方法经考察符合血浆样品的测定要求 ,可以应用于临床血药浓度的测定和药代动力学研究。

LC-MS/MS法测定人血浆中双氯芬酸浓度的不确定度评定

目的研究高效液相色谱—串联质谱法(LC-MS/MS)法测定人血浆中双氯芬酸浓度的不确定度评定方法。方法对双氯芬酸浓度测定全过程进行分析,包括测定精密度、称量、标准溶液的配制、蛋白沉淀过程、标准曲线拟合等进行分析评定,最后根据各分量计算出合成不确定度并进行了扩展。结果置信概率为95%时,人血浆中2.0、50.0、1 600μg·L-1浓度双氯芬酸的扩展不确定度分别为(1.97±1.482)、(46.97±3.72)、(1 494±87.2)μg·L-1。结论该方法不确定度主要来自标准曲线的拟合过程,该法适用于评定LC-MS/MS法测定血浆中双氯芬酸的不确定度研究。

LC-MS法测定犬血浆中舒巴坦浓度及其与头孢他啶合用的药代动力学研究

目的 :建立犬血浆中舒巴坦浓度的LC MS测定方法 ,对Beagle犬单用和与头孢他啶注射剂合用后舒巴坦血药浓度进行定量研究 ,考察头孢他啶对舒巴坦药代动力学行为的影响。方法 :血浆中加入内标地高辛 ,用乙腈沉淀蛋白 ,取上清液进行LC MS测定。色谱柱为Shim packODS 5 0 μm ,2 5 0mm× 2 0mmI.D .,流动相A :5 0 0ml水 +2 0 μl三乙胺 +0 6mg氯化铵 ,流动相B :甲醇。以 0 2ml/min的流速进行梯度洗脱 ;动物实验采用三交叉实验设计。结果 :舒巴坦线性范围为 0 31～ 80 0 0 μg/ml,最低检测浓度为 0 31μg/ml,方法回收率大于90 % ,日内日间变异系数低浓度小于 2 0 % ,中高浓度小于 15 %。应用本法测定 9条Beagle犬单用和与头孢他啶合用后舒巴坦的血药浓度经时过程 ,静脉注射 13mg/kg的舒巴坦与 2 6mg/kg头孢他啶合用后 ,估算的AUC3 60 、t1/ 2 ,Cl和Vd分别为 386 5 2 9± 1115 13μg·min/ml,5 7 72± 6 37min ,3 5 0± 0 85ml/min/kg和 0 2 9± 0 0 9l/kg ,与单用 13mg/kg舒巴坦的AUC3 60 36 6 9 89± 92 2 17μg·min/ml,t1/ 2 6 6 98± 11 0 7min ,Cl3 5 6± 0 75ml/min/kg和Vd0 34± 0 0 8l/kg相近。结论 :本方法可用于犬血浆中舒巴坦的浓度测定及其药代动力学研究。头孢他啶不影响舒巴?

LC-MS/MS法测定家兔血浆中卤米松浓度及其药动学研究

目的建立测定家兔血浆中卤米松浓度的LC-MS/MS方法,研究卤米松乳膏经皮给药后家兔体内卤米松的药代动力学特征。方法以地塞米松为内标,血浆样品采用甲基叔丁基醚液-液萃取的处理方法,以Diamonsil C_(18)柱(100 mm×4.6 mm,5μm)分离,甲醇、2 mmol·L-1乙酸铵为流动相进行梯度洗脱,通过电喷雾电离源进行负离子检测,检测离子对为m/z 503.1→413.0(卤米松),m/z 391.0→361.0(地塞米松,内标);以经过严格方法学验证的LC-MS/MS法测定家兔单次经皮给药(1 g/100 cm^2)后血浆中卤米松的浓度。结果家兔血浆中卤米松的线性范围为0.02~20μg·L^(-1),低、中、高质控浓度的批内、批间精密度(RSD)介于3.72%~7.87%之间,准确度在99.1%~103%之间。家兔单次经皮给予卤米松乳膏后的主要药代动力学参数T_(max)、C_(max)、AUC_(0-t)、T_(1/2)分别为:(7.38±1.06)h、(1.16±0.527)μg·L^(-1)、(18.8±7.23)h·μg·L^(-1)、(13.8±3.70)h。结论该LC-MS/MS分析方法灵敏度高且样品处理方法简便,通过了严格的方法学验证,可用于卤米松乳膏皮肤给药后,家兔体内卤米松的药代动力学研究。

基于LC-MS技术测定人血浆中吉西他滨浓度方法学的建立与临床应用

目的 建立一种快速、灵敏度高、专属性强的液质联用(LC-MS)方法,用于监测人血浆中吉西他滨的浓度。方法 筛选我院确诊为非小细胞肺癌并采用含吉西他滨化疗方案治疗的患者,在吉西他滨给药5min后采血,离心,取血浆样品50μL,内标溶液100μL,加入水∶乙腈=4∶1混合液50μL沉淀蛋白,涡旋30s后,15000rpm离心5min,取上清液用0.22μm有机滤膜过滤,上样分析。采用AgilentZORBAXEclipsePlusC18(2.1×150mm1.8-Micron)色谱柱、0.1%甲酸乙腈和0.1%甲酸水流动相梯度洗脱、电喷雾电离(ESI)离子源质谱、多重反应监测(MRM)方式进行正离子检测,测定血浆中药物浓度。结果 LC-MS法的线性浓度范围5~500ng·mL^-1,定量下限位仪器检出限为0.052ng·mL^-1,线性方程为y=1272.93x+11213.5,r=0.999,三个浓度水平(10、50、400ng.mL^-1)的回收率分别为89.41%、92.38%、91.42%;日内相对标准差(RSD)分别为4.55%、3.09%、2.81%,室温和2~4℃放置24h后RSD为2.36%~4.78%,-20℃保存90d后RSD为7.98%~11.67%,-80℃保存180d后RSD为13.87%~16.52%,24例人血浆样本中吉西他滨浓度为(13.84±5.61)μg·mL^-1。结论 LC-MS法灵敏性高、专属性强、稳定性好,测定结果可靠,可用于临床血浆样本中吉西他滨血药浓度测定以及药代动力学研究。

LC-MS法测定人血浆中克林霉素浓度及药代动力学研究

目的 :建立人血浆中克林霉素浓度的高效液相色谱 -质谱法 ,测定志愿者口服盐酸克林霉素胶囊后的血药浓度 ,并对供试制剂和参比制剂的生物等效性进行评价。方法 :血浆中加入内标西沙必利后碱化 ,以乙酸乙酯提取 ,进行高效液相色谱 -质谱法检测。色谱柱为 Kromasil ODS1 5 0× 4 .6 mm,5 μm,流动相为甲醇 -1 %冰醋酸 ( 5 7∶ 4 3) ,流速 0 .8ml/min,质谱检测采用选择性离子检测方法。 2 0名健康志愿者随机分成两组 ,分别服用供试胶囊和参比胶囊 ,临床实验方案采用双交叉实验设计法。结果 :克林霉素的线性范围为 0 .0 0 5～ 1 5 μg/ml,最低检测浓度为 1 ng/ml,本测定方法的提取回收率在 1 0 0 .5 %～ 1 0 5 .2 % ,用本法测定了 2 0名志愿者随机交叉口服单剂量 6 0 0 mg后血浆中药物的浓度经时变化过程 ,并对其药动学参数进行估算。测得的 2种胶囊的主要药代动力学参数无显著性差异。结论 :该法简便 ,准确 。

人血浆中舍曲林浓度的LC-MS测定

建立了人血浆中舍曲林浓度的LC-MS测定方法。以阿普唑仑为内标,采用ODS柱,流动相为30mmol/L乙酸铵溶液(含0.5%甲酸和0.02%三氟乙酸)-乙腈(62∶38),流速1.6ml/min,分流比为2∶1。采用电喷雾电离源正离子模式,选择性监测质荷比(m/z)为159(舍曲林)和311(阿普唑仑)的离子峰。样品经氨水碱化后用叔丁基甲醚提取。舍曲林的线性范围为0.24～19.52ng/ml,提取回收率和方法回收率均大于80%,批间和批内的RSD均小于12%。

LC-MS/MS法测定Beagle犬全血中他克莫司的浓度

目的采用LC-MS/MS法测定Beagle犬全血中他克莫司的浓度。方法 Beagle犬全血样品加0.05 mol·L^(-1)ZnSO_4溶液100μl,甲醇直接沉淀蛋白,混匀后13 000 r·min^(-1),离心10 min。取上清液进样20μl分析。使用Agilent C_(18)(125 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇^(-1)0 mmol·L^(-1)醋酸铵为流动相,梯度洗脱,流速0.4 ml·min^(-1)。ESI离子源,多反应离子监测。用于定量和定性分析的离子对他克莫司分别为m/z 821.9→768.5,821.9→576.4;内标子囊霉素为809.8→756.5,809.8→564.8。结果线性范围为0.625~50 ng·ml^(-1),最低定量限为0.625 ng·ml^(-1),方法回收率为89.8%~101.4%,内标归一化基质效应因子的变异系数为11.8%,日内和日间RSD均小于10.3%。结论本方法快速、简便、灵敏度高,适用于Beagle犬全血中他克莫司浓度的测定及药代动力学和生物等效性的研究。

HPLC-MS法测定人血浆中扎来普隆的浓度

目的 :研究扎来普隆胶囊剂的人体相对生物利用度。方法 :2 0名健康志愿者 ,随机交叉口服 10mg扎来普隆胶囊或片剂。采用高效液相色谱 /电喷雾离子化质谱联用技术测定血浆中扎来普隆的浓度 ,计算出药动学参数 ,以扎来普隆片剂为参比 ,对胶囊剂的生物利用度和生物等效性进行评价。结果 :扎来普隆胶囊和片剂在 1 18± 0 4 1h和 1 16± 0 31h达到峰值 4 6 76± 10 73和 4 3 85± 12 2 9ng/ml。两种制剂的t1/ 2 (h)分别为0 92± 0 16和 1 0 8± 0 2 4。扎来普隆胶囊对片剂的相对生物利用度 (F % )为 98 2± 12 9。结论 :两种制剂的AUC、cmax其自然对数转换后经交叉试验下的方差分析和双单侧t检验均无显著性差异 ,tmax经非参数检验无显著性差异 (P >0 0 5 ) ,认为扎来普隆胶囊和片剂具有生物等效性。

LC-MS/MS测定大鼠血浆中虎杖苷浓度

目的建立测定大鼠血浆中虎杖苷浓度的LC-MS/MS方法。方法采用LC-MS/MS测定大鼠血浆中虎杖苷的浓度,以二苯乙烯苷为内标,血浆样品用乙腈沉淀蛋白,色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18(100 mm×2.1 mm,3.5μm),流动相为甲醇-乙腈-0.1%甲酸水溶液(18∶15∶67),流速0.3 ml/min,柱温30℃。结果虎杖苷的线性范围为1.0～5 000.0 ng/ml(r=0.998 4),最低定量检测浓度为1.0 ng/ml(S/N>10),提取回收率>78%,日内和日间RSD<15%。结论本法操作简单,选择性好,灵敏度高,费时少,适用于虎杖苷在大鼠体内的药代动力学研究。

人血浆中茴三硫代谢产物浓度的LC-MS/MS法测定

建立了LC-MS/MS法测定人血浆中茴三硫代谢产物对羟基茴三硫的浓度。采用Thermo Hypersil Gold色谱柱,流动相为乙腈-水(含0.5‰甲酸)(88∶12),氯雷他定为内标。采用ESI+电离源模式,选择正离子监测质荷比(m/z)为186.3→242.6(对羟基茴三硫)和337.3→383.4(氯雷他定)。样品用乙酸乙酯-异丙醇(95∶5)液液萃取,对羟基茴三硫在15.6～1000μg/L浓度范围内线性良好,批内和批间RSD小于7.10%,方法回收率为98.9%～110.1%。