苗药五香血藤对痛风性关节炎大鼠体质量及脏器指数的影响

目的 分析苗药五香血藤对痛风性关节炎大鼠体质量及脏器指数的影响,并探讨苗药五香血藤对痛风性关节炎的可能作用机制。方法 本次研究时间:2019年7月-2022年12月,研究对象为60只大鼠,通过尿酸盐诱导建立急性痛风性关节炎大鼠模型,随机将其分为6组并对其实施不同措施,包括空白对照组(10只)、模型对照组(10只)、低剂量组(10只,五香血藤63mg/kg)、中剂量组(10只,五香血藤126mg/kg)、高剂量组(10只,五香血藤252mg/kg)、秋水仙碱组(10只,秋水仙碱0.3mg/kg),分析不同模型大鼠的各项指标变化。结果 空白对照组与秋水仙碱组无大鼠死亡,其余各组不同程度存在大鼠死亡情况;与空白对照组相比,其余各组大鼠的脏器指数与体重发生不同程度变化,与模型对照组相比,不同用药治疗后大鼠在脏器指数与体重变化特点方面有所不同。与空白对照组相比,不同模型大鼠出现炎症因子水平的升高,其中中等剂量苗药五香血藤对痛风性关节炎大鼠炎症因子抑制情况同秋水仙碱基本一致,低剂量、高剂量苗药五香血藤对痛风性关节炎大鼠炎症因子抑制效果有限,不如中剂量苗药五香血藤(P<0.05)。结论 不同剂量苗药五香血藤对痛风性关节炎大鼠体质量及脏器指数的影响不同,同时对炎症因子的抑制效果也有所不同,选择中等剂量苗药五香血藤能够更好地抑制急性痛风性关节炎模型大鼠的炎症因子,同时保证对肝脏、脾脏与肾脏的影响,后续应持续加大对这一方面的研究,为苗药五香血藤治疗痛风性关节炎提供参考。

均匀设计和BP神经网络结合G1-熵权法对比优化苗药五香血藤提取工艺

目的:优化五香血藤的提取工艺参数。方法:采用U 6(64)均匀设计,对乙醇质量分数、料液比、提取次数和提取时间进行考察,以五味子醇甲和五味子乙素的含量为评价指标,采用G1-熵权法赋权得到综合评分,通过均匀设计试验进行分析得到最佳提取工艺,再通过BP神经网络建模进行网络模型优化和目标寻优,确定五香血藤的最佳提取工艺参数并进行验证对比2种分析方法。结果:均匀设计分析和BP神经网络建模得到的最优提取工艺综合得分分别为104.22、110.30,故确定BP神经网络模型预测的参数为最佳提取工艺,即为料液比20倍,乙醇质量分数90%,超声50 min,超声提取2次。结论:优选出的五香血藤最佳提取工艺稳定可行,为今后五香血藤有效成分的提取方法和工艺改进提供理论参考。

苗药五香血藤醇提物对慢性非细菌性前列腺炎大鼠模型前列腺组织白细胞计数及卵磷脂小体密度的影响

目的探讨苗药五香血藤醇提物对慢性非细菌性前列腺炎(CAP)大鼠模型前列腺组织白细胞计数及卵磷脂小体密度的影响。方法将60只雄性健康SD大鼠分为正常对照组、CAP模型对照组(模型组)、阳性药物对照组(阳性药物组)、五香血藤醇提物低剂量组(低剂量组)、五香血藤醇提物中剂量组(中剂量组)、五香血藤醇提物高剂量组(高剂量组),每组10只。除正常对照组大鼠外,其余各组大鼠采用25%消痔灵制备CAP大鼠模型。建模7 d后,阳性药物组灌胃20 mL/kg前列舒通胶囊水溶液,低剂量组、中剂量组、高剂量组分别灌胃63 mg/kg、126 mg/kg、252 mg/kg五香血藤醇提物,模型组和正常对照组灌胃20 mL/kg无菌生理盐水,连续灌胃28 d。末次灌胃后2 h,处死各组大鼠并分离前列腺组织,观察并计算各组大鼠前列腺组织的白细胞计数及卵磷脂小体密度,采用HE染色法观察各组大鼠前列腺组织的病理学改变。结果与正常对照组相比,模型组大鼠的前列腺组织白细胞计数升高,卵磷脂小体密度降低(均P<0.05);与模型组相比,阳性药物组、低剂量组、中剂量组、高剂量组大鼠的前列腺组织白细胞计数均降低,卵磷脂小体密度均升高,且阳性药物组、高剂量组大鼠的前列腺组织白细胞计数均低于低剂量组与中剂量组,卵磷脂小体密度均高于低剂量组与中剂量组(均P<0.05)。HE染色结果显示,模型组大鼠的前列腺组织内有明显的慢性炎症改变,有大量淋巴细胞等炎症细胞浸润,腺体上皮细胞及纤维组织增生;与模型组相比,阳性药物组、低剂量组、中剂量组、高剂量组大鼠的前列腺组织慢性炎症病变均有不同程度改善,以高剂量组及阳性药物组的改善程度更为明显。结论五香血藤醇提物能够降低CAP大鼠模型前列腺组织的白细胞计数,升高卵磷脂小体密度,改善前列腺组织的炎症病变,以252 mg/kg五香血藤醇提物的干预效果更优。

苗药五香血藤提取物对慢性非细菌性前列腺炎大鼠NF-κB P65、iNOS表达的影响

目的观察苗药五香血藤提取物对慢性非细菌性前列腺炎(CAP)大鼠核因子(NF)-κB P65、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法健康雄性成年SD大鼠60只,随机分为正常组、CAP模型组、阳性药物组、苗药五香血藤提取物高(高剂量组)、中(中剂量组)、低(低剂量组)剂量组,每组10只。注射消痔灵进行大鼠造模,造模7 d,之后阳性药物组给予前列舒通胶囊水溶液灌胃治疗,苗药五香血藤提取物高、中、低剂量组分别给予252、126、63 mg/kg剂量灌胃治疗,正常组和模型组给予无菌生理盐水灌胃,每天灌胃1次,连续给药28 d;于末次给药后2 h股动脉取血处死大鼠,采用Western印迹检测前列腺组织NF-κB P65、iNOS蛋白表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6和IL-8水平,观察前列腺组织病理学改变等。结果给药结束后,与CAP模型组比较,各组前列腺组织内NF-κB P65、iNOS蛋白相对表达量、血清中TNF-α、IL-6和IL-8含量均出现不同程度的降低,而高剂量组与阳性药物组的差异性不显著(P>0.05),并逐渐接近正常组水平;前列腺指数比较显示,除低剂量组外其余各组前列腺指数均明显低于模型组(P<0.05),而高剂量组与阳性药物组的差异性不显著(P>0.05);脏器指数比较显示,高剂量组和阳性药物组的肝、肾脏器指数均明显高于正常组和模型组(P<0.05);病理观察显示,高剂量组前列腺组织的腺体上皮细胞排列整齐,无明显增生,纤维组织增生及炎症细胞渗出病变明显减轻,病理改变接近阳性药物组。结论苗药五香血藤提物能够通过抑制NF-κB P65、iNOS蛋白表达,降低血清中TNF-α、IL-6和IL-8含量,对前列腺组织炎症起到缓解作用。

基于动脉粥样硬化家兔模型研究黑血藤药效及代谢组学

目的基于动脉粥样硬化(AS)家兔模型研究黑血藤在AS及肌少症预防中的药效及代谢组学,为深入研究、开发和利用黑血藤提供科学依据。方法将健康家兔分为正常组、模型组、血脂康组和黑血藤组,正常组给予基础饲料,其它组给予高脂饲料饲喂,血脂康组和黑血藤组再分别给予血脂康生药0.36g/(kg·d)和黑血藤提取物0.29g/(kg·d)灌胃处理。分析AS模型家兔血清中脂质组成、超氧化物歧化酶(SOD)含量、血液流变学参数变化及主动脉弓和比目鱼肌的组织病理形态,评价黑血藤提取物预防AS及肌少症的药效;利用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(UPLCQ-TOF-MS)研究家兔血清代谢组学,探讨黑血藤预防AS及肌少症的代谢机制。结果黑血藤具有较好的降低血脂、改善血液流变学、抑制脂质在血管内皮沉积和增强比目鱼肌横截面积等与预防AS及肌少症相关的药效,其在AS家兔模型中预防AS的药效不及血脂康但预防肌少症的药效优于血脂康。与正常组比较,从AS模型家兔血清中鉴别出37个差异代谢物,黑血藤对其中25个差异代谢物有一定程度的回调作用;在与黑血藤药效密切相关的代谢通路中,组氨酸及精氨酸-脯氨酸代谢具有重要意义,L-谷氨酰胺和L-丙氨酸在差异代谢物关系网络及差异代谢物-通路关系网络中关联作用广泛。结论黑血藤具有预防AS及肌少症的药效,开发其相关药物用于预防肥胖引起的AS及肌少症具有广泛的应用前景;其代谢机制与组氨酸及精氨酸-脯氨酸代谢相关,L-谷氨酰胺和L-丙氨酸可能为黑血藤药效的代谢标志物之一。

五花血藤水煎液通过抗炎作用促进脊髓损伤后小鼠运动功能恢复

目的探讨五花血藤水煎液(Sargentodoxa cuneata,SCD)在小鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后的抗炎作用及其对运动功能恢复的影响。方法选取36只SPF级小鼠随机分成假手术组、脊髓损伤组和SCD组,利用BMS评分检测小鼠后肢运动功能恢复情况,免疫蛋白质印迹法检测各组小鼠脊髓白细胞介素(IL)-6、IL-12A、肿瘤坏死因子(TNF)-α和脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)的表达,免疫荧光染色通过NeuN观察损伤处脊髓前角神经元变化,rAAV-retro逆行示踪观察各组小鼠胫骨前肌(tibialis anterior muscle,TA)相关脊髓运动神经元分布。结果与脊髓损伤组相比,SCD组小鼠在损伤后7 d的BMS评分显著提高(P<0.05),损伤后14 d,IL-6、IL-12A和TNF-α表达明显降低(P<0.05),BDNF的表达显著升高(P<0.05);损伤处脊髓前角神经元数量显著增多(P<0.05),TA相关运动神经元数量明显增多(P<0.05)。结论五花血藤水煎液能明显下调炎症因子IL-6、IL-12A和TNF-α的表达,发挥抗炎作用,同时上调BDNF的表达从而对运动神经元起保护作用,促进损伤后小鼠运动功能的恢复。

苗药小血藤联合静脉溶栓治疗急性脑卒中的临床疗效

目的:分析苗药小血藤联合静脉溶栓治疗急性脑卒中(ACI)的临床疗效。方法:选取2020年7月—2022年7月入院治疗的62例ACI患者,按随机数表法分为两组,各31例。一组采用苗药小血藤联合静脉溶栓治疗,二组单纯采用静脉溶栓治疗。对比总有效率、中医证候积分、凝血功能指标与氧化应激指标。结果:一组的总有效率高于二组(P<0.05)。治疗前,组间的中医证候积分、凝血功能指标和氧化应激指标对比差异无统计学意义(P>0.05)。治疗1周后,一组的中医证候积分低于二组,一组的凝血功能与氧化应激指标均优于二组(P<0.05)。结论:为ACI患者实行苗药小血藤联合静脉溶栓治疗能改善中医症状和凝血功能,抑制氧化应激反应,具有较高的治疗有效率。

红血藤的化学成分

红血藤为豆科密花豆属植物红血藤(Spatholobus sinensis)的干燥藤茎,是正品鸡血藤的地区代用品,至今未见化学成分和生物活性研究的报道。本研究运用溶剂法及各种色谱方法进行分离纯化,并根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。从其乙醇提取物的乙酸乙酯和正丁醇部分分离得到8个化合物,分别鉴定为红血藤苷A(spatholosineside A,1),2′,4′,5,7-四羟基异黄酮(2),异甘草素(isoliquiritigenin,3),lupinalbin A(4),coumestrol(5),柚皮素(naringenin,6),原儿茶酸(protocatechuic acid,7),leonuriside A(8)。化合物1为新化合物;化合物8为从本科植物首次得到;化合物2、4、5、6为从本属植物首次得到;化合物3、7为从红血藤首次得到。

黔产油麻血藤饮片质量标准研究

目的:建立黔产油麻血藤Caults mucunae sempervirentis饮片质量标准。方法:对黔产油麻血藤饮片性状鉴定;横切面、粉末显微特征进行鉴定;TLC对照药材定性鉴别;参照《中国药典》测定水分、总灰分、浸出物含量;UV测定总黄酮含量。结果:TLC专属性强,重复性好,斑点清晰,芦丁在8.6856~52.1136μg/mL区间内线性关系良好,回归方程为Y=0.0137944X-0.0194714,r^(2)=0.99965,10批次油麻血藤饮片水分、总灰分、浸出物、总黄酮范围分别为7.3%~9.0%,5.5%~7.3%,19.0%~22.1%,6.2%~9.2%。结论:本方法专属性强、稳定可靠,可用于贵州产油麻血藤饮片质量控制。

大血藤的rDNA ITS序列分析

采用PCR直接测序法,对大血藤科植物大血藤9个样品和单叶血藤1个样品进行nrDNA ITS序列测定和分析。研究结果发现大血藤和单叶血藤ITS的长度为634～635bp;其中ITS1为233bp,5.8S为163bp,ITS2的长度为238～239bp。以串果藤为外类群构建最大简约树,大血藤和单叶血藤的10个样品构成一个单系类群,并且得到了自展值100%的支持。根据大血藤在中国的分布情况,单叶血藤在陕西的出现,以及分子数据的分析结果,华中区系可能是大血藤的现代分布中心,而且大血藤分布呈华中区系、华东区系、西南区系地带性的分化。这种地带性分化,更多的跟其地理、气候、环境等协同进化有关。陕西宁陕县的大血藤和单叶血藤这两个样品,ITS长度均为635bp,核苷酸差异值只有0.0032。与其他样品相比,单叶血藤与大血藤(陕西)在ITS2的一个信息位点同时发生了颠换,并且都有碱基插入现象,表现出地理特异性。单叶血藤与大血藤其它9个样品的核苷酸差异值仅在0.32%～2.31%之间,远小于大多数被子植物属下种间的核苷酸差异值1.2%～10.2%。分子数据支持将单叶血藤合并到大血藤中去。

单叶血藤胚胎学研究Ⅱ——大孢子发生及雌配子体发育

目的 观察研究大血藤属植物单叶血藤(Sargentodoxasimplicifolia)外形上的两性花中大小孢子发生和雌雄配子体的发育过程,为大血藤属植物胚胎学研究积累资料,并为其系统分类及保护生物学提供胚胎学依据。方法 石蜡切片、半薄切片、LaicaDMLB显微镜观察并摄影。结果 单叶血藤心皮多数、离生,每室具胚珠一枚。边缘胎座、倒生胚珠、双珠被、厚珠心、珠孔仅由内珠被形成,珠心表皮参与珠心组织的形成。大孢子母细胞减数分裂产生T 形四分体和少数线形四分体。部分二分体中仅合点端细胞进行减数分裂Ⅱ,而珠孔端二分体细胞尚未分裂就退化,最后合点端的大孢子发育为雌配子体。外形上的两性花中的雄蕊早期发育正常,但同一小孢子囊中的小孢子母细胞减数分裂不同步;大部分小孢子只发育到单核靠边期,少数小孢子能发育成二细胞花粉粒;花药壁始终不开裂。结论 单叶血藤雌配子体发育为单孢子蓼型,该外形上的两性花是一种较为原始的雌花。

油麻血藤药材质量标准提升与研究

目的:提升油麻血藤药材质量标准,为我省油麻血藤药材评定提供依据。方法:对贵州产油麻血藤药材性状、粉末显微特征进行鉴定;TLC自身对照药材鉴别;UV测定总黄酮含量;参照《中国药典》测定水分、总灰分、浸出物含量。结果:TLC专属性强,斑点清晰,芦丁在8.686μg/ml~52.114μg/ml区间内线性关系良好,回归方程为Y=0.01379X-0.01920,r=0.99966,3批次油麻血藤药材的水分、总灰分、浸出物、总黄酮范围分别为7.95%~8.98%、6.2%~7.1%、21.1%~21.8%、7.9%~8.9%。结论:本方法可行性强,可用于贵州产油麻血藤质量控制。

黔产油麻血藤薄层色谱鉴别研究

目的:建立黔产油麻血藤Caults mucunae sempervirentis薄层色谱鉴别方法,为其质量标准修订提升提供参考。方法:参照薄层色谱法(通则0502),以自身对照药材为对照,对展开体系、点样量等因素考察研究。结果:以硅胶G薄层板为载体,点样量5μL,石油醚(60~90℃)-环己烷-乙酸乙酯-甲酸(6∶3∶1∶0.2)为展开剂,1%香草醛硫酸溶液,在105℃显色。供试品溶液、对照药材溶液,显相同颜色的斑点。结论:本方法专属性、重现性、重复性良好,斑点清晰,可用于油麻血藤定性鉴别。

单叶血藤的胚胎学研究——小孢子发生及雄配子体发育

首次报道了大血藤科植物单叶血藤的小孢子发生及雄配子体发育过程。其花药壁发育类型为基本型。周缘细胞经2次平周分裂形成4层细胞,其中有些细胞仍能进行一次平周分裂,最后分别发育为纤维状加厚的药室内壁、中层和绒毡层。腺质绒毡层的细胞中可见乌氏体和脂质球状体。小孢子母细胞减数分裂胞质分裂为同时型,产生正四面体型四分体。成熟花粉为二细胞型。

小血藤总黄酮的提取研究

运用索式回流提取法、碱提酸沉法、水浴浸提法提取小血藤根、茎、叶中总黄酮,以硝酸铝显色法测定其总黄酮的含量。进一步以正交试验法研究适宜小血藤根的索氏法提取条件,结果表明:小血藤根、茎、叶不同部位的总黄酮提取,均以索式回流提取法为最好;以石油醚在50℃下回流2h去脂多次,85%乙醇按料液比为1:15于70℃下提取3h,测得小血藤根、茎、叶中总黄酮含量分别为1.67%、0.94%、2.35%。

复方五花血藤对鼠视网膜缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨复方五花血藤对大鼠视网膜缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用健康成年SD大鼠90只,随机分为正常对照组、模型组和治疗组,其中模型组和治疗组建立视网膜缺血再灌注模型,治疗组于造模前连续3 d给予复方五花血藤灌胃,每天2次(总剂量为10 g·kg-1·d-1),模型组和正常对照组灌服相同剂量的生理盐水。通过HE染色、透射电镜观察再灌注6 h、12 h、24 h、48 h与72 h各组大鼠视网膜的形态学变化,原位杂交方法检测各组视网膜凋亡相关因子survivin的表达情况。结果与正常对照组相比,模型组再灌注后6 h视网膜神经节细胞层高度水肿,内丛状层明显增厚,部分视网膜神经节细胞发生空泡变性,但随时间延长病变逐渐减轻。治疗组各时间点视网膜损伤均较模型组轻。与正常对照组相比,模型组survivin在再灌注后6 h即开始增加,24 h达到高峰,以后逐渐下降,但各时间点均高于正常对照组(均为P<0.05)。与模型组相比,治疗组survivin各时间点表达均较高(均为P<0.05)。结论初步证实复方五花血藤对于大鼠视网膜缺血再灌注损伤有较为明显的保护作用,此研究对于临床药物的开发和利用具有积极意义。

五香血藤醇提物对慢性非细菌性前列腺炎大鼠的改善作用

目的 观察五香血藤醇提物对慢性非细菌性前列腺炎大鼠的改善作用。方法 60只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,阳性药物组(前列舒通胶囊水溶液354 mg/kg),五香血藤醇提物低、中、高剂量组(63、126、252 mg/kg),每组10只,注射消痔灵进行造模。RT-qPCR法检测miR-155表达,Western blot法检测NF-κB p65、TLR4表达,ELISA法检测TNF-α、IL-6、IL-8水平,比较各组大鼠前列腺组织病理评分,观察病理学改变。结果 与模型组比较,五香血藤醇提物各剂量组大鼠前列腺组织内TNF-α、IL-6、IL-8、NF-κB p65、TLR4、miR-155表达降低(P<0.05);五香血藤醇提物高剂量组与阳性药物组病理评分最低;五香血藤醇提物高剂量组大鼠前列腺组织慢性炎症细胞浸润、腺体增生、血管扩张充血等症状有改善。miR-155表达与NF-κB p65、TLR4、TNF-α、IL-6、IL-8表达呈正相关(P<0.01)。结论 五香血藤醇提物能够改善慢性非细菌性前列腺炎大鼠的炎症,其作用机制可能通过抑制miR-155表达,调控TLR4/NF-κB信号通路。

黔产五香血藤化学成分的研究

目的研究黔产五香血藤的化学成分。方法利用现代色谱分离技术,从五香血藤中分离得到8个化合物,通过核磁共振氢谱、碳谱和质谱等波谱分析。结果这些化合物分别鉴定为五内酯E(1),五内酯E甲酯(2),β-胡萝卜苷(3),五内酯B(4),南五味子宁(5),三十烷(6),β-谷甾醇(7),schizanrin F(8)。结论化合物2,3,5,6,8首次从该植物中分离得到。