大枣多糖对血虚大鼠全血细胞及红细胞ATP酶活力的影响

目的:观察大枣多糖对血虚大鼠全血细胞及红细胞膜ATP酶活力的影响,分析大枣的补气血作用的可能途径。方法:实验于2002-02/06在河南中医学院动物实验中心完成。①选用Wistar大鼠60只,体质量170～190g,雄性。随机选用50只采用以下方法造成气血双虚模型:分别于实验第1,3,5,7,9天,尾部放血1mL/180g,于第2天腹腔注射环磷酰胺生理盐水溶液40mg/kg,于第4,6,8,10,12天腹腔注射环磷酰胺20mg/kg,造气血双虚模型;其余10只大鼠为空白对照组(仅注射同体积生理盐水)。②将50只气血双虚模型大鼠随机分为5组:大、中、小剂量大枣多糖组[灌胃大枣多糖溶液,由河南中医学院药物化学学科提供。本品为鼠李科植物枣干燥成熟果实的提取精制物(经乙醇回流脱脂、水提取、浓缩、醇沉、除蛋白、透析、醇沉、真空干燥等程序,得大枣多糖)溶液剂量为200,100,50mg/kg,灌胃体积为10mL/kg],当归补血口服液组[灌胃当归补血口服液(郑州市协和制药厂生产,剂量为2次/d,10mL/次,批号010301)3.3mL/kg,原药液稀释1.5倍]及模型组(灌胃等体积生理盐水)。空白对照组仅灌同体积生理盐水。每天给药1次,连续给药14d。③于第14天给药后2h,用库尔特细胞全自动分析仪测定血中红细胞计数、白细胞计数、血红蛋白和血小板计数。ATP酶测定用定磷法,按南京建成生物工程研究所提供的ATP酶试剂盒说明书测定红细胞Na+-K+-ATP酶和Ca2-Mg2-ATP酶活性。④计量资料组间比较采用t检验,方差不齐者采用t’检验。结果:大鼠60只均进入结果分析。①空白对照组、各剂量大枣多糖组、归补血口服液组大鼠血红细胞计数、白细胞计数、血小板计数及血红蛋白含量明显高于模型组(P<0.05～0.01)。②空白对照组、各剂量大枣多糖组、归补血口服液组大鼠红细胞Na+-K+-ATP酶、Mg2+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活力明显高于模型组(P<0.05～0.01)。空白对照组,大、中剂量大枣多糖组、归补血口服液组大鼠红细胞Ca2+-ATP酶活力明显高于模型组(P<0.05),小剂量大枣多糖组大鼠Ca2+-ATP酶活力与模型组相近。结论:大枣多糖可以改善气血双虚大鼠的造血功能和红细胞能量代谢,从而起到补血作用。

酸枣仁汤对血虚小鼠的镇静催眠作用

目的:观察机体在血虚模型状况下,酸枣仁汤的镇静催眠作用。方法:①实验于2004-03/05在中国药科大学中医药教研室实验室完成。选用昆明种雄性小鼠246只。②观察酸枣仁汤(酸枣仁、甘草、知母、茯苓、川芎经煎煮制成酸枣仁汤颗粒。酸枣仁颗粒溶于蒸馏水,制成0.6,1.2,2.4g/mL溶液)对血虚小鼠戊巴比妥钠致睡眠时间的影响:取昆明种小鼠60只,随机分为5组:正常对照组、模型组(灌服生理盐水),酸枣仁汤低、中、高剂量组(灌服酸枣仁汤生药量6,12,24g/kg),每组12只。除正常对照组以外,其余各组造失血性贫血模型:小鼠眼眶放血0.5mL,24h后给药,连续给药5d,最后1d给药1h后,腹腔注射戊巴比妥钠35mg/kg。15min内翻正反射消失达30s以上为进入睡眠,翻正反射恢复为清醒,其间为睡眠时间,记录各组小鼠的睡眠潜伏期和睡眠期。③观察酸枣仁汤对血虚小鼠戊巴比妥钠阈下催眠剂量的影响:取昆明种小鼠66只,随机分成5组:正常对照组、模型组(n=12,21),酸枣仁汤低、中、高剂量组(n=11,12,10)。每组干预时间及干预措施同睡眠时间实验。分别腹腔注射戊巴比妥钠27mg/kg。腹腔注射后15min内翻正反射消失1min(睡眠)记为阳性(+),否则(清醒)记为阴性(-)。④观察酸枣仁汤对血虚小鼠自发活动的影响:每组小鼠只数、干预措施及干预时间同“睡眠时间”观察,进行旷野法实验:将小鼠放入直径30cm,高20cm的圆柱型笼中,笼底部分为19格,笼上方1m处放置60W白炽灯,描记小鼠在笼内2min的活动轨迹,轨迹与笼底格线相交记为1次。⑤观察酸枣仁汤对血虚小鼠血红蛋白的影响:每组小鼠只数、干预措施及干预时间同“睡眠时间”观察。用HiCN法测血红蛋白含量,给药第1天,第6天分别测血红蛋白含量,比较血红蛋白的变化值。⑥计数结果差异比较采用χ2Test孙氏直接概率法,组间计量结果比较采用t检验。结果:小鼠246只均进入结果分析。①酸枣仁汤低、高剂量组睡眠潜伏期明显短于模型组(P<0.01,0.05),睡眠期明显长于模型组(P<0.05)。②酸枣仁汤高、低剂量组睡眠小鼠只数明显多于模型组(P<0.05),清醒小鼠只数明显少于模型组(P<0.05)。③模型组小鼠自发活动次数明显少于对照组(P<0.01),酸枣仁汤中剂量组小鼠自发活动次数明显多于模型组(P<0.05)。④治疗前模型组小鼠血红蛋白含量明显低于对照组,治疗后酸枣仁汤中、高剂量组小鼠血红蛋白含量变化值明显高于模型组(P<0.05)。结论:①酸枣仁汤对机体在血虚小鼠具有镇静催眠作用。②酸枣仁汤能提高血虚小鼠血红蛋白含量,改善血虚症状,该作用具有剂量依赖性。

大枣多糖对大鼠气血双虚模型胸腺、脾脏中淋巴细胞超微结构影响的可能途径

目的:观察大枣多糖对放血和环磷酰胺并用所致气血双虚模型大鼠免疫器官淋巴细胞超微结构的影响,分析大枣补气血作用的可能途径。方法:实验于2002-02/05在河南中医学院动物实验中心完成,选用Wistar雄性大鼠60只,按二次随机分组法分为6组(每组按1～10编号)。①大枣多糖200,100,50mg/kg组、当归补血口服液组及气血双虚模型组大鼠均经尾部放血及腹腔注射环磷酰胺制备气血双虚模型。分别灌服200,100,50mg/kg的大枣多糖(鼠李科植物枣ZiziphusjujubaMill干燥成熟果实的提取精制物)水溶液(10mL/kg)、当归补血口服液3.3mL/kg(原药液稀释1.5倍)及同体积生理盐水。②正常对照组大鼠不放血仅腹腔注射同体积生理盐水,灌服同体积的生理盐水。各组大鼠给药1次/d,连续14d。于末次给药后2h,麻醉处死大鼠,每组各取5只大鼠(编号为2,4,6,8,10),取胸腺和脾脏作病理切片,电学显微镜观察组织超微结构变化。按Weibel点计数法及立体学公式对胸腺皮质和脾脏的淋巴细胞超微结构指标进行定量分析。结果:进入分析保持为6组,每组选择5只大鼠,实验过程中无脱失。①与正常对照组相比,气血双虚模型组大鼠胸腺皮质淋巴细胞的线粒体体密度、比表面、比膜面、常染色质体密度均显著降低(P<0.01),核比表面及异染色质体密度显著升高(P<0.01);脾脏淋巴细胞的比表面、异染色质体密度、核比表面均显著升高(P<0.01),线粒体体密度、比膜面、常染色质体密度均显著降低(P<0.01),说明代谢功能显著降低,造模成功。②与气血双虚模型组相比,大枣多糖200,100,50mg/kg组大鼠胸腺皮质淋巴细胞的线粒体体密度、比表面、比膜面、常染色质体密度显著升高(P<0.05～0.01),异染色质体密度、核比表面显著降低(P<0.01);当归补血口服液组比膜面显著升高(P<0.01),核比表面及异染色质体密度显著降低(P<0.01)。③与气血双虚模型组大鼠相比,大枣多糖200,100,50mg/kg组大鼠脾脏淋巴细胞的线粒体体密度、比膜面、常染色质体密度显著升高(P<0.01),异染色质体密度显著降低(P<0.01);大枣多糖50mg/kg组比表面显著降低(P<0.01),大枣多糖100,50mg/kg组核比表面显著降低(P<0.01);当归补血口服液组比膜面、常染色质体密度显著升高(P<0.01),异染色质体密度、核比表面显著降低(P<0.01)。结论:200,100,50mg/kg的大枣多糖均能明显减轻气血双虚模型大鼠胸腺、脾脏组织淋巴细胞超微结构的病理改变,改善细胞能量代谢,从而起到补气生血的作用。

大枣多糖对气血双虚模型小鼠全血细胞和血清粒-巨噬细胞集落刺激因子水平的影响

目的:观察大枣多糖对气血双虚小鼠全血细胞、血清粒-巨噬细胞集落刺激因子水平的影响,分析大枣补血作用的可能途径。方法:实验于2002-02/06在河南中医学院动物实验中心完成。①选用昆明种小鼠60只,体质量20～22g,雄性,6周龄。随机选用50只造成气血双虚模型:每鼠尾部放血0.025mL/g,分别于第2,4,6,8天,腹腔注射环磷酰胺80,40,40,40mg/kg(给环磷酰胺前禁食不禁水12h);其余10只小鼠为空白对照组(仅注射同体积生理盐水)。将50只气血双虚模型小鼠随机分为5组:大、中、小剂量大枣多糖组[分别灌胃400,200,100mg/kg剂量的大枣多糖(由河南中医学院药物化学学科提供。本品为鼠李科植物枣ZiziphusjujubaMill.干燥成熟果实经乙醇回流脱脂、水提取、浓缩、醇沉、除蛋白、透析、醇沉、真空干燥等程序提取的精制物)水溶液,灌胃体积0.02mL/g],当归补血口服液组[灌胃6.6mL/kg当归补血口服液(郑州市协和制药厂生产,批号010301,10mL/支),原药液稀释3倍]及模型组(灌胃等体积生理盐水)。空白对照组仅灌同体积生理盐水。1次/d,连续给药10d。②于末次给药后2h,各组动物均尾部取血,采用库尔特细胞全自动分析仪测血液中红细胞、白细胞、血红蛋白和血小板数;然后,每组各取5只小鼠,眼眶取血,采用由解放军总医院科技开发中心提供(批号020126)的粒-巨噬细胞集落刺激因子试剂盒测血清粒-巨噬细胞集落刺激因子水平。组间计量资料差异比较采用t检验。结果:小鼠60只均进入结果分析。①空白对照组、各剂量大枣多糖组、归补血口服液组小鼠血红细胞计数、白细胞计数、血小板计数明显高于模型组(P<0.01);空白对照组,大、中剂量大枣多糖组、归补血口服液组小鼠血红蛋白含量高于模型组(P<0.01),小剂量大枣多糖组血红蛋白含量与模型组相近。②模型组小鼠血清粒-巨噬细胞集落刺激因子水平明显低于空白对照组、当归补血口服液组、各剂量大枣多糖组(P<0.01)。结论:大枣多糖可通过升高气血双虚小鼠血清粒-巨噬细胞集落刺激因子水平,改善全血细胞检测结果,起到补血作用。