遗传性异常纤维蛋白原血症的临床诊断与治疗进展

遗传性异常纤维蛋白原血症是一种常染色体显性遗传的遗传性出凝血异常疾病,由编码纤维蛋白原的Aα、Bβ和γ链的基因突变所致。该病以纤维蛋白原活性明显降低而含量正常为特征,发病率约1%,然而目前很多临床医生对其认识不足,导致大量患者误诊或漏诊,给患者造成不良影响。异常纤维蛋白原血症根据纤维蛋白原活性和抗原水平比值≤0.7而诊断。患者的临床表现具有异质性,部分患者没有症状,部分患者有出血或血栓表现。一般情况下不需要治疗,当遇到外伤、手术、妊娠等止血挑战时应根据个人和家族史以及基因突变类型进行个体化治疗,降低出血和血栓形成的风险。临床表型与基因型有一定关联,因此对基因型和表型关系的深入研究有助于指导临床诊治。

ALB基因新突变致家族性白蛋白异常性高甲状腺素血症一例

报道1例家族性白蛋白异常性高甲状腺素血症(FDH),患者无甲状腺功能亢进症状,但检测总甲状腺素、FT4、FT3升高,T3、TSH无异常,基因测序结果证实编码白蛋白的ALB基因7号外显子发生c.737G>T(P.R246I)杂合突变,为新突变,确诊为FDH。

遗传性异常纤维蛋白原血症家系表型和基因型研究

目的通过分析2例FGG基因杂合型致病性FGG致病家系的表型及基因型,探索其致病机理。方法测定2例遗传性异常纤维蛋白原血症(CD)先证者及家系成员的凝血酶原时间(PT)、部分活化凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原活力(Fa)、纤维蛋白原(Fib)、凝血酶时间(TT)、D-二聚体(D-D)、纤维蛋白(原)降解产物(FDPs)等凝血指标。对先证者的Fib基因进行聚合酶链式反应(PCR)扩增,获得FGA、FGB、FGG 3个基因,并对其进行序列测定,确定突变位点;利用反向测序技术对该突变进行验证,并对其他家系成员的同一基因座进行检测;本项目拟采用多聚二磷酸腺苷(ADP)核糖聚合酶2(Phenotypingv2)及Mutation Taster软件对Fib基因进行定点突变分析,并通过PyMOL软件对Fib进行空间建模,预测其对Fib结构的影响。结果两组先证者的PT、APTT、TT均正常或稍高,Fa显著下降(0.60,0.61 g/L),Fib接近正常(2.31,1.97 g/L),D-D,FDPs均在正常范围。研究发现,家系1先证者的FGG基因有1个c.952 G>A的杂合性突变,使292位的甘氨酸(Gly292Ser)发生了丝氨酸(Gly292Ser)。家系2先证者FGG基因发生c.902 G>A杂合突变,造成275号精氨酸(Arg275His)。进一步的实验结果表明,这两个基因的突变都导致了Fib的功能改变,具有致病性。通过构建PyMOL突变体,发现1号家系中Fib的gamma链出现了Gly292Ser位点,并且这些位点与周边氨基酸之间的氢键作用增强;在家系2中,Fib的gamma链出现了Arg275His,且该位点与周边氨基酸之间的氢键作用降低,并且影响了蛋白质的空间稳定性。结论家系1 FGG基因存在c.952 G>A杂合突变,家系2 FGG基因为c.902 G>A杂合突变,造成Fib蛋白结构和功能改变,是CD发病的重要分子机制。

1例FGA基因c.2185G>A变异所致遗传性异常纤维蛋白原血症并发深静脉血栓的分析

目的对1例遗传性异常纤维蛋白原血症(CD)患者出现深静脉血栓形成(DVT)进行分析,探讨CD与DVT的关系。方法临床资料收集及家系调查(共2代3人)。检测患者及其家系成员相关凝血指标。提取外周血基因组DNA进行PCR扩增,采用DNA直接测序法分析患者纤维蛋白原(Fg)的FGA、FGB和FGG基因所有外显子、侧翼序列、5′和3′端非翻译区序列,及家系成员相应的变异位点区域。用PyMol软件构建基因变异前后蛋白模型。结果患者为行子宫肌瘤切除术入院,术后3天出现DVT。术前凝血指标检查显示患者的凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、Fg活性(Fg:C)和Fg抗原(Fg:Ag)分别为14.9 s、33.3 s、0.94 g/L和2.10 g/L;其母亲上述4项指标分别为14.7 s、32.8 s、0.97 g/L和2.35 g/L。DNA测序发现患者及其母亲的FGA基因第6号外显子均存在c.2185G>A杂合错义变异(p.Glu729Lys)。蛋白模型分析显示,p.Glu729Lys变异使Fg结构发生了改变。结论该先证者FGA基因第6号外显子c.2185G>A(NM_000508)杂合错义变异与其Fg:C减低有关,可能也是该患者出现DVT的原因之一。

FGG基因Ala315Gly错义突变致遗传性异常纤维蛋白原血症家系分析

目的 对1个FGG基因Ala315Gly错义突变导致的遗传性异常纤维蛋白原血症家系进行表型和基因突变分析,探讨该错义突变与遗传性异常纤维蛋白原血症的相关性。方法 收集2021年12月同济大学附属东方医院胶州医院某先证者临床资料及其家系成员(共3代8人)相关信息,并进行凝血表型检测。分析先证者纤维蛋白原(Fib)基因外显子和侧翼序列;采用反向测序验证先证者突变位点,采用Sanger测序检测其家系成员相应的突变位点。将家系测序结果与NCBI数据库序列进行比对,分析变异与表型的共分离情况。分析突变位点基因的保守性,并通过生物信息学在线分析软件预测突变位点对蛋白质功能的潜在影响。分析突变前后蛋白质空间结构和分子间作用力。结果 先证者Fib活性为0.97 g·L~(-1)(降低)。其母亲、小姨、外祖父Fib活性均降低;除母亲凝血酶时间(TT)延长外,先征者及其家系其他人员的凝血表型均在参考区间内。与健康对照相比,先证者及其母亲、小姨、外祖父凝血酶诱导的纤维蛋白最大聚集率和聚集曲线斜率显著降低。先证者FGG(4q31|NM_000509.4)基因exon8:c.944C>G:p.(Ala315Gly)杂合错义突变,ACMG证据级别为致病突变,且该突变位点类型为国际新发现突变。先证者母亲、小姨、外祖父均为Ala315Gly杂合子,父亲、大姨、舅舅、外祖母该位点为野生型,FGG基因c.944C>G突变在该家系与先证者表型共分离。A315位点在同源物种间高度保守;生物信息学在线分析软件预测Ala315Gly突变会影响Fib的聚集功能;蛋白质模型分析结果表明,Ala315与Trp395、Thr397、Ala367和Gly318等周围的氨基酸残基侧链形成疏水作用,突变后疏水作用消失,且突变改变了该蛋白的自由能,使蛋白稳定性降低。结论 Fib c.944C>G错义突变可导致其氨基酸周围失去疏水相互作用,进而改变蛋白的自由能,降低空间结构的稳定性,最终可能导致遗传性异常纤维蛋白原血症的发生。

1例由p.Arg35Cys引起遗传性异常纤维蛋白原血症家系的研究

目的分析武鸣壮族地区1例FGA基因杂合突变引起的遗传性异常纤维蛋白原血症的表型和基因型,探讨其发病机制。方法对先证者家系三代5人进行外周血采集,使用凝血分析仪检测PT、APTT、FIB、TT等凝血项目,FIB采用PT演算法和Clauss法检测;采用DETA抗凝管收集全血,通过NGS筛选,用Sanger测序验证FGA、FGB、FGG基因编码区突变。结果先证者及其父亲表现出FIB-Clauss法水平降低和凝血酶时间延长,而其妹妹和两个女儿均正常。高通量基因测序显示先证者及其父亲检测到FGA c.103C>T杂合错义突变,而先证者的妹妹和两个女儿未检测到该突变。结论导致该家系成员遗传性异常纤维蛋白原血症的分子机制是FGA c.103C>T杂合错义突变,该突变导致蛋白质中第35位氨基酸由精氨酸变为半胱氨酸(p.Arg35Cys),从而导致遗传性异常纤维蛋白原血症。

1个FGG基因新变异致遗传性异常纤维蛋白原血症家系的临床特征和遗传学分析

目的:对1例遗传性异常纤维蛋白原血症(CD)家系进行临床特征和遗传学分析。方法:分析患者的临床特点、凝血指标及纤维蛋白原(Fg)三个编码基因FGA、FGB和FGG测序的结果。应用PolyPhen-2、PROVEAN和Mutation Taster三款生物信息学预测软件分析变异的致病性;利用Clustal X软件对变异氨基酸进行保守性分析;突变蛋白的模型分析采用PyMol软件;单点变异对蛋白质稳定性的影响用I-Mutant Suite软件进行分析。运用血栓弹力图对该家系成员进行Fg功能的评价。结果:先证者纤维蛋白原抗原(Fg:Ag)正常(3.20 g/L),纤维蛋白原活性(Fg:C)显著降低(0.91 g/L),凝血酶时间(TT()22.0 s)延长;基因检测结果表明先证者为FGG第9号外显子G1133A存在碱基置换(p.Gly378Asp),其母亲和弟弟血样中检测到相同的变异位点。三款生信预测软件均提示c.1133G>A变异为有害和致病变异;Clustal X Software保守性分析结果表明,Gly378在同源物种之间高度保守。血栓弹力图的指标K值延长,Angle值减小,提示家系三位携带c.1133G>A变异的成员Fg功能均下降。根据美国医学遗传学与基因组学学会(ACMG)遗传变异标准与指南,支持证据组合(PM2+PP1+PP2+PP3+PP4),判定c.1133G>A(p.Gly378Asp)变异为可能致病性变异。结论:Fgγ链Gly378Asp变异是引起该家系CD的原因。

先天性异常纤维蛋白原血症家系调查及输血

目的:对1例先天性异常纤维蛋白原血症患者进行家系调查,并分析其出血与血栓风险及输血策略。方法:全自动血凝仪检测先证者及家系成员的凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间,纤维蛋白原活性和抗原分别用Clauss法和PT演算法进行检测。对先证者及家系成员进行血栓弹力图分析。采集先证者及其家系成员外周血标本,用PCR法扩增纤维蛋白原基因FGA、FGB和FGG的所有外显子及其侧翼序列并测序,寻找基因突变。结果:先证者的PT、活化部分凝血活酶时间正常,凝血酶时间轻度延长,纤维蛋白原活性水平降低(Clauss法);先证者姑姑、儿子和女儿的纤维蛋白原均存在不同程度降低;血栓弹力图结果提示,先证者及其家系成员(先证者儿子除外)的纤维蛋白原功能基本正常;基因分析结果发现,先证者及其子女、姑姑FGA基因2号外显子均存在6233位G/A(p.AαArg35His)杂合突变,此外家系中还发现2个多态性位点,分别是FGA基因g.9308A/G(p.AαThr331Ala)多态性和FGB基因g.12628G/A(p.BβArg478Iys)多态性;患者产前2 h输注10单位冷沉淀预防出血,生产过程及产后无明显出血。结论:FGA基因6233位G/A(p.AαArg35His)杂合突变是该先天性异常纤维蛋白原血症家系致病的生物遗传学基础。

一个家族性异常白蛋白性高甲状腺素血症家系临床特点分析

目的:分析1个家族性异常白蛋白性高甲状腺素血症(FDH)家系的遗传学特点及甲状腺激素的实验室检测特点。方法:收集2021年3月就诊于郑州大学第一附属医院的1例男性FDH患者及其家庭成员的临床资料,采用高通量测序法检测先证者全部基因各外显子的序列变异情况,采用Sanger测序法验证家系其他成员白蛋白(ALB)基因的变异情况。分别应用Roche、Beckman、Abbott 3种平台试剂盒检测该家系中FDH患者的FT 3、FT 4、TSH水平。结果:家系中共有4例患者。经基因检测均存在相同的ALB基因错义突变c.725G>A(p.R218H);先证者父亲及外祖母未患病,且未检测到该基因突变。4例FDH患者TT 4超出正常上限0.25~0.56倍,TT 3及rT 3均未超出正常范围。4例FDH患者Roche、Beckman、Abbott平台检测结果显示FT 3测定值超正常上限百分比分别为0.0%~6.9%、0.0%~11.4%、0.0%~7.8%,FT 4测定值超正常上限百分比分别为25.1%~39.4%、32.8%~92.8%、0.0%~11.3%。结论:R218H突变的FDH患者血清TT 4轻度升高,不同平台所测FT 4水平升高程度不同。

α链Gly36Ser突变致异常纤维蛋白原血症家族的纤维蛋白原功能分析

目的 分析一个由α链Gly36Ser突变引起、患病成员症状有差异的遗传性异常纤维蛋白原血症家族的纤维蛋白原(fibrinogen, Fg)功能。方法 收集该遗传性异常纤维蛋白原血症家族患者外周血样本,常规凝血功能试验筛查家族成员凝血功能;NGS法筛查Fg基因(FGA、FGB、FGG)突变位点,Sanger法验证以确认突变;生物信息软件预测突变Fg功能;血栓弹力图(TEG)和功能性Fg TEG试验对家族所有患病者进行Fg凝聚功能评价;Fg动态凝聚试验和纤维蛋白溶解试验检测患病成员纤维蛋白聚集和溶解功能。结果 该家族共有突变基因携带者11名,常规凝血实验和基因突变检测均符合异常纤维蛋白原血症的诊断;11名突变基因携带者经Sanger法验证为同一突变位点;Uniprot和SWISS-MODEL等预测软件均表明该突变为影响纤维蛋白原聚合的有害突变;家族突变基因携带者中5名有症状者TEG相关参数与无症状者相比明显变化,Fg凝集试验显示该5名有症状者凝固曲线起峰时间明显延长且峰值降低;纤维蛋白溶解试验表明家系中多数(7/11)突变基因携带者纤维蛋白在限定时间中不能完全溶解。结论 α链Gly36Ser突变的异常纤维蛋白原血症患者症状可有差异,应全面分析该突变引起的异常纤维蛋白血症家系的基因型和表型,并长期观察患者纤维蛋白功能和凝血功能的变化。

阿托伐他汀治疗异常脂蛋白血症的临床效果

目的 :观察阿托伐他汀对异常脂蛋白血症病人的调脂效果。 方法 :39例异常脂蛋白血症病人随机分为 2组 :阿托伐他汀组 (2 1例 ,10 m g/d,po)与普伐他汀组 (18例 ,10 m g/d,po)。服药前与服药 6周后测定血脂水平。结果 :服药 6周后 ,阿托伐他汀组与普伐他汀组的血清总胆固醇 (TC)比用药前降低 ,降幅分别为 2 6 .7%与 19.4% (P<0 .0 1) ;血清低密度脂蛋白胆固醇 (L DL - C)也比用药前显著降低 ,降幅依次为 39.2 %与 2 4.2 % (P<0 .0 1) ;阿托伐他汀组血清三酰甘油 (TG)比用药前明显降低 ,降幅达 2 5 .3% (P<0 .0 1) ,而普伐他汀组血清 TG仅降低 4.1% (P>0 .0 5 ) ;两组血清高密度脂蛋白胆固醇 (HDL - C)比用药前有不同程度升高 ,阿托伐他汀组显著升高达 6 .4% (P<0 .0 5 ) ,普伐他汀组升高 4.8% (P>0 .0 5 )。结论 :阿托伐他汀能够显著降低异常脂蛋白血症病人的血清 TC、L DL - C与 TG水平 ,可有效地用于异常脂蛋白血症病人的调脂治疗。

一个遗传性异常纤维蛋白原血症家系表型分析

目的对一个遗传性异常纤维蛋白原血症家系进行表型分析。方法先后采集该家系3代共5人静脉血,用全自动血凝仪检测凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白(原)降解产物(FDP)、D-二聚体(D-Dimer)和抗凝血酶Ⅲ活性(AT-Ⅲ),分别使用Clauss法和免疫比浊法对纤维蛋白原的活性和抗原性进行检测。结果先证者PT和APTT正常,TT明显延长,纤维蛋白原活性明显下降,抗原性在正常范围,其母亲的表型检测结果与之相同。家系其余成员检测结果均在正常范围。结论该遗传性异常纤维蛋白原血症家系表现为低纤维蛋白原血症,无出血或血栓。

奥利司他联合普伐他汀治疗肥胖伴异常脂蛋白血症的疗效分析

目的:探讨联合应用奥利司他和普伐他汀治疗肥胖伴异常脂蛋白血症患者的疗效及安全性。方法:121例患者随机分为奥利司他联合普伐他汀(观察组,61例)与普伐他汀(对照组,60例) 两组。在控制饮食的基础上,观察组患者给予奥利司他120 mg,每日3次,普伐他汀20 mg,每晚1次; 对照组单予普伐他汀20 mg,每晚1次。随访6个月,检测与比较两组患者的体重、体重指数、腰围及血脂等指标。结果:治疗6个月后,两组的体重、体重指数、腰围和血脂指标均较治疗前显著好转。对两组治疗6个月后的净变化值加以比较,发现观察组除体重、体重指数、腰围的降低程度明显优于对照组外, 总胆固醇、LDL-C、HDL-C和甘油三酯水平的改善程度亦优于对照组。观察组不良反应发生率高于对照组,但程度多为轻度,可自行缓解。结论:奥利司他联合普伐他汀治疗肥胖伴异常脂蛋白血症是安全和有效的,其减轻体重和改善血脂异常的效果优于单用普伐他汀。

一个纤维蛋白原α链Arg 19 Gly突变导致的遗传性异常纤维蛋白原血症家系

目的对一个遗传性异常纤维蛋白原血症家系进行表型和基因型分析。方法采集先证者及其父母外周血进行常规出凝血检查,用Clauss法和免疫比浊法分别检测纤维蛋白原(Fbg)活性和抗原。抽提DNA,PCR扩增纤维蛋白原基因FGA、FGB和FGG所有外显子及其侧翼序列,DNA测序并与基因文库比对确定基因异常。结果先证者活化部分凝血酶原时间(aPTT)、凝血酶原时间(PT)正常,凝血酶时间(TT)为28.10 s,Fbg活性明显下降,抗原在正常范围内,活性显著低于抗原;其父表型检测结果与之相似。基因分析发现,先证者及其父亲Fbg、FGA基因第2外显子均存在A1211G杂合碱基置换,导致Arg19Gly错义突变。结论鉴定该病例为遗传性异常纤维蛋白原血症,Fbgα链Arg19Gly杂合错义突变是致病原因。

遗传性异常纤维蛋白原血症的实验室诊断现状分析

纤维蛋白原（fibrinogen,Fbg）是血浆中含量最高的一种凝血因子,在凝血酶的作用下,从纤维蛋白原转化为纤维蛋白,同时作为血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa的受体,参与血小板活化聚集,因此与出血性疾病及血栓性疾病密切相关。纤维蛋白原的异常通常分为高纤维蛋白原血症、低纤维蛋白原血症、无纤维蛋白原血症、异常纤维蛋白原血症和低异常纤维蛋白原血症5种类型,按病因可分为遗传性和获得性。

欧洲神经病学联合会/周围神经病学会关于异常蛋白血症伴发的脱髓鞘性周围神经病诊治的指南(首次修订版)

异常蛋白血症伴发的脱髓鞘性周围神经病（PDN）是一个疾病谱,在临床和电生理方面具有异质性。异常蛋白的类别、免疫特征以及致病性也有所不同,其中有些为浆细胞病变所致。异常蛋白可伴发脱髓鞘性和轴索性神经病[1]〔见本指南第5（4）部分简介〕。有些PDN的临床表现与慢性炎症性脱髓鞘性多神经病（CIDP）难以鉴别,

1个FGA基因c.103C>T杂合突变导致的遗传性异常纤维蛋白原血症家系分析

目的分析1个FGA基因c.103C>T杂合突变导致的遗传性异常纤维蛋白原血症家系的表型和基因型,并探讨其发病机制。方法采集先证者家系2代6人外周血,分别用血凝仪、生化分析仪及血细胞分析仪检测凝血相关指标、肝功能及血常规,Clauss法检测FIB水平,免疫比浊法检测FIB抗原;二代测序技术进行全基因组测序,筛选已知与凝血疾病高度相关的76个基因的全部外显子区域及旁侧内含子区域。结果先证者及其4个女儿均存在FIB水平降低及凝血酶时间(TT)延长,二代测序结果显示先证者及其4个女儿存在FGA基因第2外显子c.103C>T突变。结论导致本家系成员异常纤维蛋白原血症的分子机制是FGA基因c.103C>T杂合突变。

纤维蛋白原γ链9511/9512delG缺失突变导致的遗传性异常纤维蛋白原血症家系研究

目的对1例遗传性异常纤维蛋白原血症家系进行表型和基因型分析。方法检测凝血指标以明确诊断;用DNA直接测序法对患者纤维蛋白原(Fg)基因FGA、FGB和FGG的所有外显子及其侧翼序列进行测序寻找基因突变,对有突变的序列进行反向测序和TA克隆测序证实。结果先证者活化部分凝血酶原时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)正常,凝血酶时间(TT)为27.2s,Fg活性明显下降,抗原在正常范围内,活性显著低于抗原;先证者母亲、姐姐、女儿检测结果与之相似。基因分析发现,先证者及其母亲、姐姐、女儿呈Fg FGG基因9511/9512delG杂合突变,该突变来源于母系。结论 Fg FGG基因9511/9512delG突变为引起家系异常纤维蛋白原血症的原因。

冠心舒通胶囊治疗冠心病合并脂蛋白异常血症患者的临床研究

目的评价冠心舒通胶囊治疗冠心病合并脂蛋白异常血症患者的疗效评定。方法观察80例冠心病合并脂蛋白异常血症的门诊及临床患者,将其随机分为对照组及治疗组,对照组根据病情常规服用硝酸酯制剂,β受体阻滞剂、他汀类制剂,CCB、ARB类制剂,抗血小板聚集等药物。治疗组在上述药物基础上服用冠心舒通胶囊。观察14 d,对患者临床症状,心电图改善情况,血脂控制情况,中医症候改善情况等方面进行评价。结果经治疗后治疗组及对照组患者症状均有改善,但两组比较,治疗组优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论冠心舒通胶囊能有效改善冠心病患者的临床症状,改善中医症候,同时能够改善脂蛋白异常血症患者血脂情况,有效治疗冠心病合并脂蛋白异常血症。