VEGF在糖尿病视网膜病变破坏血-视网膜屏障机制中的研究新进展

糖尿病视网膜病变(DR)是成年人视力下降甚至失明的常见原因之一,由多种发病机制共同作用,其机制虽尚未完全阐明,但血-视网膜屏障破坏是DR的关键过程。血管内皮生长因子(VEGF)作为高度内皮特异的促血管内皮生长因子,是视网膜病理性新生血管形成、破坏血-视网膜屏障的关键因子,因此全面地了解VEGF促进DR血-视网膜屏障破坏的病因病机,成为深入探索DR发病机制的关键。文章围绕DR探讨了VEGF与视网膜血管内皮细胞间的通透性、血管炎性反应、细胞凋亡反应、氧化应激、线粒体损伤以及内质网应激之间的相关机制,以期为VEGF在DR破坏血-视网膜屏障机制研究提供参考。

血-视网膜屏障在视网膜静脉阻塞继发黄斑水肿中的研究进展

视网膜静脉阻塞(RVO)作为常见的眼部血管疾病,其继发的黄斑水肿(ME)是造成视力下降甚至失明的重要原因。血-视网膜屏障(BRB)的破坏是RVO继发ME发病的重要因素。RVO导致局部炎症和新生血管的生成,破坏细胞间的紧密连接,进而引起BRB结构和功能破坏。本文参考近年来相关文献,以BRB为切入点,对RVO继发ME的发病机制进行回顾,以助全面了解本病,探索新的治疗方案。

脂血症性视网膜病变的电生理学改变

PURPOSE: To report the electrophysiologic findings in a patient with lipaemia retinalis. DESIGN: Observational case report. METHODS: An 11-year-old girl wit h diabetes had hyperlipidemia and presented for ophthalmologic consultation. Fun dus examinations revealed milky discoloration of retinal vessels in both eyes. L aboratory testing disclosed hyperglycemia and markedly elevated level of triglyc erides and cholesterol. Although the visual acuity was not affected, the electro retinograms showed decrease amplitudes of a-and b-wave in both cone and rod re sponses. RESULTS: After correction of blood sugar and lipids with insulin and di et control, the lipaemia retinalis resolved, and the impaired ERG response rever sed within 1 week. CONCLUSIONS: Lipaemia retinalis usually resolves rapidly with out visual impairment after correction of hyperlipidemia. The reversible deficit s of electroretinogram response in lipaemia retinalis are reported for the first time. High level of triglycerides or cholesterol or both may impair retinal fun ction. The mechanism of an impaired electroretinogram remained speculative.

糖尿病患者白内障术后黄斑区视网膜厚度和血-房水屏障改变

目的定量检测糖尿病患者白内障术前和术后不同时期黄斑区视网膜厚度和前房水蛋白浓度,探讨其相互关系。方法分别采用光学相干断层扫描仪测量32例32眼糖尿病患者黄斑中心区视网膜厚度值,采用激光闪辉细胞计量仪测量前房平均闪辉计数值。结果术前1d、术后1d、3d、7d和30d时前房平均闪辉计数值分别为3.63pc·ms-1、29.54pc·ms-1、18·12pc·ms-1、10.68pc·ms-1和7.28pc·ms-1,黄斑中心区视网膜厚度分别为167.73μm、266.81μm、274.84μm、216.81μm和187.00μm。影响术后1d、7d和30d时黄斑中心区视网膜厚度的的独立因素都仅为前房平均闪辉计数值。结论糖尿病眼白内障术后血-房水屏障破坏先于黄斑区视网膜厚度改变而达到顶峰。采用前房闪辉计数值监测可以辅助判断糖尿病黄斑水肿的病程进展和治疗效果。

体外培养人视网膜微血管内皮细胞屏障功能的研究

目的:研究原代培养的人视网膜微血管内皮细胞屏障功能。方法:对人视网膜微血管内皮细胞进行原代培养并鉴定,第4代细胞接种于Polyester(PET)膜上,不同时点对滤膜表面行显微镜观察,通过紧密连接相关蛋白occludin的表达,间接反映细胞之间紧密连接的形成,应用共聚焦免疫显微镜观察2、3、4周occludin表达的变化;跨膜电阻(TER)检测屏障的稳定性,并通过测量正常培养条件和5μg/L的血管内皮生长因子(VEGF)干预下辣根过氧化物酶(HRP)通透性的改变反映屏障特性。结果:成功培养了人视网膜微血管内皮细胞,纯度可达95.8%。细胞接种1周后融合为单层,接种后2、3、4周细胞密度无明显变化,细胞接触紧密,呈单层生长,可见occludin在细胞相邻边界规则的表达;occludin在2、3、4周,在细胞内的分布逐渐移向相邻细胞交界处;2周时视网膜微血管内皮细胞跨上皮细胞电阻达(120.62±3.97)Ω/cm2,2、3、4周差异无显著(P>0.05);单层细胞的通透性检测结果显示,HRP从滤膜上方到达下方随时间延长呈线性增加,且在VEGF的干预下,各时点通透率明显增加(P<0.05)。结论:利用体外培养的人原代视网膜微血管内皮细胞建立单层细胞具有典型的屏障功能特性,可作为体外研究血视网膜内屏障的有用模型。

芪灯明目胶囊对高血糖大鼠血视网膜屏障影响的研究

目的:观察链脲佐菌素(STZ)诱发糖尿病大鼠在造模后血-视网膜屏障(blood-retina barrier,BRB)变化情况,并以阳性药为对照研究中药芪灯明目胶囊对STZ诱发糖尿病大鼠的视网膜血管渗漏影响。方法:采用STZ腹腔注射制作糖尿病大鼠模型,在造模后6mo内各时点(2wk;1,2,3,4,5,6mo)采用伊文思蓝灌注示踪显示血-视网膜的渗漏情况,在造模后3mo开始用中药芪灯明目胶囊(低中高剂量组分别给予125,250,500mg/kg体质量剂量的胶囊内容物灌胃),对照组用安多明胶囊(200mg/kg体质量剂量,相当于10倍成人剂量),灌胃3mo,观察药物对BRB的影响。结果:STZ糖尿病大鼠在2wk即可出现BRB的损害,并随着高血糖状态的持续而不断加重。对造模3moSTZ糖尿病模型大鼠连续灌胃中药芪灯治疗3mo,结果提示:中药芪灯对STZ糖尿病BRB有保护作用,可明显减少视网膜血管的渗漏。结论:STZ糖尿病模型大鼠在早期即可出现BRB损害,并随着高血糖的持续而加重,中药芪灯明目胶囊可减少高血糖导致的BRB损害。

糖尿病对血-视网膜屏障超微结构影响的研究进展

糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是全世界最主要的致盲性眼病,也是最严重和最常见的微血管病变之一。糖尿病可造成血-视网膜屏障的损害引起血管源性水肿和神经组织损伤,造成视力下降。内层血-视网膜屏障主要是由视网膜毛细血管内皮细胞的紧密连接构成,此屏障阻碍血液的渗透及内源性物质和外源性物质在视网膜中的自由扩散,使视网膜保持恒定的环境,有效的供应营养物质。糖尿病患者的视网膜中由于细胞因子、生长因子、晚期糖基化终产物、炎症、高血糖症和周细胞丢失的增加,导致视网膜血管内皮细胞通透性增加。本文就糖尿病所引起的血-视网膜屏障超微结构改变进行综述。

糖尿病大鼠视网膜中VEGF、PEDF的表达与血-视网膜屏障损伤

目的观察糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠视网膜中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和色素上皮源性因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)的表达及早期血-视网膜屏障的改变,探讨二者之间的关系。方法选取87只健康SD大鼠,应用链-脲佐菌素建立DM大鼠模型,随机分为正常对照组(N)、DM0.5个月组、DM1个月组、DM3个月组及DM5个月组。分别行RT-PCR及Western blot检测大鼠视网膜VEGF、PEDF的mENA及蛋白表达,应用伊文思蓝法及透射电镜法观察血-视网膜屏障损伤情况。结果正常大鼠视网膜有VEGF的mRNA及蛋白表达,DM0.5个月组表达开始增高,光密度值分别为0.5700±0.1580和0.5770±0.0279(均为P<0.05),随病程延长,表达量逐渐增高,至DM5个月组VEGF表达量约为正常对照组的2倍,分别为0.9560±0.0560和0.9790±0.0790(均为P<0.05)。PEDF mRNA表达于正常大鼠视网膜,DM1个月组表达开始减少,光密度值为0.3440±0.0437,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),至DM5个月组视网膜表达量减少至0.2360±0.0455,约为正常对照组的1/2(P<0.05)。PEDF蛋白在各组大鼠视网膜的表达与其mRNA表达趋势一致。伊文思蓝法结果显示DM大鼠视网膜血管渗漏较正常大鼠增强,DM0.5个月组鼠即有增高,达(2.6310±0.2725)μL·g-1·h-1(P<0.05),随病程延长,渗漏逐渐增强,至DM5个月组,伊文思蓝渗漏量达(10.0260±1.1121)μL·g-1·h-1,约为正常对照组的6倍(P<0.05)。同时DM1个月时血-视网膜屏障超微结构发生改变,且呈逐渐加重趋势。结论早期DM大鼠血-视网膜屏障损伤,VEGF的正性表达增多与PEDF的负性表达减少可能对此病理改变起一定的促进作用。

糖尿病大鼠血-视网膜屏障功能评估中伊文思蓝灌注视网膜铺片技术的改良和应用

背景 伊文思蓝（EB）灌注的大鼠视网膜铺片是实验研究过程中观察血-视网膜屏障（BRB）功能的常用方法,但以往视网膜标本经固定液处理后透光性差,仅能用激光扫描共焦显微镜进行观察,对实验设备要求较高. 目的 探讨EB灌注糖尿病（DM）大鼠视网膜后在PBS中制作透明视网膜标本,并用普通荧光显微镜观察BRB功能技术的可行性. 方法 应用随机数字表法将40只SD大鼠随机分为对照组、DM1个月组、DM 3个月组和DM 6个月组.将质量分数2％链脲佐菌素（STZ）溶于0.05 mmol/L枸橼酸缓冲液,以60 mg/kg的剂量一次性腹腔内注射建立大鼠DM模型,对照组大鼠腹腔内注射等容量枸橼酸缓冲液.分别于造模后1、3、6个月按45 mg/kg的剂量经大鼠股静脉注射30 g/L的EB溶液,注射后15 min摘除双侧眼球,立即置于PBS中完整剥离视网膜,将视网膜放射状切开并平铺于载玻片上,避光晾至完全透明,封片,置于荧光显微镜下观察并拍照.应用IPP6.0软件分析图像,测量EB渗漏区面积与视网膜面积的百分比. 结果 对照组大鼠视网膜血管形态和走行正常,EB在波长546 nm激发光下呈红色荧光,均匀充盈于血管腔.DM 1个月组大鼠视网膜背景荧光较对照组大鼠略增强;DM 3个月组大鼠视网膜背景荧光进一步增强,视网膜血管呈现节段性扩张,可见明显的红色高荧光区;DM 6个月组大鼠视网膜血管粗细不均,部分走行迂曲,可见片状低灌注区及大量高荧光区.对照组、DM 1个月组、DM 3个月组和DM 6个月组EB渗漏区面积百分比分别为（0.05±0.02）％、（0.27±0.06）％、（1.17±0.1 8）％和（4.77±0.66）％,总体比较差异有统计学意义（F=795.800,P＜0.001）,其中DM 3个月组和DM 6个月组大鼠视网膜EB渗漏区面积百分比值明湿高于对照组,差异均有统计学意义（q＆#39;=10.338、43.475,均P＜0.001）. 结论 改良的EB灌注视网膜铺片技术操作简单,普通荧光显微镜下即可清晰显示DM大鼠的BRB结构和动态变化.

枸杞多糖对糖尿病大鼠血糖、血脂及血-视网膜屏障通透性的影响

背景糖尿病视网膜病变（DR）的特征是毛细血管闭锁、微循环障碍和局部缺血性视网膜新生血管形成，其确切的发病机制尚不十分清楚。目的观察枸杞多糖（LBP）对糖尿病（DM）大鼠血糖、血脂、血一视网膜屏障通透性的影响，探讨LBP对DR的保护作用及机制。方法SD大鼠54只，按随机数字表法随机分为3组，每组18只。其中36只大鼠尾静脉注射45mg／kg链脲佐菌素（STZ）建立DM模型，72h后血糖〉16．7mol／L、尿糖阳性者为造模成功。成模后第2天LBP治疗组给予200mg／（kg·d）LBP灌胃，DM组给予等量生理盐水灌胃，其他18只正常鼠为正常对照组。各组大鼠造模后4、8、12周抽取心脏血检测血糖、甘油三酯和总胆固醇水平，获取视网膜组织，用伊文思蓝渗漏实验检测视网膜血管的渗透性。结果各时间点DM组和LBP治疗组大鼠的血糖水平均高于正常对照组。4、8、12周时LBP治疗组大鼠的血糖水平明显较同时间点DM组明显下降，下降幅度分别为57％、40％、36％，差异均有统计学意义（P〈0．01）。DM组大鼠各时间点甘油三酯浓度明显高于正常对照组，差异均有统计学意义（P〈0．01），LBP治疗组在4周、8周时甘油三酯的浓度与正常对照组比较差异均无统计学意义，而12周时高于正常对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）。DM组大鼠在8周、12周时血液中的总胆固醇浓度明显高于正常对照组，差异均有统计学意义（P〈0．01），而LBP治疗组在各时间点与正常对照组比较差异均无统计学意义（P〉O．05）。造模后4、8、12周大鼠视网膜血管渗透性增加，DM组伊文思蓝的渗透量分别为（26．23±2．00）、（29．78±1．78）、（34．08±3．03）μg／g，明显高于正常对照组的（12．34±4．30）、（12．76±2．11）和（12．45±4．40）μg／g，差异均有统计学意义（P〈0．01），各时间点LBP治疗组伊文思蓝的渗透量明显低于DM组，差异均有统计学意义（P〈0．01）。伊文思蓝的渗透量与血糖、甘油三酯的浓度变化均呈高度正相关（r=0．896、0．859，P=0．000），与总胆固醇的浓度变化呈显著正相关（r=0．770，P=0．000）。结论LBP可降低DM大鼠血糖及血脂水平，抑制DM大鼠血一视网膜屏障通透性的增加。

rAAV2-NTF2对糖尿病大鼠血视网膜屏障的保护作用

目的:观察2型重组腺相关病毒-核运输因子2(rAAV2-NTF2)对糖尿病大鼠血视网膜屏障功能损伤的拮抗作用。方法:伊凡思蓝(EB)灌注铺片观察糖尿病大鼠视网膜血管分布和形态。亚克隆构建pSNAV-NTF2载体,腺相关病毒包装形成rAAV2-NTF2。成年雄性Wistar大鼠,以右眼为实验眼,玻璃体腔注射4μLrAAV2-NTF2,左眼为对照眼,玻璃体腔注射rAAV2-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)4μL。1个月后取4只大鼠左眼,固定后取视网膜制备全视网膜铺片,荧光显微镜下观察EGFP表达情况。再行STZ腹腔注射诱导糖尿病,同时设单纯糖尿病组(diabetes,D组)和正常组(normal,N组)。糖尿病1个月后以45 mg/kg剂量静脉注射EB,循环2 h后1%多聚甲醛枸橼酸缓冲液灌注并摘除眼球取视网膜,置于甲酰胺中浸泡提取染料,用分光光度计测量甲酰胺中染料的浓度。结果:正常组大鼠可见在低背景荧光下视网膜血管对EB有很好的屏障作用,糖尿病2周大鼠视网膜血管仅见背景荧光增强,糖尿病1月后血管出现异常节段性扩张,局部血管周围EB渗漏。糖尿病1个月大鼠视网膜内EB浓度是正常组的4.67倍,P<0.01,提示糖尿病大鼠血-视网膜屏障受损。玻璃体腔注射rAAV2-NTF2,视网膜内EB浓度为(8.30±4.16)μg/g视网膜干重,较对侧眼(22.13±8.43)μg/g视网膜干重明显减少,可以部分改善血-视网膜屏障的破坏,降低EB-白蛋白渗漏(P<0.05)。结论:玻璃体腔注射rAAV2-NTF2可减轻糖尿病大鼠视网膜血-视网膜屏障功能的破坏,为糖尿病视网膜病变的基因治疗提供了实验依据。

糖尿病视网膜病变与血-视网膜屏障损伤机制研究进展

糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病较常见的并发症之一,是成人致盲的主要原因,严重影响糖尿病患者的生存质量。对于DR的发病机制研究目前尚未完善,相关假说涉及到血流动力学改变、血管内皮生长因子表达、晚期糖基化终产物增多、氧化应激反应等。血-视网膜屏障(blood-retina barrier,BRB)是由内皮细胞间的紧密连接、周细胞、色素上皮细胞等组成的具有选择性滤过的组织,起到保护视网膜细胞、视神经并提供稳定代谢环境的作用。BRB的结构破坏和通透性增加是DR的重要病理改变之一,从BRB的生理病理机制、宏观及微观变化两方面详细探讨DR中BRB的损伤机制,以期待为DR的临床病机及治疗手段提供更多的方向。

伊文思蓝检测急性高眼压后大鼠血-视网膜屏障的变化

目的：检测急性高眼压后大鼠血-视网膜屏障（BRB）的改变。方法：大鼠随机分为正常对照组、实验对照组和实验组（急性高眼压模型）。动物分别存活3h、12h、1d、3d、7d，处死前注射伊文思蓝（EB），共聚焦显微镜检测视网膜铺片和切片中EB的分布；用分光光度计定量视网膜EB的含量。结果：在急性高眼压后视网膜中可见，EB红色荧光斑点主要分布在节细胞层，3h、12h和1d还见于内核层。EB红色荧光斑点在视网膜中央部3h时开始增多，12h达高峰，然后逐渐减少；在视网膜周围部3h时最多，然后逐渐减少。进一步定量检测EB渗漏量呈相同的时空改变。结论：大鼠BRB在急性高眼压后的早期损伤更明显，晚期逐渐恢复；视网膜周围部先于中央部出现BRB严重破坏；BRB损伤主要分布于节细胞层。

两种糖尿病大鼠模型血-视网膜屏障对EB通透性的比较

目的探讨2种糖尿病大鼠模型血-视网膜屏障对伊凡思蓝(Evans-Blue,EB)通透性的改变。方法对照组及1周、4周和16周时Sprague-Dawley(SD)和Brown-Norway(BN)糖尿病大鼠,EB45mg·kg-1颈静脉注入,分别检测视网膜中EB含量。结果对照组及1周、4周和16周时SD和BN糖尿病大鼠视网膜标准化EB含量分别为(12.24±3·11)ng·mg-1、(21.68±4.41)ng·mg-1、(21.78±3.17)ng·mg-1、(23.56±4.05)ng·mg-1和(13.22±3.59)ng·mg-1、(23.41±4.47)ng·mg-1、(26.40±5.00)ng·mg-1、(31.01±4.46)ng·mg-1,糖尿病大鼠视网膜标准化EB含量明显高于对照组,其差异均有显著性(P<0·05)。2种不同种系大鼠相比,BN糖尿病大鼠1周、4周和16周时视网膜标准化EB含量均显著高于SD大鼠(P<0.05),而对照组差异无显著性(P>0.05)。结论通过检测视网膜内EB含量,可以比较精确的发现早期糖尿病大鼠视网膜病变中血-视网膜通透性的改变。不同大鼠种系的差异性决定了其对STZ诱导的糖尿病大鼠视网膜通透性改变的不同。

石斛多糖对糖尿病大鼠血-视网膜屏障的保护作用及其机制

摘要 背景糖尿病视网膜病变（DR）的发病机制涉及多条通路，近年来炎症因子相关的通路学说在DR发病中的作用越来越受到人们的关注。研究表明，高糖环境下视网膜内肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等促炎因子含量增加，从而加速视网膜中紧密连接蛋白的异常，导致血－视网膜屏障（BRB）破坏。研究发现石斛多糖可抑制TNF-α的高表达，但其在DR早期对TNF-α表达的影响尚不清楚。目的研究石斛多糖对糖尿病大鼠TNF-α诱导的BRB通透性异常及视网膜内紧密连接蛋白1（ZO-1）、闭合蛋白（occludin）、连接蛋白-5（claudin-5）表达的影响。方法将50只清洁级成年SD大鼠分为正常对照组、糖尿病模型组及低、中、高剂量石斛多糖组，每组10只大鼠，糖尿病模型组和低、中、高剂量石斛多糖组大鼠均采用链脲佐菌素腹腔内注射法诱导糖尿病模型。低、中、高剂量石斛多糖组于建模成功后6周按照分组分别用100、200及300 mg/（kg·d）石斛多糖灌胃，正常对照组和糖尿病模型组大鼠用生理盐水灌胃。干预后8周各组大鼠心脏灌注伊文思蓝并获取双侧眼球，分别进行相关指标检测，通过测定大鼠视网膜中伊文思蓝质量浓度评估大鼠视网膜渗漏量；采用Western blot法检测大鼠视网膜内ZO-1、occludin、claudin-5蛋白的相对表达量，采用ELISA法检测大鼠视网膜中及血清中TNF-α的质量浓度。结果正常对照组、糖尿病模型组及低、中、高石斛多糖组大鼠视网膜伊文思蓝渗漏量分别为（12.68±1.30）、（30.45±2.60）、（22.12±1.15）、（17.99±1.00）和（21.49±1.00）μg/μl，糖尿病模型组大鼠视网膜伊文思蓝渗漏量明显高于正常对照组，低、中、高石斛多糖组视网膜伊文思蓝渗漏量明显低于糖尿病模型组，差异均有统计学意义（均P〈0.01）。Western blot检测显示，糖尿病模型组大鼠视网膜中TNF-α蛋白相对表达量为1.12±0.10，明显高于正常对照组的0.27±0.03，低、中、高石斛多糖组视网膜中TNF-α蛋白表达量明显低于糖尿病模型组，ZO-1、occludin和claudin-5蛋白表达量明显高于糖尿病模型组，差异均有统计学意义（均P〈0.05）；ELISA法检测显示，糖尿病模型组大鼠视网膜和血清中TNF-α质量浓度明显高于正常对照组，低、中、高石斛多糖组大鼠视网膜和血清中TNF-α质量浓度明显低于糖尿病模型组，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。不同剂量石斛多糖组各指标的比较差异均无统计学意义（均P〉0.05）。结论石斛多糖可能通过下调糖尿病大鼠视网膜中TNF-α的表达和上调紧密连接蛋白的表达而改善糖尿病大鼠BRB通透性的异常。

当归补血汤加味对GK大鼠血-视网膜屏障保护作用的实验研究

目的:通过对GK大鼠早期视网膜病变进行评价,以明确糖尿病大鼠早期血-视网膜屏障的渗漏情况,并进一步探讨当归补血汤加味对血-视网膜屏障的保护作用。方法:24周龄GK大鼠随机分为模型组、导升明组、中药低剂量组、中药高剂量组,Wistar大鼠设为正常对照组。连续相对固定时间灌胃3个月。用伊凡思蓝(EB)方法检测视网膜血管渗透性。结果:模型组及各治疗组的血糖、血脂高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠视网膜组织中EB的渗透量明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05),经过治疗后,视网膜组织中EB的渗透量下降,其中中药高剂量组EB的渗透量与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:当归补血汤加味对GK大鼠的血糖、血脂基本无影响,并能降低GK大鼠血-视网膜屏障的渗漏,从而对糖尿病视网膜早期病变具有保护作用。

兔视网膜中度冲击伤后血视网膜屏障改变及其治疗的研究

目的：探讨兔视网膜中度冲击伤后血视网膜屏障的形态变化及超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和地塞米松的治疗作用。方法：建立兔视网膜中度冲击伤动物模型，采用硝酸镧示踪剂观察伤后血视网膜屏障的改变及药物治疗效果。结果：视网膜中度冲击伤后部分视网膜色素上皮细胞及感光细胞损害，血视网膜屏障轻度破坏和示踪剂向视网膜内渗漏，ＳＯＤ及大剂量地塞米松治疗可明显减轻兔视网膜组织的损伤，缩短病程，改善其功能。结论：ＳＯＤ及大剂量地塞米松对兔视网膜中度冲击伤有显著治疗效果。

急性高眼压后大鼠视网膜缺氧诱导因子-1α的上调促进了血-视网膜屏障损伤

目的：观察缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在大鼠急性高眼压后血-视网膜屏障（BRB）损伤中的作用。方法：大鼠随机分为正常对照组、假手术组和急性高眼压组。用免疫组织化学检测视网膜HIF-1α的表达；用分光光度计定量视网膜伊文思蓝（EB）的含量；给予HIF-1α抑制剂2-甲氧基雌二醇（2ME2）干预后再次检测视网膜HIF-1α的表达和定量视网膜EB的含量。结果：HIF-1α免疫组织化学结果显示视网膜HIF-1α在对照组未见阳性表达,在急性高眼压后3h HIF-1α阳性产物增多，12h时达高峰，然后逐渐减少；在3h和1d时视网膜周围部HIF-1α阳性产物明显比中央部多；各时间点HIF-1α阳性产物主要见于节细胞层，3h和12h HIF-1α阳性表达物还见于内核层。EB定量结果显示急性高眼压后的早期BRB已经受破坏，之后逐渐恢复，而且存在部位差异。2ME2干预后，免疫组织化学和EB定量显示在相同时间点、相同部位视网膜的HIF-1α表达以及EB渗漏量均明显减少。结论：急性高眼压后大鼠视网膜HIF-1α的上调促进了血-视网膜屏障损伤。

视神经切断激活小胶质细胞后血-视网膜屏障的功能状态

目的观察视神经切断激活视网膜小胶质细胞后血-视网膜屏障(BRB)的功能状态。方法自眶内切断18只成年大鼠左侧视神经,12只近侧断端留置浸有50g/L荧光金的明胶海绵,分别于术后7d或14d(每时间点各6只)处死动物,取左眼视网膜后固定,荧光显微镜下观察小胶质细胞的反应。另外6只存活7d或14d(每时间点各3只)后,股静脉注射30g/L伊文思蓝。2h后,以温生理盐水灌注动物,立即摘除双侧眼球,行冰冻切片,荧光显微镜下观察;右眼球为内对照。结果视神经切断后视网膜节细胞层活化的小胶质细胞随时间逐渐增多,部分小胶质细胞位于视神经层。术后7d和14d均未发现伊文思蓝渗漏至手术侧视网膜。结论视神经切断后视网膜内增多的活化小胶质细胞尚不足以破坏BRB,BRB的功能性完整得以维持。

糖可明对糖尿病视网膜病变中血-视网膜屏障的影响

目的探讨糖可明对糖尿病视网膜病变的影响。方法用链脲佐菌素(STZ)复制大鼠糖尿病视网膜病变模型,观察糖可明对模型动物血液生化、血-视网膜屏障(Blood-retinal barrier,BRB)渗漏和视网膜VEGF、occludin表达的影响。结果糖可明连续给药8周后,可明显降低GLU、TG和TC的含量(P<0.05~0.01);降低血-视网膜屏障的通透性;PCR结果显示,给药组大鼠视网膜occludin mRNA表达量显著增加(P<0.05~0.01);免疫组化实验发现糖可明可显著降低视网膜全层的VEGF表达(P<0.01)。结论糖可明通过下调糖尿病大鼠视网膜VEGF的表达和增加occludin的表达,从而发挥其保护BRB、降低BRB通透性的作用,延缓糖尿病视网膜病变的进程。