LncRNA MEG3靶向调节miR-17-5p对缺氧缺血性脑损伤新生小鼠血-脑屏障的影响

目的探讨LncRNA MEG3通过调节miR-17-5p对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生小鼠血-脑屏障的影响。方法90只C57BL小鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组、si-NC组、si-LncRNA MEG3组、si-LncRNA MEG3+anti-miR-NC组、si-LncRNA MEG3+anti-miR-17-5p组,每组15只。除对照组外,其余组小鼠构建HIBD模型,并采用Longa评分评估小鼠神经损伤情况;电镜观察脑组织周围血管内皮细胞超微结构;EB法测定小鼠血-脑屏障通透性;qRT-PCR法测定各组小鼠脑组织LncRNA MEG3、miR-17-5p水平;Western blotting法测定小鼠脑组织ZO-1、Occludin蛋白水平。结果与对照组相比,模型组小鼠血管内皮薄厚不均、多处呈现水肿状态;与模型组相比,si-LncRNA MEG3组小鼠血管内皮细胞逐渐连接紧密、薄厚较为均匀,水肿减少;与si-LncRNA MEG3组相比,si-LncRNA MEG3+anti-miR-17-5p组血管内皮细胞损伤加剧。与对照组相比,模型组小鼠神经功能缺损评分、脑含水量、EB含量、LncRNA MEG3水平显著升高,miR-17-5p水平、ZO-1及Occludin蛋白表达显著降低(均P<0.05)。与模型组相比,si-NC组小鼠神经功能缺损评分、脑含水量、EB含量、LncRNA MEG3水平、miR-17-5p水平、ZO-1及Occludin蛋白表达差异无统计学意义(均P>0.05),si-LncRNA MEG3组小鼠神经功能缺损评分、脑含水量、EB含量、LncRNA MEG3水平显著降低,miR-17-5p水平、ZO-1及Occludin蛋白表达显著升高(均P<0.05)。与si-LncRNA MEG3组相比,si-LncRNA MEG3+anti-miR-NC组小鼠神经功能缺损评分、脑含水量、EB含量、LncRNA MEG3水平、miR-17-5p水平、ZO-1及Occludin蛋白表达差异无统计学意义(均P>0.05),si-LncRNA MEG3+anti-miR-17-5p组小鼠神经功能缺损评分、脑含水量、EB含量显著升高,miR-17-5p水平、ZO-1及Occludin蛋白表达显著降低(均P<0.05)。结论LncRNA MEG3沉默可能通过上调miR-17-5p,降低HIBD新生小鼠血-脑屏障通透性,维持血-脑屏障对大脑的保护作用,保护脑组织。

细孔钻颅微创血肿清除术对高血压脑出血患者血-脑屏障指数、MBP水平的影响

目的 分析细孔钻颅微创血肿清除术对高血压脑出血(HICH)患者血-脑屏障(BBB)指数、髓鞘碱性蛋白(MBP)水平的影响。方法 回顾性分析2021年3月-2022年6月期间72例在我院收治的HICH患者病例资料,根据手术方式的不同分成传统组(n=35,行传统开颅血肿清除术)和微创组(n=37,行细孔钻颅微创血肿清除术),对比两组临床疗效、围手术期的指标、BBB指数及MBP水平,对比两组手术后并发症的情况。结果 微创组HICH患者总有效率为91.89%,明显高于传统组的74.29%(P<0.05);微创组HICH患者手术时间、术中出血量以及术后住院时间均优于传统组(P<0.05);术后1周,微创组和传统组术后BBB指数及MBP水平均较手术前下降(P<0.05),且相比传统组,微创组下降的效果更为明显(P<0.05);术后3个月,微创组HICH患者GOS评分高于传统组,微创组NIHSS评分较术前明显下降,且低于传统组(P<0.05);微创组HICH患者手术后感染、继发血肿的发生率显著低于传统组(P<0.05),两组对比血肿清除率以及发生其他并发症的情况差异不明显(P>0.05)。结论 细孔钻颅微创血肿清除术可有效降低BBB指数及MBP水平,提高HICH治疗的效果。

黄芪甲苷对大鼠脑缺血再灌注后血-脑屏障的保护作用及ZO-1蛋白表达的影响

目的探讨黄芪甲苷对大鼠脑缺血再灌注后血-脑屏障的保护作用及其相关蛋白ZO-1表达的影响。方法SD大鼠72只,随机分为假手术组、模型组和黄芪甲苷治疗A组(10mg/kg)、黄芪甲苷治疗B组(20mg/kg)。分别采用伊文思蓝及干湿法测定大鼠血-脑屏障的通透性,使用免疫组化与医学图像分析相结合的方法检测血-脑屏障上ZO-1蛋白的表达。结果与模型组相比,两黄芪甲苷治疗组大鼠脑组织中伊文思蓝含量及含水量显著降低,ZO-1蛋白表达增加(均P<0.05);两黄芪甲苷治疗组间相比,差异无统计学意义。结论黄芪甲苷可通过抑制脑缺血再灌注后血-脑屏障通透性的增高而发挥脑保护作用,其保护血-脑屏障的机制可能与上调ZO-1蛋白的表达有关。

新型通心络制剂对大鼠脑缺血再灌注后血-脑屏障损伤的保护作用

目的探讨新型通心络制剂对大鼠脑缺血再灌注后血-脑屏障损伤的保护作用。方法将78只SD大鼠随机分为假手术组(6只)、手术组(36只)、通心络组(36只),后两组根据缺血再灌注时间不同再分为脑缺血2h再灌注0.5h、2h、6h、12h、24h和48h组,每组6只;参照Longa线栓法制作大脑中动脉阻塞再灌注动物模型;采用酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清S100β蛋白;采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色法观察各组大鼠脑梗死体积。结果(1)在缺血再灌注0.5h、2h、6h、12h和24h时,通心络组血清S100β蛋白水平较同期手术组降低,差异有显著性(P<0.05)。(2)在缺血再灌注12h、24h和48h,通心络组脑梗死体积明显小于手术组,差异有显著性(P<0.05)。结论新型通心络制剂在脑缺血再灌注后的早期可以降低血清中S100β蛋白水平,减少脑梗死体积;其机制可能是通过保护血-脑屏障而发挥作用。

当归补血汤对大鼠局灶性脑缺血再灌注血-脑屏障和大脑皮质神经元的影响

目的:探讨当归补血汤对大鼠局灶性脑缺血再灌注后大脑皮质神经元的治疗作用。方法:将90只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、当归补血汤(高、中、低剂量)组。观察各组大鼠行为学缺陷、从股静脉注入伊文斯蓝溶液观察血-脑屏障通透性变化、用Nissl染色法观察大脑皮质神经元的形态和数量。结果:与模型组相比较,当归补血汤治疗组各剂量均能改善大鼠神经功能(P<0.05)、减少脑组织中伊文斯蓝含量(P<0.05)、增加大脑皮质神经元数量(P<0.05),并以中剂量组效果最好。结论:当归补血汤对缺血再灌注引发的大脑皮质神经元死亡有保护作用,这可能与其降低血-脑屏障通透性有关。

高血压脑出血患者血肿周围血-脑屏障超微结构的观察

目的动态观察高血压脑出血后不同时间血肿周围血-脑屏障(BBB)的超微结构。方法选取10例基底节区高血压脑出血患者,通过CT导向脑立体定向仪在血肿周围取脑组织标本,电镜下观察BBB的超微结构。结果脑出血12h后BBB胶质足板水肿,胞饮小泡增多;24h后内皮细胞线粒体肿胀,嵴断裂;48h后足板水肿明显,内皮细胞水肿,细胞核增大;72h胞质稀疏,基底膜断开;5d内皮细胞胞膜及核膜溶解,毛细血管塌陷。结论脑出血早期预防BBB的损害是治疗脑出血的重要方面。

鸭疫里默氏杆菌感染对鸭血-脑屏障机能的影响

给10日龄健康鸭颈部皮下接种鸭疫里默氏杆菌(RA)及颈静脉注射明胶酶,分别建立了感染与酶作用的动物模型。以脑脊液中白蛋白含量、血-脑屏障通透性及脑组织学变化等指标研究了感染及酶作用对血-脑屏障机能的影响。结果显示,鸭疫里默氏杆菌感染后第24、48、72、96 h和颈静脉注射明胶酶后第3、6、9、12 h,脑脊液中的白蛋白含量升高,血-脑屏障的通透性增大,基底膜粗糙、部分节段的连续性中断,脑血管周围水肿、管腔面不光滑、内皮细胞肿胀、连接处开放;感染鸭血清中利用明胶酶谱法能检测到鸭疫里默氏杆菌明胶酶。表明,鸭疫里默氏杆菌感染引起鸭血-脑屏障机能障碍,在此过程中明胶酶起着重要作用。

复元醒脑汤对糖尿病脑梗死大鼠血-脑屏障干预作用的实验研究

目的:观察复元醒脑汤对糖尿病脑梗死大鼠脑水肿和血-脑屏障通透性的干预作用。方法:120只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常组24只,糖尿病模型组96只。糖尿病造模成功后予高脂饲料喂养2周,然后将糖尿病大鼠随机分成糖尿病组、脑梗死假手术组(假手术组)、模型组、治疗组4组,分别作相应处理。治疗组每日予复元醒脑汤灌胃,正常组、糖尿病组、假手术组、模型组予等容量的生理盐水灌胃,每日2次,连续7d。观测各组大鼠神经缺损行为体征评分,处死后检测各组大鼠的脑组织含水量、脑血管通透性。结果:模型组与假手术组、糖尿病组、正常组比较,神经缺损行为体征评分升高,脑组织含水量增加,血-脑屏障通透性升高;治疗组与模型组相比,神经体征缺损明显改善,脑含水量、血-脑屏障通透性降低。结论:复元醒脑汤可降低血-脑屏障通透性,减轻脑水肿程度,改善神经功能缺损,从而治疗糖尿病脑梗死。

脑损伤后高血糖对大鼠血-脑屏障通透性的影响

目的 :研究脑损伤后高血糖对大鼠血 脑屏障通透性的影响。方法 :雄性Wistar大鼠 4 0只 ,随机分为 4组 :正常对照组 (Ⅰ组 ) ,高血糖组 (Ⅱ组 ) ,脑损伤后正常血糖组 (Ⅲ组 ) ,脑损伤后高血糖组 (Ⅳ组 )。应用流体冲击装置制作大鼠脑损伤模型 ,然后分别对高血糖及正常血糖组的血 脑屏障结构的损伤的标记物伊文蓝含量进行测定。结果 :在相同脑损伤的情况下 ,高血糖组的伊文蓝含量明显高于正常血糖组 (P <0 .0 1) ;同时以上 2组的伊文蓝含量均高于正常对照组及高血糖组 (无脑损伤组 ,P <0 .0 0 1) ;而正常对照组与高血糖组的伊文蓝含量无明显差异 (P >0 .0 5 )。结论 :脑损伤后高血糖使大鼠血

大鼠C6脑胶质瘤血-脑屏障的硝酸镧示踪电镜研究

目的研究C6脑胶质瘤不同区域血-脑屏障(BBB)的超微结构特征及血-脑肿瘤屏障(BBTB)通透性增高的途径。方法运用成瘤3周SD大鼠C6脑胶质瘤动物模型,取肿瘤中心、肿瘤边缘、距肿瘤边界2mm以内及2mm以外的同侧大脑半球和对侧大脑半球脑皮质等五个部位的脑组织,采用外源性硝酸镧透射电镜示踪法,观察BBB/BBTB超微结构特征。结果La3+在肿瘤中心与边缘部充填并通过血管内皮细胞之紧密连接至血管腔外-脑间质裂隙内,距肿瘤边界2mm以内的同侧大脑半球脑组织也有La3+渗出至局部基底膜,而其它观察脑区La3+则完全封闭于血管腔内;各部位脑血管内皮细胞胞浆内均无La3+;BM呈线状连续,管腔内无瘤细胞。结论C6胶质瘤紧密连接开放导致BBTB通透性增高;C6胶质瘤诱导的屏障功能破坏随其至肿瘤距离的增加而减弱。

早期应用丹参川芎嗪注射液对局灶性脑缺血-再灌注损伤大鼠血-脑屏障通透性的影响

目的:观察丹参川芎嗪注射液对脑缺血-再灌注(ischemic-reperfusion,IR)损伤大鼠血-脑屏障(blood brain barrier,BBB)通透性的影响。方法:荧光分光光度法测定大脑中动脉缺血-再灌注大鼠各个时间点伊文思蓝含量,在伊文思蓝漏出最多的时间点,比较丹参川芎嗪注射液组和盐水组伊文思蓝的含量。结果:再灌注后3h脑组织中伊文思蓝含量开始增加,24h达最高;在24h时给予丹参川芎嗪注射液,伊文思蓝含量低于盐水组(P<0.05)。结论:丹参川芎嗪注射液可以降低脑缺血-再灌注后BBB的通透性,对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤有保护作用。

超声联合微泡开放血-脑屏障及其影像学评价的研究进展

血-脑屏障（blood-brain barrier,BBB）是存在于血液和脑组织间的一种生物屏障系统,BBB通过限制大分子物质甚至许多小分子物质由血液进入脑组织而对脑组织内环境的稳定起重要作用。病理情况下,由于BBB的存在,许多治疗药物或诊断试剂也难以进入脑组织发挥作用。

尼膜同对大鼠脑缺血再灌注后血-脑屏障通透性和脑梗死体积的影响

目的 研究尼膜同对大鼠脑缺血再灌注后血 脑屏障 (BBB)通透性和脑梗死体积的影响。方法采用插线法制作脑缺血再灌注的大鼠模型 ,缺血 2h后再灌注。实验分尼膜同组和生理盐水对照组 ,每组分再灌注 6h、12h、2 4h、4 8h、72h 5个时段 ,再灌注后立即分别腹腔注射尼膜同 2mg/kg或等量的生理盐水 ,每12h注射 1次。用荧光法及透射电镜观察不同时段BBB通透性破坏的情况 ,TTC染色后计算梗死体积百分比。结果 脑缺血再灌注后随时间延长 ,BBB通透性和梗死体积百分比逐渐增加 ,且BBB通透性的增加呈现两个高峰 ,分别为再灌注后 12h和 4 8h ;尼膜同组BBB通透性及脑梗死体积百分比明显高于生理盐水对照组 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论 脑缺血再灌注增加BBB的通透性和脑梗死体积百分比 ,再灌注后给予尼膜同可加重这些病理变化。

提高药物跨越血-脑屏障的研究进展

1885年，德国细菌学家Ehdich发现静脉注射苯胺染料可使动物脑以外的各脏器着色．1903年的两项经典实验确立了血一脑屏障（blood-brain barrier，BBB）的概念，随后进一步明确了它的解剖部位和结构基础。在生理状态下血-脑屏障将中枢神经系统与其他系统相隔绝，使得大部分物质与免疫细胞不能随意进出，对维持中枢神经系统内环境稳定具有决定性作用；在病理状态下血-脑屏障被破坏通透性增加，允许部分药物通过。

血-脑屏障和血-神经屏障内皮细胞的比较研究

目的研究血-脑屏障与血-神经屏障内皮细胞在超微结构、通透性及标记物表达方面的差异。方法取大鼠前额叶皮层和坐骨神经。用电镜观察内皮细胞的超微结构;用免疫组织化学的方法检测转铁蛋白受体(OX-26)和内皮屏障抗原(EBA)的表达及微血管周围纤维蛋白原外渗。结果电镜显示,血-脑屏障和血-神经屏障微血管均为紧密连接,但血-神经屏障吞饮小泡较血-脑屏障多(P<0.05)。免疫组织化学显示,血-神经屏障OX-26和EBA阴性表达,微血管周围可见微量纤维蛋白原外渗;血-脑屏障OX-26和EBA均强阳性表达,微血管周围未见纤维蛋白原外渗。结论血-脑屏障与血-神经屏障内皮细胞虽然均为紧密连接,但两者在吞饮小泡数量、标记物表达及通透性等方面均存在差异。

糖尿病对脑缺血大鼠细胞间黏附分子-1表达及脑组织和血-脑屏障损害的影响

目的探讨糖尿病对脑缺血大鼠细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达及脑组织和血-脑屏障(BBB)损害的影响。方法 120只雄性SD大鼠,随机分为糖尿病组、正常对照组、糖尿病伴脑缺血组和脑缺血组,每组30只大鼠。后两组又分为脑缺血1 h、3 h、6 h、12 h、24 h亚组,每亚组6只大鼠。用链脲佐菌素腹腔注射制作糖尿病大鼠模型,用线栓法制作局灶性脑缺血模型。ICAM-1 mRNA的表达水平用逆转录PCR检测,分别用TTC染色法和伊文思蓝注射法检测大鼠脑梗死体积及BBB破坏的程度。结果脑缺血组各时间点亚组缺血侧脑组织ICAM-1 mRNA表达均显著高于正常对照组(均P<0.05);糖尿病伴脑缺血组各时间点亚组ICAM-1 mRNA表达均明显高于脑缺血组(均P<0.05)。糖尿病伴脑缺血组大鼠脑梗死体积及BBB开放程度均明显大于脑缺血组(均P<0.05)。结论糖尿病使脑缺血大鼠ICAM-1表达上调,并可加重脑组织及BBB损害,提示ICAM-1表达上调可能是糖尿病加重脑缺血损伤的机制之一。

活血化瘀注射液(HHI-I)对大鼠脑微循环、血-脑屏障和小鼠抗缺氧能力的有益影响

目的:研究HHI-I对大鼠脑微循环、血-脑屏障和小鼠抗缺氧能力的有益作用。方法:将探头放置软脑膜或插入脑实质用激光多普勒血流计测定大鼠脑微循环血流。除了对两部位微循环的药理作用进行观察外还研究了HHI-I对高分子右旋糖酐(10%,9mL/kg,静脉注射)引起的大鼠脑微循环障碍的保护作用。应用5%氧浓度缺氧箱研究了HHI-I对小鼠抗致死性缺氧的保护作用。应用苯肾上腺素引起大鼠高血压性血-脑屏障通透性破坏,以伊文思蓝为标记物研究了静脉注射HHI-I对通透性的影响。结果:HHI-I能增加大鼠脑微循环血流,并对脑微循环障碍有某些保护作用。HHI-I能降低小鼠致死性缺氧过程中的脑水肿。在增加脑血流的同时,HHI-I还能降低大鼠血-脑屏障通透性。结论:HHI-I对大鼠脑微循环、血-脑屏障和小鼠抗缺氧能力有一定的有益作用。

高血压脑出血患者血肿周围血-脑屏障葡萄糖转运蛋白1表达的研究

目的观察高血压脑出血(ICH)患者血肿周围血-脑屏障葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)表达的变化。方法采用免疫组化方法检测28例高血压ICH患者不同病程血肿周围脑组织GLUT1的表达情况。结果与对照组相比,ICH组发病12 h GLUT1表达开始增强,24 h、48 h表达最强(均P<0.01);72 h表达明显下降(P<0.01)。结论ICH早期血肿周围GLUT1表达增多,有助于恢复脑的能量代谢。

普罗布考对大鼠脑出血后MMP-9表达及血-脑屏障通透性的影响

目的讨论普罗布考对大鼠脑出血后基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达及血-脑屏障通透性的影响。方法采用自体动脉血注入大鼠尾壳核建立脑出血模型,将7 5只大鼠分成对照组、脑出血组、普罗布考组。各实验组分12h、1d、3d、5d、7d五个时间点,每个时间点5只大鼠。分别采用逆转录聚合酶链法(RT-PCR)、蛋白印迹法(Western blot)、伊文思兰染色法测定不同时间点的MMP-9 mRNA、MMP-9蛋白的表达和血-脑屏障通透性的变化。结果 MMP-9 mRNA、MMP-9蛋白的表达和血-脑屏障通透性在脑出血后1d开始升高,3d达到高峰,5d^7d开始下降。给予普罗布考治疗后,在1d、3d、5d、7d时间点MMP-9蛋白和血-脑屏障通透性明显下调,与脑出血组相比差异有统计学意义(P<0.01),而MMP-9 mRNA无明显变化(P>0.01)。12h时间点MMP-9蛋白和血-脑屏障通透性在普罗布考组与脑出血组差异无统计学意义(P>0.01)。结论普罗布考可以减轻大鼠脑出血后的MMP-9蛋白的高表达,降低血-脑屏障的通透性,从而减轻脑水肿程度。