西格列汀对局灶性脑缺血再灌注小鼠血-脑脊液屏障通透性的影响及抗凋亡作用

目的研究西格列汀(SIT)在非糖尿病的小鼠脑缺血再灌注(I/R)时的神经保护作用。方法采用大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,脑缺血60 min后实施再灌注。SIT按低剂量(40 mg·kg^(-1))、高剂量(80 mg·kg^(-1))在手术前口服给药3d,术后再次给药。术后24 h检测小鼠神经功能、梗死体积和脑水肿,通过Western blot评估Bcl-2和Akt的蛋白表达,RT-qPCR评估Bax和Bcl-2的转录水平。SIT对血-脑脊液屏障(BCFB)通透性的影响通过伊文思蓝渗出和Claudin-5的蛋白表达来测量。结果本研究结果表明,SIT可减轻CD-1小鼠大脑中动脉栓塞再灌注24h后的肢体功能障碍,减少脑梗死体积,减轻脑水肿。SIT显著增加Bcl-2和磷酸化Akt的蛋白表达水平,下调Bax、上调Bcl-2的基因表达。减少小鼠脑组织伊文思蓝渗出并增加Claudin-5的蛋白表达水平(^(均)P<0.05)。结论SIT在非糖尿病小鼠的脑I/R急性期,降低神经功能缺损评分、减少脑梗死体积、保护BCFB,具有脑保护作用,机制可能与抗凋亡有关。这些发现为急性缺血性脑血管病的治疗提供新的策略。

清热化痰解毒汤对缺血性脑卒中大鼠脑组织含水量、血-脑脊液屏障通透性及神经功能缺损评分的影响

目的探讨清热化痰解毒汤对实验性缺血性脑卒中大鼠脑组织含水量、血-脑脊液屏障通透性及神经功能缺损评分影响。方法采取单侧颈动脉结扎制作SD大鼠模型,分为假手术组、缺血模型组、中药治疗组(即清热化痰解毒汤)、尼莫地平组,采用干湿法测脑组织含水量、Garcia神经功能评分及伊文思兰示踪剂测出其漏出量。结果与假手术组(36.20±1.24)%比较,缺血模型组在缺血24 h脑组织的含水量开始有所缓慢增加,但与中药治疗组、尼莫地平组比较差异无统计学意义,而到缺血72 h时缺血模型组大鼠脑组织含水量(54.40±2.16)%则明显增加,与24 h时比较差异有统计学意义(P<0.05);中药治疗组在应用清热化痰解毒汤后其实验大鼠脑组织含水量明显减少,其中在缺血72 h时间点的脑组织含水量(42.30±1.12)%与缺血模型组比较差异有统计学意义(P<0.01);同时尼莫地平组在缺血72 h的时间点上实验大鼠脑组织的含水量(43.20±1.23)%亦较之缺血模型组明显减少,差异有统计学意义(P<0.01)。同时通过神经功能评分及伊文思兰示踪剂,发现72 h后中药治疗组及尼莫地平均与假手术组比较有统计学意义(P<0.01),神经功能缺损评分增加而血-脑脊液屏障通透性下降。结论清热化痰解毒汤对急性缺血性脑卒中大鼠脑组织有保护作用。

钙拮抗剂对大鼠脑缺血后血-脑脊液屏障通透性的影响

目的观察钙拮抗剂对大鼠脑缺血后血-脑脊液屏障(BBB)通透性的影响。方法制备脑缺血再灌注(CIR)大鼠模型150只,在大鼠缺血2 h后进行再灌注。将大鼠平均分为观察组(造模后腹腔注射尼莫地平)与对照组(造模后腹腔注射生理盐水),在6 h、12 h、24 h、48 h、72 h时间点分别进行再灌注,观察每个时间点BBB通透性损伤情况与梗死灶体积百分比。结果随着时间的延长,CIR后BBB通透性与梗死灶体积百分比出现逐步上升,且在12 h、48h达到双高峰。观察组的BBB通透性及脑梗死灶体积百分比的上升较对照组较为明显(P<0.05)。结论大鼠实验结果提示,CIR能够提升BBB的通透性,增加梗死灶体积百分比,而早期使用钙拮抗剂能够加重上述情况。

参芎葡萄糖注射液对低灌注大鼠血-脑脊液屏障通透性的影响

目的研究参芎葡萄糖注射液对低灌注大鼠血-脑脊液屏障通透性的影响。方法60只SPF级SD雄性大鼠采用随机数字表法分为假手术组、低灌注组和参芎组,每组20只。低灌注组和参芎组结扎颈总动脉制作脑缺血动物模型,假手术组只暴露颈总动脉不结扎。参芎组腹腔注射参芎葡萄糖注射液24 mg/kg,假手术组和低灌注组腹腔注射等量生理盐水。酶联免疫吸附试验检测血清白蛋白(SAlb)和脑脊液白蛋白(CAlb)含量;实时荧光定量PCR检测脉络丛组织ZO-1与Occludin的mRNA;激光共聚焦方法检测脉络丛组织ZO-1与Occludin的荧光强度。结果低灌注组CAlb、脑脊液及血清白蛋白商值(QAlb)高于假手术组,参芎组CAlb、QAlb低于低灌注组,差异有统计学意义(P<0.05);低灌注组与假手术组SAlb比较,差异无统计学意义(P>0.05);参芎组与低灌注组SAlb比较,差异无统计学意义(P>0.05)。低灌注组ZO-1、Occludin mRNA、荧光强度水平低于假手术组,参芎组ZO-1、Occludin mRNA、荧光强度高于低灌注组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论低灌注状态下,大鼠的血-脑脊液屏障通透性增加,参芎葡萄糖注射液在一定程度上对血-脑脊液屏障有保护作用。

肿瘤坏死因子-α对体外血脑脊液屏障模型通透性的影响及其机制研究

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对体外血脑脊液屏障(BBB)模型通透性的影响及其调控机制。方法利用脑微血管内皮细胞与星型胶质细胞共培养建立大鼠体外BBB模型,并随机分为正常对照组、TNF-α干预组和Y-27632预处理组。采用γ计数仪检测125I-BSA的通透量观察TNF-α对血脑脊液屏障通透性的影响。结果TNF-α使体外BBB模型对125I-BSA通透量明显增加,Y-27632预处理能明显拮抗TNF-α的上述作用(P<0.01)。结论TNF-α可导致BBB通透性增高,Rho/Rhok细胞信号传导通路可能参与此过程的调控。

铅暴露对大鼠血脑脊液屏障通透性、分泌及转运功能的影响

目的探讨铅暴露对血脑脊液屏障通透、分泌和转运功能的影响,为铅神经毒性机制研究提供依据。方法 SD大鼠分别饮用含有0.05%,0.1%和0.2%醋酸铅饮水8周(相当于醋酸铅80,160和320 mg·kg-1)。应用激光共聚焦免疫荧光法检测血清、脉络丛和脑脊液中铅含量;Morris迷宫测试潜伏期延长和穿台次数。股动脉灌注伊文氏蓝(EB)和荧光索钠(NaFI),检测脑脊液中EB和NaFI含量;应用激光共聚焦法进行脉络丛中紧密连接黏附分子(JAM)、闭合蛋白的表达分布;ELISA方法检测血清和脑脊液中甲状腺素运载蛋白和瘦素含量。结果染铅大鼠血清、脉络丛和脑脊液中的铅含量明显上升,尤其以CSF中铅含量的增加尤为显著。水迷宫数据显示,醋酸铅160和320 mg·kg-1染毒组大鼠的潜伏期分别为52±12和(89±19)s,显著高于正常对照组的(28±7)s(P<0.05);穿台次数显著低于正常对照组(P<0.05)。3个醋酸铅染毒组大鼠脑脊液中NaFI含量分别为0.94±0.09,1.02±0.03和(1.08±0.18)mg·L-1,均显著高于正常对照组(P<0.05)。与正常对照组比较,醋酸铅160和320 mg·kg-1染毒组大鼠脑脊液中EB含量明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。激光共聚焦免疫荧光检测结果显示,醋酸铅160和320 mg·kg-1染毒组大鼠脉络丛紧密连接蛋白JAM表达分别为正常对照组的44.9%和42.9%;且闭合蛋白表达也呈下降趋势。醋酸铅320 mg·kg-1染毒组大鼠脑脊液中转甲状腺素蛋白含量为(32.3±11.7)ng·g-1蛋白,显著低于正常对照组(P<0.05)。醋酸铅160和320 mg·kg-1组大鼠脑脊液瘦素含量显著下降(P<0.05)。结论铅染毒可导致血脑脊液屏障通透性增加、分泌和转运功能下降,这可能是铅致中枢神经系统损伤的机制之一。

七叶皂苷钠对低氧暴露下大鼠血-脑脊液屏障通透性变化的影响及其抗渗漏机制研究

七叶皂苷钠（sodium aescinate，SA）是从七叶树科植物天师栗的干燥成熟种子中提取的三萜皂苷钠盐，具有抗炎、消肿、改善微循环、清除氧自由基等神经保护作用，临床已广泛应用于创伤、放射等引起的脑水肿治疗。本文将大鼠暴露在模拟7000m的高原环境中，观察七叶皂苷钠对急性缺氧后血一脑脊液屏障（BBB）通透性以及咬合蛋白和Occludin、胞质附着蛋白、

脑脉通对老龄大鼠脑缺血再灌注血-脑脊液屏障损伤的保护作用

目的研究脑脉通对老龄大鼠脑缺血再灌注(I/R)血-脑脊液屏障(BBB)损伤的保护作用。方法采用线栓法复制局灶性脑缺血模型,分为假手术组、模型组、脑脉通组、尼莫地平组,后3组又分为脑缺血(I)3 h和I/R 6、12、24 h、3、6 d时间点。观察脑组织含水量、病理变化、免疫球蛋白(IgG)表达。结果模型组脑组织含水量升高,IgG漏出增加,BBB通透性增加。脑脉通降低脑组织含水量(I/R 24 h、3 d)、减少IgG漏出(I/R 24 h^6 d)、降低BBB通透性。结论脑脉通改善I/R脑损伤作用显著,其机制可能与改善BBB通透性、降低脑水肿有关。

缺血预处理对脑缺血血脑屏障通透性和MMP-9表达的影响

目的 研究缺血预处理 (IP)对再缺血脑组织血脑屏障通透性和MMP 9表达的影响。方法 3组SD大鼠分别给予 :①一侧颈内动脉注射生理盐水 (SI) ;②双侧颈总动脉夹闭 (BCAO) ;③双侧颈总动脉夹闭同时一侧颈内动脉注射生理盐水 (BS)处理。 2 4h后 ,应用动脉腔内线栓法作大脑中动脉阻断 (MCAO) ,观察 3种预处理对再缺血脑组织含水量、血脑屏障 (BBB)通透性和MMP 9表达的影响。结果 缺血 2 4和 48hBS组脑含水量均值分别为 82 .92 %和 83.12 % ,SI组和BCAO组分别为 85 .2 9%、85 .96 %和 86 .17%、85 .5 8% ;缺血 2 4和 48hBS组脑EB含量均值分别为 14.0 1和 11.74μg/mm3 ,明显低于SI和BCAO组 (P <0 .0 1) ;BS组MMP 9mR NA和蛋白水平的表达水平明显低于其他两组 (P <0 .0 1)。结论 诱导脑缺血耐受的BS预处理能明显减轻再缺血性脑水肿和BBB损伤 ,降低MMP

益肾通脉方对急性脑梗死缺血再灌注大鼠神经功能、血-脑脊液屏障及血液流变学指标水平的影响

目的:探讨益肾通脉方对急性脑梗死缺血再灌注大鼠神经功能、血-脑脊液屏障及血液流变学指标水平的影响。方法:选取180只健康SD雄性大鼠,随机分为假手术组、模型组和益肾通脉方组(低、中及高剂量),每组36只。制备大脑中动脉闭塞后再灌注大鼠模型,筛选出建模成功的大鼠,每组32只。假手术组大鼠在建模过程中仅进行血管分离,不进行动脉栓塞。益肾通脉方组大鼠给予益肾通脉方灌胃(低剂量组:25 mg/kg;中剂量组:50 mg/kg;高剂量组:100 mg/kg),假手术组与模型组大鼠给予等体积0.9%氯化钠溶液灌胃,连续1周。分别在治疗7、14 d检测大鼠的神经功能缺损情况;采用伊文思蓝(EB)染料检测大鼠血-脑脊液屏障通透性;剥取大鼠脑组织检测脑组织含水量与梗死体积;采用试剂盒检测大鼠超氧化物歧化酶(SOD)与丙二醛(MDA)表达水平;在大鼠断头取脑前,取大鼠主动脉血检测血液流变学各项指标水平。结果:治疗7、14 d,模型组大鼠神经功能缺损评分明显高于假手术组,且益肾通脉方组大鼠神经功能缺损评分明显低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。模型组大鼠脑组织EB含量、脑含水量、脑梗死体积及MDA表达水平明显高于假手术组,益肾通脉方组大鼠上述指标水平明显低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。模型组大鼠SOD水平明显低于假手术组,益肾通脉方组大鼠SOD水平明显高于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。模型组大鼠红细胞变形指数明显低于假手术组,红细胞刚性指数、聚集指数、血沉及红细胞压积明显高于假手术组;中、高剂量益肾通脉方组大鼠红细胞变形指数明显高于模型组,红细胞刚性指数、聚集指数、血沉及红细胞压积明显低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:益肾通脉方能够有效修复急性脑梗死缺血再灌注大鼠的神经功能,改善大鼠各项血液流变学指标,对血-脑脊液屏障起到一定的保护作用。

脑损伤后高血糖对大鼠血-脑屏障通透性的影响

目的 :研究脑损伤后高血糖对大鼠血 脑屏障通透性的影响。方法 :雄性Wistar大鼠 4 0只 ,随机分为 4组 :正常对照组 (Ⅰ组 ) ,高血糖组 (Ⅱ组 ) ,脑损伤后正常血糖组 (Ⅲ组 ) ,脑损伤后高血糖组 (Ⅳ组 )。应用流体冲击装置制作大鼠脑损伤模型 ,然后分别对高血糖及正常血糖组的血 脑屏障结构的损伤的标记物伊文蓝含量进行测定。结果 :在相同脑损伤的情况下 ,高血糖组的伊文蓝含量明显高于正常血糖组 (P <0 .0 1) ;同时以上 2组的伊文蓝含量均高于正常对照组及高血糖组 (无脑损伤组 ,P <0 .0 0 1) ;而正常对照组与高血糖组的伊文蓝含量无明显差异 (P >0 .0 5 )。结论 :脑损伤后高血糖使大鼠血

血红素氧合酶-1对大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障通透性的影响

目的:探讨血红素氧合酶(hemeoxygouase-1,HO-1)对大鼠局灶性脑缺血再灌注后血脑屏障(bloodbrainbarrier,BBB)通透性的影响。方法:健康成年雄性SD大鼠,体质量250～300g,采用线栓法制备局灶性脑缺血模型,通过免疫组化观察脑组织HO-1的表达,通过比色法测定脑组织中伊文思蓝(EB)的含量来反映血脑屏障通透性的改变。结果:缺血2h再灌注2h即见脑缺血区的周围大脑皮质及远隔区域有HO-1蛋白的表达,免疫阳性持续到再灌注后48h。缺血2h再灌注3hEB含量(1.36±0.10)g/L,BBB通透性开始增加,24h达高峰(5.64±1.30)g/L,48h后开始减弱。Znpp组EB含量(6.53±0.02)g/L较缺血2h再灌注24h增高。结论:脑缺血再灌注后HO-1快速高效表达,可能对BBB有保护作用。

冰片开放血-脑脊液屏障对实验性细菌性脑膜炎治疗影响的研究

目的探讨冰片开放血-脑脊液屏障(BCB)对实验性细菌性脑膜炎治疗的影响。方法采用日本大耳白兔作为实验动物,随机分为对照组、冰片组和脑膜炎组。经枕大池注入肺炎球菌悬液建立脑膜炎模型,以冰片作为开放BCB的制剂。以连续静脉注射丙戊酸钠后不同时间点的脑脊液中丙戊酸钠浓度变化作为判断BCB通透性的指标;硝酸镧示踪法观察脑组织表现作为BCB通透性的形态指标。给予脑膜炎动物头孢吡肟或冰片+头孢吡肟治疗,记录动物存亡情况;取脑脊液(CSF)进行细胞计数及生化检查,取脑组织作常规病理染色,以观察冰片开放BCB对实验性细菌性脑膜炎治疗的影响。结果给药后对照组CSF中丙戊酸钠浓度基本保持稳定,冰片组CSF中丙戊酸钠浓度于给药后0.5h时即高于对照组并逐渐上升,至6h时达高峰,然后开始下降,14h时浓度仍高于对照组。脑组织超微结构显示,对照组无硝酸镧颗粒通过BCB,脑膜炎组硝酸镧颗粒分布于毛细血管基底膜外,冰片组弥漫性分布于神经细胞间隙和轴突周围。给予头孢吡肟治疗后,脑膜炎+冰片组动物存活率(9/12,75%)明显高于脑膜炎组(6/18,66.7%)(P<0.05),但两组间CSF细胞数及蛋白、葡萄糖水平差异无统计学意义。近皮层脑组织HE染色显示,脑膜炎组可见脑组织大量炎症细胞渗出和软化坏死灶,血管“套袖”现象明显,而脑膜炎+冰片组脑组织内炎症细胞渗出较少,无血管“套袖”现象,无明显坏死软化灶。结论冰片确实能明显增加BCB的通透性并具有可逆性特点,抗生素联合冰片能改善实验性细菌性脑膜炎治疗效果,为细菌性脑膜炎的治疗提供了新的思路。

血管紧张素1-7对蛛网膜下腔出血后血脑屏障通透性的保护作用

目的分析血管紧张素Ang-(1-7)对蛛网膜下腔出血(SAH)后血脑屏障通透性的作用及机制。方法枕大池二次注血法制备SAH大鼠,伊文思蓝(Evans blue)检测Ang-(1-7)处理后SAH大鼠血脑屏障通透性及脑组织含水量;实时荧光定量PCR(RT-PCR)与蛋白免疫印迹法(Western blot)分析脑组织黏连蛋白ICAM-1、VCAM-1的表达。人工血性脑脊液(BCSF)刺激血管内皮细胞(HBMEC),检测细胞通透性及细胞增殖与凋亡情况。结果 Ang-(1-7)可降低SAH大鼠脑组织中Evans blue渗透量及脑组织含水量,具有剂量和时间依赖性,以10^(-5) mol/L Ang-(1-7)处理24h时变化最为显著,SAH大鼠脑组织中ICAM-1、VCAM-1表达水平显著上调。同时Ang-(1-7)作用的BCSF刺激的血管内皮细胞中Evans blue的渗透量明显减少,ICAM-1、VCAM-1的表达水平及细胞增殖活力显著增加,细胞凋亡减少。结论 Ang-(1-7)具有保护蛛网膜下腔出血后血脑屏障通透性作用。

β-七叶皂甙钠对大鼠实验性急性脊髓挤压损伤后血脊屏障通透性改变的保护作用

目的 观察 β -七叶皂甙钠对大鼠局部脊髓损伤后血脊屏障通透性改变以及局部组织水肿抑制性的干预作用。方法 通过静脉注射偶氮蓝 (EB) ,紫外分光光度计测量其在脊髓中的含量 ,判断相邻脊髓微循环的变化。切取损伤部位脊髓组织 ,应用电子天平测量标本干、湿重量 ,根据ElliottandJasper公式计算出干预前后水含量的变化。结果 β -七叶皂甙钠预处理后 ,损伤脊髓组织的水含量及EB含量均较对照组明显降低。 结论 静脉注射 β-七叶皂甙钠能抑制由于急性挤压损伤导致的大鼠脊髓血脊屏障通透性增加并由此导致的组织水肿的形成 ,因此 β -七叶皂甙钠对于急性脊髓损伤具有潜在治疗作用。

中枢神经感染患者血脑屏障通透性与脑脊液IgG的临床关系探讨

目的探讨中枢神经感染患者中血脑屏障通透性与脑脊液免疫球蛋白G(IgG)的临床关系。方法分别选取结核性脑膜炎、化脓性脑膜炎和病毒性脑膜炎各20例,另选取排除中枢神经感染的患者20例作为对照组。对比相关数据。结果 3种中枢神经感染患者和对照组患者脑脊液Ig G比较差异有统计学意义(P<0.05),且每两组之间数据比较差异有统计学意义(P<0.05);3种感染患者中通透性损害越严重,脑脊液IgG水平越高(P<0.05)。结论脑脊液Ig G可用来鉴别中枢神经感染类型,且和血脑屏障通透性损害程度存在明显的正向相关性。

凝血酶对血脑屏障通透性影响的实验研究

目的 探讨凝血酶 (thrombin,TM)对血脑屏障 (blood brain barrier,BBB)通透性的影响及其可能机制。方法 5 4只 SD大鼠随机分为 A、B、C 3组。 A组在右侧基底节立体定向注入 TM;B组注入 TM+组织蛋白酶 G(Cathepsin G,CATG) ;C组注入生理盐水。A、B组又随机分为注入后 6 h、2 4 h、4 8h、72 h亚组 ,应用干湿重法测定脑水含量 ,应用 Evans- blue测定 BBB通透性。结果 TM脑内注射后 6 h同基底节区 BBB通透性明显增加 (P<0 .0 5 ) ,2 4 h时达高峰 (P<0 .0 1) ,持续至 4 8h(P<0 .0 5 ) ,然后逐渐消退 ,脑水含量的变化规律与 BBB通透性的变化类似。TM+CATG组在各个时间点 BBB通透性和脑水含量与对照组比较均无明显差异 (P>0 .0 5 )。结论 TM增加 BBB通透性是其诱发脑水肿形成的主要机制。 TM对 BBB通透性的影响可能是通过激活蛋白酶激活受体 - 1(protease activated receptor- 1,PAR- 1)

大鼠局灶性脑缺血再灌注血脑屏障通透性变化及对Occludin、ZO-1和PKCδ蛋白水平的影响

目的探索大鼠局灶性脑缺血再灌注血脑屏障通透性的变化及可能的相关机制。方法Wistar健康雄性大鼠60只,制备局灶性脑缺血模型,观察并比较脑缺血再灌注6 h、12 h、24 h、48 h的血脑屏障通透性及紧密连接蛋白(Occludin)、胞质紧密黏连蛋白1抗体(ZO-1)和蛋白激酶(PK)Cδ表达的差异。结果脑缺血再灌注后脑组织含水量明显高于空白对照组,且随时间而升高(P<0.05);脑缺血再灌注后脑组织伊文思蓝(EB)含量明显高于空白对照组,且随时间而升高(P<0.05);脑缺血再灌注后脑组织Occludin蛋白、ZO-1蛋白表达量明显低于空白对照组(P<0.05);脑缺血再灌注后脑组织PKCδ蛋白表达量明显高于空白对照组(P<0.05)。结论局灶性脑缺血再灌注后脑组织含水量和血脑屏障通透性增加,可能与Occludin蛋白低表达、ZO-1蛋白和PKCδ蛋白高表达有关。

脑缺血再灌注损伤后血脑屏障通透性研究进展

血-脑屏障（blood brain barrier,BBB）为中枢神经系统毛细血管腔与神经组织之间存在的所有结构,是脑与血液及脑脊液之间的一种屏障,与中枢神经的变性、损伤和炎症密切相关[1-3].一般来说,BBB包括三部分：BBB、血-脑脊液屏障（blood cerebrospinal fluid barrier,BLB）和脑脊液-脑屏障（cerebrospinal fluid brain barrier,LBB）,其中BBB和BLB屏障解剖结构有类似之处,生理和病理意义重大.BBB的组织结构包括脑毛细血管内皮细胞（brain microvessel endothelial cells,BMECs）及其间的紧密连接（tight junction,TJ）、基膜和周细胞、星型胶质细胞终足形成的胶质膜和细胞外基质（extracelluler matrix,ECM）.