HPLC-柱后衍生荧光法测定水产品中河豚毒素含量结果的不确定度评定

通过建立HPLC-柱后衍生荧光法测定水产品中河豚毒素含量的不确定度评定方法,量化分析测定结果的不确定度分量,并对各分量相对贡献进行比较。结果表明:测定结果的不确定度主要来源于标准品的校准过程、样品称量、实验过程移取及定容、样品重复实验误差、前处理过程中的回收率不同等。其中校准不确定度中标准溶液配制的不确定度贡献最多,称样量不确定度最小;当水产品中河豚毒素的含量为90.6μg/kg时,其扩展不确定度为0.69μg/kg(包含因子k=2)。

薄层色谱-化学衍生荧光分光光度法测定槐米中芦丁的含量

目的 :建立一种适应性强、灵敏、准确的方法用于测定槐米中芦丁的含量。方法 :以 95 %乙醇为溶剂进行索氏提取 ;用醋酸乙酯 -甲酸 -水 (4∶ 1∶ 1)为展开剂分离 ;洗脱后以 10 % Al Cl3 甲醇溶液作为反应试剂 ,在 Ex=42 0 nm,Em=5 13 nm处测定荧光强度。结果 :此方法的线性范围为 0 .2～ 1.2μg/ml,平均回收率为 98.7% ,变异系数 RSD为 2 .71%。结论 :此方法稳定 ,重现性好 ,灵敏度高 。

芯片毛细管电泳-NDA柱前衍生荧光检测多巴胺及组胺

本文以汞灯为激发光源,利用自组装的高灵敏芯片毛细管电泳荧光光子计数器检测系统,NDA柱前衍生检测神经递质多巴胺和组胺.优化了NDA衍生多巴胺、组胺以及衍生后分离与检测的条件.本法多巴胺和组胺的检出限(S/N=3)分别为2.5×10-7mol/L、1.4×10-6mol/L.组胺和多巴胺可在45 s内分离和检测.

用柱后衍生荧光测定法检测食品中土霉素和四环素残留

应用高效液相色谱(HPLC)对动物性食品中土霉素(OTC)和四环素(TC)进行测定,样品经含乙二胺四乙酸二钠的丁二酸钠缓冲液除蛋白后,由SPE-C_(18)小柱提纯净化,经ODS—C_(18)柱分离后,用8％氧氯化锆溶液柱后衍生,与锆离子的螯合物在激发波长(Ex):406nm和发射波长(Em):515nm处检测。实验优化了锆试剂的浓度和柱后衍生的条件,提高了检出的灵敏度,土霉素和四环素的回收率分别为89.59％和92.59％,变异系数(CV)分别为4.98％和6.74％。土霉素和四环素的最低检出浓度(信噪比5:1)分别为3μg/L和5μg/L,线性范围为0.01～10μg/L,土霉素和四环素的相关系数分别为0.999 9和1.000 0。

应用柱后衍生荧光测定法检测牛奶和猪肉中土霉素和四环素残留量

目的 建立动物性食品中土霉素和四环素残留的高效液相荧光检测方法。方法 样品经含乙二胺四乙酸二钠的丁二酸钠缓冲液除蛋白后 ,由SPE C1 8小柱提纯净化 ,ODS C1 8柱分离 ,8%氧氯化锆溶液柱后衍生化 ,在激发波长 (Ex) 40 6nm和发射波长 (Em) 5 15nm处检测土霉素和四环素与锆离子的螯合物含量。结果 实验优化了锆试剂的浓度和柱后衍生的条件 ,土霉素和四环素的回收率分别为 89 5 9%和 92 5 9% ,变异系数 (CV)分别为 4 98%和 6 74%。最低检出浓度 (信噪比 5∶1)分别为 3ug L和 5ug L ,线性范围为 10ug L～ 10mg L ,相关系数分别为 0 9999和 1 0 0 0 0。结论 本方法能够稳定、快速、灵敏地检测动物性食品中土霉素和四环素残留量。

氨基糖苷类药物衍生荧光性质的研究及应用

氨基糖苷类药物庆大霉素、卡那霉素及小诺霉素本身有微弱荧光，当它们在碱性条件下加入L-精氨酸、硼酸并加热水解后，可产生较强荧光，这是因为氨基糖苷类药物水解后成为糖，糖在精氨酸，硼酸存在下可产生强的荧光。由此可建立庆大霉素、卡那霉素及小诺霉素这类氨基糖苷类抗生素衍生荧光法。庆大霉素、卡那霉素均在1．0×10^-6～1．5×10^-5mol／L范围内与荧光强度呈良好线性关系（r=0．9996，r=0．9994），小诺霉素在4．0×10^-7～8．0×10^-6mol／L范围内与荧光强度呈良好线性关系（r=0．9986），三者检出限分别为5．8×10^-7，6．1×10^-7和3．0×10^-8mol／L。

基于QuEChERS前处理的液相色谱-紫外检测串联柱后衍生荧光法测定蔬菜水果中13种农药残留

在运用Qu ECh ERS法对蔬果样品进行前处理的基础上,使用高效液相色谱紫外检测-衍生-荧光法测定常见蔬果中吡虫啉、啶虫脒、多菌灵和10种氨基甲酸酯类农药残留量。结果表明,13种农药仪器方法检出限在0.003~0.050 mg/kg之间,加标回收率在70.5%~112.0%之间,相对标准偏差在0.46%~8.10%之间,标准曲线线性良好,相关系数在0.998 3~0.999 9之间。此方法操作简便,有机溶剂用量少,准确度和精密度好,适合配备了高效液相色谱仪的基层实验室对常见蔬菜水果进行农药多残留检测。

液相色谱荧光衍生法在糖类物质分析中的应用

介绍了目前在液相色谱荧光衍生法分析糖类物质中常用的几类荧光衍生试剂及相应的衍生方法,对近期糖类物质分离分析中的液相色谱荧光检测方法做了系统综述。引用文献60篇。

氨基酸柱前衍生化的3种新荧光试剂的光谱特性及高效液相色谱研究

合成了３种新的荧光标记试剂；吖啶－Ｎ－乙酰氯（ＡＲＣ－Ｃｌ），咔唑－９－乙酰氯（ＣＲＡ－Ｃｌ）和 咔唑－９－丙酰氯（ＣＲＰ－Ｃｌ）。它们的最大发射和激发波长分别为 ４３０ｎｍ（λｅｘ＝４３０ ｎｍ），３６８ ｎｍ λｅｘ＝３３５ｎｍ ）和 ３６５ｎｍ（λｅｘ＝３４０ｎｍ ）。 ３种衍生化试剂与氨基酸形成的衍生物在ｐＨ ６．５的 条件下结合梯度洗脱程序在 Ｃ１８反相柱上对色谱条件进行了优化。每种氨基酸在 ５ ｐｍｏｌ的浓 度下的相对标准偏差小于４％，检测限达ｆｍｏｌ级。

柱前荧光衍生-高效液相色谱法测定尿中雌二醇

建立了对硝基苯甲酰氯柱前荧光衍生 高效液相色谱法测定尿中 1 7α 和 1 7β 雌二醇的方法。尿样经盐酸水解、固相萃取柱浓缩、净化分离后 ,在无水条件下与对硝基苯甲酰氯反应生成荧光产物 ,再用高效液相色谱 荧光检测器测定。流动相为乙腈 水 (5 5∶45 )。线性范围为 7.0× 1 0 - 3～ 1 0mg L ,检出限均为 7.0× 1 0 - 3mg L,相对标准差分别为 0 .93 %～ 1 .5 %和 0 .88%～ 1 .3 %。平均回收率分别为 83 .5 %和 88.2 %。

高效液相色谱-荧光衍生法快速测定地沟油中的长链脂肪醛

本研究利用地沟油精炼过程中会产生醛类化合物的特点,以O-(3-(9H-咔唑-9-基)丙基)羟胺为荧光衍生化试剂,采用高效液相色谱法测定己醛、庚醛、辛醛、壬醛、癸醛5种长链脂肪醛来鉴别地沟油及食用油中是否掺杂地沟油。10μL待测油样品溶于200μL异丙醇,在最佳条件下与O-(3-(9H-咔唑-9-基)丙基)羟胺反应生成稳定的衍生物,乙腈萃取后进样分析。以乙腈-水(90:10,V/V)为流动相,在λ_(ex)/λ_(em)=292 nm/348 nm下荧光检测,衍生物在C_(18)柱上15 min内可完全分离。检测5种脂肪醛的线性范围均为0.01~1.00μmol/L,检出限为0.05~0.10 nmol/L,加样回收率为95.6%~101.4%。待测油样品的测定结果表明,食用油基本不含上述5种脂肪醛,而精炼地沟油中5种脂肪醛含量显著增加,因此5种脂肪醛含量可作为检测地沟油的指标。本方法专属性强、灵敏度高、准确性好、方便、快捷,可用于快速检测地沟油。

手性荧光衍生化反相高效液相色谱法分析多巴胺

以R(-)-4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-(3-isothiocyanatopyrrolidino)-2,1,3-benzoxadiazole(R(-)-DBD-PyNCS)作为手性荧光衍生化试剂,用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)定量分析多巴胺.衍生化反应是在含有7%吡啶溶剂中,75℃温度条件下,进行40min,生成具有荧光特性的多巴胺衍生物(λex=460 nm,λem=550nm).生成的衍生物在流动相为乙腈-水(体积比35:65),流速为1.0mL/min,在DiamonsilTM C8(150 mm×4.6mm,i.d.,5 μm)色谱柱上保留时间约为15min.多巴胺衍生物在60～1 200ng/mL时与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 6),多巴胺浓度为1 mmol/L时,峰面积测定结果的相对标准偏差(RSD)为2.4%,检出限为12 ng/L(S/N=3).检测了盐酸多巴胺注射液中多巴胺的含量.

荧光衍生化法测定不同季节桑叶中1-脱氧野尻霉素的含量

目的:建立测定桑叶中1-脱氧野尻霉素(1-DNJ)含量的方法,并比较不同季节桑叶中1-DNJ的含量。方法:采用高效液相色谱法测定,以芴甲氧羰酰氯(FMOC-Cl)为柱前衍生化试剂,对衍生化条件进行了优化;色谱柱为Kromasil C18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%醋酸(50∶50),流速1.0mL/min,柱温30℃,荧光检测器激发波长254nm,发射波长322nm。结果:1-DNJ在10～35mg/L范围内线性良好(r=0.99959),检测限为0.80mg/L(S/N=3),平均回收率为95.38%,相对标准偏差2.28%(n=5)。桑叶中1-DNJ的含量在不同生长季节间存在显著差异。结论:方法简便、快速、准确,适用于桑叶中1-DNJ含量的定量分析。

手性荧光衍生化反相高效液相色谱法分离肾上腺素对映体

以R (- ) /S (+) 4 (N ,N dimethylaminosulfonyl) 7 (3 iso thiocyanatopyrrolidino) 2 ,1,3 benzoxadiazole(DBD PyNCS)为手性荧光衍生化试剂 ,用反相高效液相色谱法 (RP HPLC)对 DL 肾上腺素对映体进行分离。衍生化反应是在含有 7%吡啶的溶剂中 ,6 5℃温度条件下反应 35min ,生成具有荧光特性的肾上腺素非对映体衍生物(λex=4 6 0nm ,λem=5 5 0nm)。生成的非对映体衍生物在流动相为乙腈 水 (体积比为 2 8∶72 ) ,流速为 1 0mL/min时 ,在DiamonsilTMC18色谱柱 (15 0mm× 4 6mmi d ,5 μm)上分离度可达 2 6。肾上腺素对映体在 0 0 7g/L～ 0 5 0g/L时与峰面积呈良好的线性关系 (r =0 9995 ) ,峰面积测定结果的相对标准偏差为 4 3% (n =7) ,最低检测限为12ng/L(S/N =3)。

N-羟基琥珀酰亚胺-3-吲哚乙酸酯柱前衍生高效液相色谱分离及荧光测定肽及其水解物

本文首次报道了一种新的羧酸活性酯试剂，N-羟基琥珀酰亚胺-3-吲哚乙酸酯作为柱前荧光衍生试剂，流动相为10mmol／L柠檬酸-Na2HPO4－pH3．6的甲醇／水（20／80，V／V）溶液，C18柱，于λcx／λcm＝278nm／355nm处进行荧光检测，高效液相色谱分离测定了谷胱甘肽、二甘肽、谷氨酸、胱氨酸、甘氨酸．当S／N＝3时，检出限为0．2至2．5Pmol．

荧光衍生试剂1-[2-(对甲苯磺酸酯)乙基]-2-苯基咪唑[4,5-f]9,10-菲的合成及其在长链脂肪酸分析中的应用

合成了新的荧光衍生试剂1-[2-（对甲苯磺酸酯）乙基]-2-苯基眯唑[4，5-f]9，10-菲（TSEPIP），并将其作为柱前衍生化试剂，在EclipseXDB—C。色谱柱上采用梯度洗脱实现了11种长链（C20～C30）游离脂肪酸（FFA）衍生物的基线分离。利用柱后在线的串联质谱并以大气压化学电离源（APCI）的正离子模式实现了各组分的质谱定性。对土壤及3种苔藓（东亚毛灰藓、锦丝藓、羽平藓）中FFA组分的定量结果表明，苔藓植物从土壤中富集了大量的长链游离脂肪酸。荧光检测的激发波长和发射波长分别为260nm和380nm。线性回归系数大于0．9996．检测限为26．19～76．67fmol。所建立的方法具有良好的重现性．对实际样品的测定结果令人满意。

柱后紫外光解荧光衍生液相色谱法测定蔬菜中残留的15种苯脲除草剂

建立了蔬菜中15种苯脲除草剂残留的固相萃取-在线柱后紫外光分解和衍生化的高效液相色谱荧光检测分析方法。样品用乙腈提取,弗罗里硅土固相萃取柱净化,目标化合物由反相C18柱分离,经柱后紫外光分解和衍生化后进行荧光检测。对样品的前处理条件、液相色谱分离、柱后紫外光分解和衍生条件等进行了详细的研究。15种苯脲除草剂的高效液相色谱分离在乙腈-水梯度洗脱下完成,目标物的保留时间为9-31m in,线性范围内线性关系良好,相关系数为0.998 6-1.000 0;在洋葱、菠菜、黄瓜等样品中3个加标水平的平均回收率（n=3）为75.3%-121.6%,相对标准偏差为0.4%-11.6%;15种苯脲除草剂在蔬菜中的检出限为0.005-0.05m g/kg。该方法操作简便、灵敏度高、选择性好,符合多种农药残留分析的要求。

氨基酸衍生三维荧光法结合多维模式识别用于蜂蜜种类辨别研究

确认食品的种类和产地等信息是食品质量与安全研究的重要内容。基于蜂蜜中的氨基酸种类和含量的不同,应用甲醛和乙酰丙酮与蜂蜜中氨基酸发生荧光衍生反应对源自不同花源的蜂蜜进行种类辨别研究。实验首先研究了衍生剂用量、时间、温度及pH值对蜂蜜中氨基酸荧光衍生反应的影响。然后在激发光波长范围为300～500 nm和发射光波长范围380～580 nm下对衍生后的蜂蜜进行三维荧光检测,每个蜂蜜样品经检测后得到一个三维荧光光谱矩阵数据,五种蜂蜜共150个样品最后得到一个三维立方数据。将检测获得的三维荧光数据结合多维主成分分析（M-PCA）、自加权交替三线性分解法（SWATLD）及多维偏最小二乘辨别分析（N—PLS-DA）等多维模式识别方法,进行数据处理并获取五种蜂蜜的识别信息。三种多维模式识别方法分别都展示出不同种类蜂蜜的聚类趋势,相比较而言,由于N-PLS-DA充分利用了衍生蜂蜜荧光的所有信息,所以取得了更加准确和可靠的分类结果,对五种蜂蜜的总识别率为88%。研究结果显示基于氨基酸荧光衍生的多维模式识别方法可以用于蜂蜜种类的识别研究。该研究为无荧光或弱荧光自然物质的直接荧光辨别分析提供了一种新思路。

对酞内酰胺苯甲酰氯荧光衍生法液相色谱测定苯酚和氯代酚

近年来气相色谱法、薄层色谱法和高效液相色谱法已成为应用最广的测定酚类的方法。Tsuruta等提出了对酞内酰胺苯甲酰氯(4-2(phthalimidyl)benzoyl chloride,简称PIB-Cl)的合成方法,并将PIB-Cl作为胺类和醇类化合物的荧光衍生化试剂,但将它与酚类化合物进行衍生反应及相应的色谱应用还未见报道。本文提出了PIB-Cl与酚的反应。

荧光衍生化法测定新疆特色葡萄干中总亚硫酸盐含量

建立荧光衍生化法快速、准确测定新疆特色葡萄干中总亚硫酸盐的分析方法。用N-(9-吖啶基)马来酰亚胺为衍生化试剂,使其与葡萄干中的亚硫酸盐发生衍生化反应产生具有强荧光的衍生化产物,采用荧光光谱仪对其进行分析检测。结果表明,在1.0~43.2 mg/L质量浓度范围内相关系数(R^2)为0.999 3,方法的检出限为0.50 mg/L,3个添加水平时,平均回收率为92.2%~100.2%,相对标准偏差(n=3)不大于3.80%。利用该法对葡萄干中总亚硫酸盐的测定结果与国标法测得结果一致,说明该方法可快速准确地对新疆特色葡萄干中总亚硫酸盐进行测定,为干果中亚硫酸盐残留量的测定提供参考。