Trigger转座子衍生蛋白1对肝癌细胞生长的影响

细胞周期失调是肿瘤重要的标志之一,生物信息学分析结果表明,Trigger转座子衍生蛋白1(TIGD1)在临床肝癌组织中高表达且与细胞周期相关,但相关机制未知。为了探究TIGD1调控肝癌细胞生长的具体机制,首先,利用shRNA质粒构建靶向敲低TIGD1的肝癌细胞系Hep3B,并分析TIGD1敲低对肝癌细胞生长的影响,结果表明细胞生长受阻;接着,通过细胞流式技术分析TIGD1敲低对肝癌细胞周期进程的影响,结果显示,TIGD1敲低的Hep3B细胞系的细胞周期进程主要阻滞于G2/M期;然后,通过免疫沉淀(IP)实验验证TIGD1可能发生相互结合的蛋白分子,结果表明,TIGD1可能与Aurora激酶相互作用蛋白1(AURKAIP1)存在相互结合,进一步的Co-IP实验证实了TIGD1和AURKAIP1之间的相互作用。已知AURKAIP1可调控Aurora激酶A(AURKA)的蛋白酶体降解途径,AURKA是一种有丝分裂调控蛋白,与细胞周期进程密切相关。文中进一步探究TIGD1对AURKA蛋白水平的影响,实验结果表明,在TIGD1敲低的情况下,AURKA在Hep3B细胞系中的蛋白水平明显下调,mRNA水平没有明显变化。综上所述,TIGD1可能通过调控AURKA在肝癌细胞中的转录后水平来影响细胞周期进程,从而影响肝癌的发生发展。

纯化的结核菌素衍生蛋白免疫刺激后小鼠脑内的Fos表达

目的 进一步阐明中枢神经系统参与免疫调节的部位 .方法 用免疫组织化学方法观察纯化的结核菌素衍生蛋白 (PPD)免疫刺激后不同时间点小鼠脑内的 Fos蛋白表达 .结果 PPD初次免疫后 3,9,14,18和 2 1d时再追加免疫后7,14d的动物 ,孤束核、延髓腹外侧区、中央灰质、海马、新皮质等多数脑区在各个时间点均可见到较强的 Fos表达 .但不同时间点的 Fos表达不完全相同 ,尤为明显的是 ,追加免疫后扣带回出现明显的 Fos表达 ,且左侧较右侧强 .结论 免疫应答过程中有多个脑区参与对免疫信息的感知和调控 。

黄连煎剂对溃疡性结肠炎患者粪中性粒细胞衍生蛋白影响

目的:观察黄连煎剂对溃疡性结肠炎患者粪中性粒细胞衍生蛋白的影响。方法:将符合标准的80例轻中度溃疡性结肠炎患者随机分为治疗组和对照组。治疗组给予中药黄连煎剂保留灌肠治疗;对照组给予美沙拉嗪颗粒口服。治疗结束后,观察治疗效果,并测定治疗前后患者粪中性粒细胞衍生蛋白含量。结果:治疗组有效率为92.31%,对照组为89.47%,无明显差异(P>0.05);两组治疗前后粪中钙卫蛋白、乳铁蛋白水平变化均有统计学差异(P<0.05),组间比较无明显差异(P>0.05);治疗组患者脓血便和里急后重症状的缓解速度更快,优于对照组(P<0.05)。结论:黄连煎剂保留灌肠治疗轻中度溃疡性结肠炎疗效满意。

重组细胞因子基因衍生蛋白与干扰素α-2b分别联合恩替卡韦治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者疗效研究

目的观察比较应用重组细胞因子基因衍生蛋白或干扰素α-2b分别联合恩替卡韦治疗血清HBeAg阳性的慢性乙型肝炎(CHB)患者的疗效.方法2019年3月~2021年3月我院诊治的65例血清HBeAg阳性的CHB患者被分成两组,分别给予干扰素α-2b联合恩替卡韦治疗或重组细胞因子基因衍生蛋白联合恩替卡韦治疗48 w.常规检测血清生化学、血清学和病毒学指标.结果在治疗12 w末,恩替卡韦联合重组细胞因子基因衍生蛋白治疗组血清HBeAg转阴率和HBeAg血清转换率分别为34.4%和25.0%,均显著高于恩替卡韦联合干扰素α-2b治疗组的9.1%和6.1%,差异有统计学意义(P<0.05);在治疗48 w末,恩替卡韦联合重组细胞因子基因衍生蛋白治疗组血清ALT复常率、血清HBeAg转阴率和HBeAg血清转换率分别为87.5%、62.5%和40.6%,均显著高于恩替卡韦联合干扰素α-2b治疗组的78.8%、30.3%和18.2%,差异有统计学意义(P<0.05);在治疗期间,联合干扰素治疗组乏力和发热头痛发生率分别为21.2%和84.9%,显著高于联合衍生蛋白治疗组的3.1%和3.1%(P<0.05),而两组中性粒细胞减少、血小板减少、食欲下降和低钙血症等不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05).结论相比于干扰素α-2b联合恩替卡韦,应用重组细胞因子基因衍生蛋白联合恩替卡韦治疗血清HBeAg阳性的CHB患者能够获得更好的血清学转换率和较小的不良反应,值得进一步观察研究.

肠炎Ⅰ号灌肠方对溃疡性结肠炎患者粪中性粒细胞衍生蛋白的影响

目的:评估肠炎Ⅰ号灌肠方治疗溃疡性结肠炎的疗效及对粪中性粒细胞衍生蛋白的影响。方法:将64例轻、中度溃疡性结肠炎患者随机分为两组各32例。治疗组患者予肠炎Ⅰ号灌肠方保留灌肠;对照组患者予美沙拉嗪肠溶片口服。治疗结束后,评估临床疗效,并记录患者治疗前后粪便中的中性粒细胞衍生蛋白的含量。结果:治疗组总有效率为90.63%,对照组总有效率为87.50%,两组疗效比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组患者治疗后粪中性粒细胞衍生蛋白含量均降低,差异均有统计学意义(P<0.05);两组患者治疗后粪中性粒细胞衍生蛋白含量比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗组患者腹泻、脓血便消失时间低于对照组(P<0.05)。结论:肠炎Ⅰ号灌肠方治疗轻、中度溃疡性结肠炎的疗效显著,能有效减轻肠黏膜的炎症水平。

重组细胞因子基因衍生蛋白注射液(乐复能)治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎的疗效和安全性

目的观察重组细胞因子基因衍生蛋白注射液(乐复能)治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者的有效性及安全性。方法前瞻性收集2010年6月1日至2011年9月6日中南大学湘雅医院、中南大学湘雅二医院、中南大学湘雅三医院和湖南中医药大学第一附属医院收治的HBeAg阳性CHB患者360例。按照1∶1比例随机分为实验组(n=180)和对照组(n=180),实验组患者予乐复能,对照组患者予人干扰素α-2b,双盲治疗12周后进入开放标签阶段,在患者自愿基础上,实验组患者继续使用乐复能,对照组患者转向使用乐复能,治疗12周后停药随访12周和52周。治疗和随访阶段检查血常规、肝功能、HBV DNA等指标,分析乐复能治疗HBeAg阳性CHB患者的有效性。采用SAS 9.1.3对数据进行统计分析。结果双盲治疗12周后,实验组和对照组的HBeAg血清转阴率分别为27.11%和16.17%,差异具有统计学意义(χ^2=5.98,P<0.05),实验组的HBeAg血清学转换率、丙氨酸转氨酶(ALT)复常率,HBV DNA转阴率均高于对照组,但差异均无统计学意义(P>0.05)。进入开放标签阶段和随访阶段,实验组的HBeAg血清转阴率、HBeAg血清学转换率、HBV DNA转阴率及ALT复常率均继续升高。不良反应事件监测中,实验组患者的头痛、乏力发生率均低于对照组(P<0.05),其余与药物相关的重度不良事件在两组的差异无统计学意义(P>0.05)。结论乐复能可更好地促进CHB患者HBeAg转阴及血清学转换。乐复能治疗HBeAg阳性的CHB患者安全、有效。

血清中人再生胰岛衍生蛋白1α对阿尔茨海默病的早期诊断价值

目的通过比较阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)患者、轻度认知功能障碍(mild cognitive impairment,MCI)患者以及认知功能正常的健康对照者血清中人再生胰岛衍生蛋白1α(regenerating islet-derived 1αprotein,Reg-1α)表达水平的差异,探讨血清Reg-1α作为AD早期诊断标志物的临床意义。方法选取2015年6月至2017年6月浙江医院收治的60～90岁的93例AD患者(AD组)、82例MCI患者(MCI组)以及110例健康对照者(正常组),收集所有研究对象的外周血样本,分别采用ELISA法和实时荧光定量RT-PCR法检测血清中Reg-1α蛋白和m RNA的表达水平。结果 3组研究对象Reg-1α蛋白及m RNA表达水平的差异均有统计学意义(F=4.522、2.629,均P<0.05);AD组及MCI组Reg-1α蛋白及mR NA表达水平均显著高于正常组(q=-5.958、-6.914、-5.223、-7.679;均P<0.01);AD组Reg-1α蛋白表达水平显著高于MCI组(q=7.681,P<0.01),但Reg-1αm RNA表达水平与MCI组无明显差异(q=3.028,P>0.05)。结论血清中Reg-1α的表达水平与AD进展相关,或可作为AD的早期诊断标志物。

布氏菌素纯蛋白衍生物的研制

用三氯醋酸(TCA)及硫酸铵(AS)综合法从布氏菌菌液中制备了纯化的新型布氏菌素—布氏菌纯蛋白衍生物,简称“Br—PPD”。多次动物试验证明,Br—PPD具有良好的变态反应原性。用BrS_2菌株制备了3批Br—PPD,特异性蛋白含量均在95％以上,多糖、核酸含量均在3％以下。经Br—PPD与参考标准品标化后,其特异性和敏感性基本一致,两者反应曲线无显著差异。其它试验均达到Br—PPD生产规程要求。

非衍生芳香族蛋白氨基酸对映体的毛细管电泳手性拆分

以羟丙基_α_环糊精为手性选择剂 ,对苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸3种非衍生芳香族蛋白氨基酸的毛细管电泳分离和对映体手性拆分进行了研究 ;结果表明 ,背景电解质的 pH值、手性选择剂的浓度和柱温对分离效果影响较大 ;经过一系列实验优化 ,在选定的条件下 ,3种未衍生氨基酸混合物 ,不仅达到了相互之间的完全分离 ,而且每种氨基酸对映体均达到了完全手性拆分。

鱼类组蛋白H2A衍生抗菌肽研究进展

1971年,Boman等[1]在研究惜古比天蚕蛹时,发现其滞育蛹经外界刺激诱导后,在血淋巴产生了具有抑菌作用的多肽,随后这类多肽物质被命名为天蚕素。随着抗菌肽研究的不断深入,人类已经从哺乳动物、软体动物、甲壳动物、鱼类、昆虫、两栖动物到植物、细菌和病毒等[2-5]中均发现了抗菌肽。

血清抗结核菌纯蛋白衍生物IgG测定对结核病的诊断意义

作者采用ELISA法检测血清抗结核菌纯蛋白衍生物(PPD)IgG抗体。结果表明,该试验诊断结核病的敏感性为93.4％,特异性为98.5％,预计值有效性为97.3％,对结核病,尤其是细菌学诊断尚有一定困难的肺外结核具有重要的辅助诊断价值。

荚膜组织胞浆菌素纯蛋白衍生物的制备

目的研制荚膜组织胞浆菌素纯蛋白衍生物。方法采用液体表面膜培养方法培养荚膜组织胞浆菌,培养液经盐析和弱酸沉淀法纯化,再经透析和除菌,制成荚膜组织胞浆菌素纯蛋白衍生物原液,并进行豚鼠的皮肤反应试验和安全性检测。结果荚膜组织胞浆菌素纯蛋白衍生物的蛋白纯度达80%以上,其1μg/ml的浓度诱导的豚鼠皮肤反应与国外同类制品等效,且具有良好的安全性。结论荚膜组织胞浆菌素纯蛋白衍生物可作为体内诊断制品,用于检查人体荚膜组织胞浆菌的感染以及荚膜组织胞浆菌病的临床诊断。

阳离子明胶蛋白衍生物浆料性能及应用研究

研究阳离子明胶蛋白衍生物浆料的上浆性能及调浆工艺。自制了阳离子明胶蛋白衍生物浆料,测试了该浆料的浆液黏度和浆膜性能,将其用于纯棉14.6tex纱和涤/棉65/35 13tex混纺纱的上浆,并对阳离子明胶蛋白衍生物浆料的煮浆时间、温度和浓度进行了优化。试验表明:阳离子明胶蛋白衍生物浆料浆液浓度7%,95℃煮浆30min对纯棉纱的上浆效果较好;浆液浓度5%,95℃煮浆30min对涤/棉65/35 13tex混纺纱的上浆效果较好。认为:阳离子明胶蛋白衍生物浆料可以完全或部分替代难降解的PVA浆料。

豚鼠模型中结核菌素纯蛋白衍生物量效关系比较研究

目的在不同分枝杆菌致敏豚鼠模型中研究结核菌素纯蛋白衍生物(purified protein derivative of tuberculin,TB-PPD)的量效关系。方法将受试豚鼠随机分成6组:结核分枝杆菌H37Rv活菌致敏组、结核分枝杆菌临床株CMCC 94757、94754、94766致敏组、卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin vaccine,BCG)致敏组和灭活结核分枝杆菌H37Rv致敏组。各组豚鼠分别于左侧大腿腹股沟皮下注射相应致敏原,5~6周后,所有豚鼠于脊柱两侧皮内注射20 IU/m L TB-PPD和50 IU/m L TB-PPD各0.1 m L;于注射后24 h、48 h观察和记录局部硬结的纵径与横径,计算平均值。结果所有组别豚鼠接受两种规格TB-PPD皮试后,无论是24 h还是48 h,局部硬结反应直径均大于10 mm,全部阳性,阳转率均为100%。5 IU TB-PPD皮试反应强度高于2 IU TB-PPD,存在明显的剂量效应关系。其中,24 h结果显示:2 IU TB-PPD和5 IU TB-PPD在H37Rv活菌致敏组、94766致敏组、灭活H37Rv致敏组皮试反应大小差异无统计学意义(t=2.291、P=0.071;t=2.722、P=0.053;t=1.76、P=0.153),其余3组5 IU TB-PPD皮试反应强度高于2 IU TB-PPD,差异均有统计学意义(t=4.098、P=0.015;t=4.811、P=0.009;t=3.068、P=0.037)。48 h硬结反应和24 h、48 h平均硬结反应结果均显示:在各致敏组豚鼠模型中5 IU TB-PPD皮试反应强度均高于2 IU TB-PPD,皮试反应大小均有统计学差异(t=3.471、P=0.018;t=3.371、P=0.020;t=6.216、P=0.003;t=5.244、P=0.006;t=3.959、P=0.017;t=4.674、P=0.010;t=4.824、P=0.008;t=3.794、P=0.019;t=3.857、P=0.018;t=2.86、P=0.046;t=3.539、P=0.024;t=3.365、P=0.028)。结论各组豚鼠致敏模型中5 IU TB-PPD的效价均明显高于2 IU TB-PPD,存在较为明显的量效关系。各种感染状态下,虽然高剂量制品可诱导更强的迟发型超敏(delayed type hypersensitivity,DTH)反应,但低剂量制品也不影响其阳性检出率。

结核性脑膜炎抗结核菌纯蛋白衍生物抗体与脑脊液细胞学的相关性

目的探讨结核性脑膜炎(结脑)患者不同阶段抗结核菌纯蛋白衍生物(PPD)抗体阳性率及脑脊液细胞学变化,推测二者之间是否有相关性及其诊断价值。方法结脑患者26例,病毒性脑膜炎(病脑)患者30例,在发病1、2、3、4周分别测其脑脊液抗PPD抗体IgG及脑脊液细胞学结果。结果结脑组在发病早期1周内,抗PPD抗体IgG阳性率低,脑脊液细胞学浆细胞出现率低;发病2~3周,抗PPD抗体IgG阳性率升高,浆细胞出现比例升高;发病4周,经有效治疗后,抗PPD抗体IgG阳性率仍高,浆细胞比例降低或消失。病脑组在发病第1、2、3、4周脑脊液抗PPD抗体IgG阴性,脑脊液细胞学以淋巴细胞反应为主,浆细胞出现率低。结论结脑患者抗PPD抗体IgG阳性率低,浆细胞比例低或无;抗PPD抗体IgG阳性率高,浆细胞比例高,二者有相关性;二者结合可提高早期结脑诊断率。

嗜铬粒蛋白A衍生多肽CHR抑制LPS诱导的永生化脑微血管内皮细胞高通透性

目的探讨嗜铬粒蛋白A衍生多肽CHR(chromofungin)对LPS所诱导的永生化人脑微血管内皮细胞高通透性的影响。方法分别用LPS、CHR、CGA4-16作用于人脑微血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cells,HBMEC),用CCK8法检测不同浓度LPS刺激HBMEC细胞活力变化;EVOM法及Transwell小室法检测内皮细胞相对通透性;Western blot及RT-PCR法检测紧密连接蛋白(ZO-1和Claudin-5)的表达情况。结果与空白组相比,随着LPS浓度增加,HBMEC细胞的活性受到显著抑制(P<0.05)。随着LPS作用时间延长,其细胞内紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-5的表达逐渐下调,6 h后蛋白表达量降到最低(P<0.05),12 h和24 h后其蛋白表达与6 h相比无明显差异。LPS作用下HBMEC单层细胞电阻值明显降低(t=-18.214,P<0.001),细胞通透性显著升高(t=6.083,P=0.004),ZO-1、Claudin-5的蛋白和mRNA表达明显下调(P<0.05),而CHR可显著改善上述变化。结论嗜铬粒蛋白A衍生多肽CHR能通过上调紧密连接相关蛋白的表达从而改善LPS所致的脑微血管内皮细胞高通透性。

卡介菌纯蛋白衍生物皮试研究

目的 对卫生部成都生物制品研究所研制的卡介菌纯蛋白衍生物 (BCG -PPD)安全性及有效性考核。方法 于 1998年 5～ 11月在四川省人民医院等 3家单位进行了 Ⅲ 期临床研究 ,考核其在婴幼儿卡介苗接种阳转率、青少年结核感染流行病学调查和结核病患者临床辅助诊断 3方面的安全性及有效性。结果 通过对12 84名婴儿接种卡介苗后进行皮试 ,接种阳转率为 90 %以上 ;对 12 4名青少年进行结核感染流行病学调查以及对 5 5例结核患者的临床辅助诊断 ,结果与卫生部兰州生物制品研究所正式生产的BCG -PPD比较 ,其符合率为在 95 96 %～ 10 0 % ,所有受试者无 1例出现全身和局部不良反应。结论 说明成都所试制的BCG -PPD在上述 3个方面的人体使用上是安全有效的。

狂犬病毒糖蛋白衍生物作为靶脑载体初探

血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)阻碍了具有治疗潜力的大分子化合物从外周组织进入脑内。为了寻找一种高效、快速通过BBB的靶向性载体,实验通过罗丹明B标记的狂犬病毒糖蛋白衍生肽(RDP)注射入昆明小鼠体内,并于15 min、5 h取大脑、脊髓及肝、肾等外周组织,冷冻切片观察其在体内的分布,并通过构建pET28a-RDP-luciferase重组质粒,结果发现融合蛋白能快速地穿过血脑屏障分布于中枢神经系统,为治疗中枢神经系统的药物开发提供新的思路。

结核菌素纯蛋白衍生物皮肤试验智能测量系统的设计与应用分析

目的设计一种PPD皮肤试验智能测量系统,高效快速准确地采集皮试结果,并方便后期的疫情数据处理。方法通过分析皮试反应采集过程、查阅相关技术文献,找出符合检测流程的自动采集过程,研究团队的一线工作人员与开发技术人员确定系统的软、硬件结构及功能。结果传统方法的测量平均值为(10.5±3.4)mm,智能测量设备测量平均值为(10.7±3.4)mm。使用配对秩和检验对两组测量值进行比较(Z=-1.694,P=0.09),根据两组测量值进行阳性级别划分,对智能测量系统与传统测量方法的测量结果划分阳性级别进行卡方检验(χ^(2)=2.12,P=0.35)。使用该设备发现中、强阳性人群的灵敏度(93%)和特异度(100%)较高,配对卡方检验结果(校正χ^(2)=1.33,P=0.25),差异均无统计学意义。结论智能测量系统显著提高现场测量效率。经现场测量及比较,智能测量系统与传统方法测量结果无差异。PPD皮肤试验智能测量系统可提高工作效率,保证测量准确性,值得推广。