衔接蛋白失能同源物2通过抑制NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3对结核性胸膜炎大鼠炎症和氧化应激的影响

目的:探讨衔接蛋白失能同源物2(DAB2)抑制NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)对结核性胸膜炎大鼠炎症和氧化应激的影响。方法:按照随机数字法将60只SPF级雄性SD大鼠分为四组,每组40只。除正常对照组外,结核性胸膜炎组、DAB2组和pcDNA-NLRP3组进行建模处理,以第2天是否抽出胸腔积液为模型建立成功。正常对照组不注射结核分枝杆菌H37RV悬液,DAB2组建模后第2天静脉注射AAV9-DAB2质粒,每天1次,连续注射7 d,DAB2+pcDNA-NLRP3组在注射AAV9-DAB2质粒500μg/L的同时注射pcDNA-NLRP380μl,正常对照组和结核性胸膜炎组的大鼠尾静脉注射0.9%氯化钠溶液。进行各组呼吸功能指标测定,收集胸腔积液,记录积液量,观察3、5、7 d的胸腔积液粘连性情况,HE染色观察胸膜组织病理学情况,Western blot检测胸膜组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)、基质金属蛋白酶1(MMP-1)和MMP-9蛋白表达,荧光探针DCFH-DA分析检测活性氧(ROS)的水平。结果:与正常组相比,结核性胸膜炎组的大鼠的胸腔积液和胸膜厚度明显增加,用力肺活量(FVC)、最大呼气流量(PEF)、用力呼气容积(FEV)0.3和FEV0.3/FVC显著降低,TNF-α、IL-8、MMP-1和MMP-9蛋白表达显著升高,基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP-1)蛋白表达显著降低,丙二醛(MDA)水平升高,超氧化物歧化酶(SOD)水平降低,ROS累积量明显升高(均P<0.001);与结核性胸膜炎组相比,DAB2组大鼠胸腔积液和胸膜厚度显著降低,FVC、PEF、FEV0.3和FEV0.3/FVC明显升高,DAB2组大鼠胸膜组织中的TNF-α、IL-8、MMP-1和MMP-9蛋白表达明显降低,TIMP-1水平明显升高,MDA水平降低,SOD水平升高,ROS累积量明显降低(均P<0.001);与DAB2组相比,DAB2+pcDNA-NLRP3组大鼠胸腔积液和胸膜厚度明显升高,FVC、PEF、FEV0.3和FEV0.3/FVC明显降低,DAB2+pcDNA-NLRP3组的TNF-α、IL-8、MMP-1和MMP-9蛋白表达明显升高,TIMP-1蛋白表达显著降低,MDA水平明显升高,SOD水平显著降低,ROS累积量显著升高(均P<0.001),各组大鼠在3、5、7 d的胸腔积液粘连性评分比较采用重复测量设计的方差分析,结果显示,不同时间点的胸腔积液粘连性评分比较差异具有统计学意义(均P<0.001);各组胸腔积液粘连性评分比较差异具有统计学意义(均P<0.001);各组胸腔积液粘连性评分变化趋势比较差异有统计学意义(均P<0.001);与模型组相比,DAB2组大鼠的胸膜内和肺间质内血管充血症状减轻,有少量的纤维组织增生,上皮样细胞团以及凝固型坏死也明显减少,淋巴细胞和中性粒细胞浸润也明显减少;与DAB2组相比,DAB2+pcDNA-NLRP3组大鼠的胸膜内和肺间质内血管充血症状加重,出现的纤维组织增生,上皮样细胞团以及凝固型坏死也明显增多,淋巴细胞和中性粒细胞浸润也明显增加。结论:DAB2通过抑制NLRP3的活性促进胸腔积液的吸收,降低胸膜厚度和粘连发生率,降低炎症反应和氧化应激水平,缓解结核性胸膜炎的进展。

动物细胞培养及单克隆抗体

932997从酶促逆向 PCR 建成的蛋白衔接物库中筛选活性单链 Fv 抗体[英]/Stemmer,W.P.C.…//Bio Techniques.-1993,14(2).-256～265[译自 DBA,1993,12(6),93-03293]为了构建位点定向突变的大基因库,开发了酶促逆向聚合酶链反应(EIPCRM)

物流业呼唤标准化

我国物流要走上快速、健康的发展道路,物流标准化是关键。物流标准化能够使不同的企业、不同的物流环节有效衔接,尽量减少衔接处的物流成本。但是我国的物流标准化还有很多问题,对这些问题进行分析之后,本文提出了解决方案。

Genex生产重组单链抗体结合蛋白

Genex公司利用它专有的计算机辅助方法来设计出有单克隆抗体结合特性但能在大肠杆菌中生产的蛋白。公司把一单克隆抗体的可变轻链和重链的基因结合起来,以生产出单个多肽链。该多肽含有一短肽衔接物。公司的Robert Bird及其同事已生产了一种专门与牛生长激素结合。或与荧光素结合的肽。该单链结合蛋白仅是单克隆抗体大小的六分之一。

资讯

《新知客》携手CCTV3"想挑战吗?"节目2008年3月,来自德国的Isabelle Butz和Guenter WillibaldKiebel参加了CCTV的《想挑战吗?》节目,他们的挑战项目是由Isabelle驾驶一辆汽车拖动另一辆汽车前进六米。

昆明二环路石虎关立交桥梁设计关键性技术

研究目的:石虎关立交控制因素众多,桥梁设计复杂。本文对桥梁结构设计过程中的要点进行分析,重点对新旧桥衔接、跨铁路枢纽桥式方案论证、既有桥上施工方案、异型结构设置等关键性技术问题进行总结。研究结论:提出了城市桥梁结构设计的多种可行、灵活的处理方案,从而可以尽量避免设置复杂结构物,同时还能降低工程造价,缩短施工周期。