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鹅星状病毒衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体的制备和鉴定 被引量:9
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作者 吕炫 张淼 +8 位作者 胡增金 李佳明 张冲 朱英奇 魏娟文 吴琼 张瑞辰 夏伦志 王桂军 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2021年第2期412-417,共6页
采用RT-PCR扩增获得鹅星状病毒(Goose astrovirus)的衣壳纤突蛋白基因vp27,并将其克隆至pCold-SUMO原核表达载体。重组表达载体pCold-vp27经过测序和双酶切验证正确后,转化到感受态细胞Rosetta。挑取阳性克隆子,利用异丙基硫代半乳糖苷... 采用RT-PCR扩增获得鹅星状病毒(Goose astrovirus)的衣壳纤突蛋白基因vp27,并将其克隆至pCold-SUMO原核表达载体。重组表达载体pCold-vp27经过测序和双酶切验证正确后,转化到感受态细胞Rosetta。挑取阳性克隆子,利用异丙基硫代半乳糖苷诱导表达鹅星状病毒衣壳纤突重组蛋白,使用镍柱纯化衣壳纤突蛋白VP27,将定量的重组蛋白免疫BALB/c小鼠。利用ELISA、Western blot和IFA鉴定鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体。结果显示,鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体的效价大于1∶64000,Western blot试验结果证明了鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体的特异性,IFA试验结果证明鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体能够识别天然的鹅星状病毒衣壳纤突蛋白VP27。 展开更多
关键词 鹅星状病毒 衣壳纤突蛋白vp27 多克隆抗体
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新城疫病毒La Sota株热损伤靶点的初步分析
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作者 曾敏倩 焦嘉杰 +7 位作者 左晓昕 王军宁 赵艳红 冯磊 卢宇 吕芳 周斌 侯继波 《中国家禽》 北大核心 2024年第2期59-67,共9页
为探索新城疫病毒不耐热毒株La Sota热损伤靶点,以期为新型耐热疫苗研发提供理论依据,试验通过检测加热前后La Sota株的吸附及内化功能,考察纤突蛋白HN和F活性变化情况,以及核衣壳完整性,综合分析新城疫病毒热损伤靶点。结果显示:37℃加... 为探索新城疫病毒不耐热毒株La Sota热损伤靶点,以期为新型耐热疫苗研发提供理论依据,试验通过检测加热前后La Sota株的吸附及内化功能,考察纤突蛋白HN和F活性变化情况,以及核衣壳完整性,综合分析新城疫病毒热损伤靶点。结果显示:37℃加热24 h后F蛋白活性首先受损,表现为内化功能显著下降(0.01<P<0.05),56℃加热15 min后HN和F蛋白活性几乎丧失,表现为吸附及内化功能均极显著下降(P<0.01);高温加热后,病毒核衣壳完整性显著降低,病毒粒子破损且失去纤突结构,表现为吸附及内化功能极显著下降(P<0.01)。研究表明,La Sota株热损伤靶点与加热温度和时间密切相关:中温下(≤56℃)病毒热损伤靶点主要在HN和F蛋白,高温下(≥80℃)病毒热损伤靶点为纤突蛋白和核衣壳;纤突蛋白的热敏感性高于核衣壳,且F蛋白受损早于HN蛋白。 展开更多
关键词 新城疫病毒 La Sota株 热损伤靶点 吸附 内化 蛋白 衣壳
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IBV H52疫苗株主要结构蛋白基因信息解析 被引量:2
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作者 曹伟胜 廖明 +4 位作者 任涛 罗开健 张桂红 袁少华 辛朝安 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期635-637,共3页
In this study, the genes encoding main structural proteins and 3′ untranslated region (UTR) of a commercial domestic vaccine strain H52 and a commercial foreign vaccine strain H52 of infectious bronchitis virus (IBV)... In this study, the genes encoding main structural proteins and 3′ untranslated region (UTR) of a commercial domestic vaccine strain H52 and a commercial foreign vaccine strain H52 of infectious bronchitis virus (IBV) were obtained by RT-PCR, then were cloned and sequenced respectively. The sequence analyses showed the genetic information of S1 gene, M gene, N gene and 3′UTR of domestic vaccine strain H52 was remarkably different from that of foreign H52 strain and that of published sequences of H52 strain. Compared with foreign H52 strain, this domestic H52 strain was genetically closer with M41 strain and was located in the same branch of phylogenetic tree based on the sequences of main structural protein genes. The results strongly suggested that it was necessary to build genetic information archives of seed stock of IBV vaccine strains. 展开更多
关键词 结构蛋白 基因信息 鸡传染性支气管炎病毒 IBV 疫苗株 解析 病毒基因组 衣壳蛋白 蛋白 养禽业 RNA 蛋白 病原
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牛病毒性腹泻病毒蛋白与宿主蛋白相互作用的研究进展 被引量:5
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作者 尹纪营 刁乃超 +7 位作者 田甜 石金凤 丁媛 陈子杨 王琦 李健明 时坤 杜锐 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1228-1233,共6页
牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)属于黄病毒科、瘟病毒属,同属病毒还有经典猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)以及羊边界病毒(Border disease virus,BDV)^([1])。该病毒为单股正链RNA病毒,基因组12.3 kb~... 牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)属于黄病毒科、瘟病毒属,同属病毒还有经典猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)以及羊边界病毒(Border disease virus,BDV)^([1])。该病毒为单股正链RNA病毒,基因组12.3 kb~12.5 kb,有囊膜,病毒粒子近似圆形,直径40 nm~60 nm,表面有明显的纤突,由一个大约编码4000个氨基酸的开放阅读框(Open reading frame,ORF)以及5’和3’两个非编码区(5’UTR和3’UTR)组成^([2])。BVDV 5’UTR序列高度保守约由380个核苷酸组成,其可通过自身结构的折叠形成特殊的二级结构,与宿主细胞内控制翻译起始和延伸的相关蛋白结合,从而通过与胞内相关因子的作用调控BVDV的转录及翻译;BVDV 3’UTR约由230个核苷酸组成,保守性也较高。有研究表明,BVDV 3’UTR和5’UTR共同控制病毒的翻译与复制^([3])。BVDV可分为BVDVⅠ型和BVDVⅡ型两种基因型,也可分为致细胞病变型(Cytopathic,Cp型)和非致细胞病变型(Non-cytopathic,Ncp型)两种生物型^([4-5])。共编码4个结构蛋白(囊膜蛋白Erns、E1、E2和核衣壳蛋白C)和7~8个非结构蛋白(N^(pro)、P7、NS23或NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B)^([6])。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 黄病毒科 衣壳蛋白 瘟病毒属 非结构蛋白 猪瘟病毒 BVDV
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鸡传染性支气管炎病毒核蛋白的研究进展
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作者 苏磊 蔡家利 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2007年第10期26-28,共3页
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 蛋白 接触性传染病 IBV 产蛋量下降 衣壳蛋白 经济损失 蛋白
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鸡传染性支气管炎S1蛋白的基因工程疫苗研究进展
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作者 陈脊宇 《饲料博览》 2017年第8期58-59,共2页
鸡传染性支气管炎(IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(IBV)引起的鸡的一种急性、高度接触性传染病,给养鸡业带来极大的经济损失。IBV基因编码的主要结构蛋白为核衣壳蛋白(N)、表面纤突蛋白(S)、小膜蛋白(E)和膜蛋白(M),其中S1蛋... 鸡传染性支气管炎(IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(IBV)引起的鸡的一种急性、高度接触性传染病,给养鸡业带来极大的经济损失。IBV基因编码的主要结构蛋白为核衣壳蛋白(N)、表面纤突蛋白(S)、小膜蛋白(E)和膜蛋白(M),其中S1蛋白是主要的保护抗原蛋白,同样是当前疫苗研究的重点。本文就表达S1蛋白的IBV疫苗研究进展作以综述。 展开更多
关键词 S1蛋白 基因工程疫苗 主要结构蛋白 衣壳蛋白 疫苗研究 接触性传染病 活载体疫苗 抗原蛋白 传统疫苗
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鸡新城疫病毒F蛋白的研究进展
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作者 梁华 于立辉 《中国畜牧兽医文摘》 2005年第6期24-24,34,共2页
鸡新城疫病毒为有囊膜的负链 RNA 病毒。NDV 基因组编码6种结构蛋白:L 蛋白为 RNA 依赖聚合酶,与核衣壳相联;HN 蛋白具有血凝素和神经氨酸酶活性,构成副粘病毒二种纤突中的大纤突;F 为融合蛋白,构成小的纤突;NP为核衣壳蛋白;P 为磷酸化... 鸡新城疫病毒为有囊膜的负链 RNA 病毒。NDV 基因组编码6种结构蛋白:L 蛋白为 RNA 依赖聚合酶,与核衣壳相联;HN 蛋白具有血凝素和神经氨酸酶活性,构成副粘病毒二种纤突中的大纤突;F 为融合蛋白,构成小的纤突;NP为核衣壳蛋白;P 为磷酸化的核衣壳相联蛋白;M 为基质蛋白,是构成囊膜的支架。其中的融合蛋白是 NDV 的功能性糖蛋白之一,在致病和免疫应答过程中起重要作用,已成为研究 NDV 致病性的热点。 展开更多
关键词 毒株 遗传学 序列 衣壳 鸡新城疫病毒 蛋白 裂解位点 抗原位点 NDV 信号肚 氨基酸残基 分子流行病学 细胞融合 疏水区 膜粒 蚀斑
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1株鹅星状病毒分子进化分析及纤突蛋白多克隆抗体的制备 被引量:3
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作者 伍辉吉 赵丹 +3 位作者 陈济铛 张溢珊 朱婉君 张济培 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期2333-2339,共7页
以2018年分离鉴定的1株鹅星状病毒为研究对象(LHC株),采用分子克隆方法获得病毒衣壳蛋白基因序列,通过生物信息学方法分析分离株分子进化情况与纤突蛋白变异情况,构建纤突蛋白原核表达质粒对纤突蛋白进行原核表达,免疫新西兰白兔制备兔... 以2018年分离鉴定的1株鹅星状病毒为研究对象(LHC株),采用分子克隆方法获得病毒衣壳蛋白基因序列,通过生物信息学方法分析分离株分子进化情况与纤突蛋白变异情况,构建纤突蛋白原核表达质粒对纤突蛋白进行原核表达,免疫新西兰白兔制备兔抗纤突蛋白多克隆抗体,以原核表达的衣壳蛋白验证其反应活性。结果显示,LHC株为鹅源星状病毒2型毒株,第425~665位氨基酸残基为衣壳蛋白纤突结构,2014—2018年不同地区分离到的鹅星状病毒2型毒株的纤突蛋白享有很高的序列及结构相似性,表明2014—2018年中国不同地区间的鹅星状病毒2型毒株尚未发生明显变异。制备的兔抗纤突蛋白血清可与纤突蛋白及衣壳蛋白特异性结合,表明重组纤突蛋白具有良好的免疫原性,制备的兔抗纤突蛋白多克隆抗体具有良好的反应活性。为鹅星状病毒纤突蛋白功能研究、血清学检测方法的建立以及亚单位疫苗的制备奠定理论基础。 展开更多
关键词 鹅星状病毒 衣壳蛋白 蛋白 多克隆抗体
原文传递
近年鸡传染性支气管炎病毒流行状况 被引量:3
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作者 贾德清 赵东升 +1 位作者 刘有昌 李祥健 《中国家禽》 北大核心 2009年第8期49-50,共2页
1病原 鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)为冠状病毒科(Coronaviridae)冠状病毒属(Coronavirus)第三群成员,为单股正链、不分节段的tLNA病毒,基因组长约2716kb。病毒主要有磷酸化的核衣壳蛋白(N)、糖... 1病原 鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)为冠状病毒科(Coronaviridae)冠状病毒属(Coronavirus)第三群成员,为单股正链、不分节段的tLNA病毒,基因组长约2716kb。病毒主要有磷酸化的核衣壳蛋白(N)、糖基化的膜蛋白(M)、小膜糖蛋白(E)和纤突蛋白(S)4种结构蛋白组成。S蛋白转译后裂解成N端的S1和C端的S2,其中S1为重要的抗原蛋白,能诱导机体产生中和抗体,也是决定IBV血清型特异性的主要蛋白,由于高度易变,其点突变、插入、缺失或重组是新血清型、亚型或变异株产生的主要原因。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 流行状况 衣壳蛋白 virus 冠状病毒属 冠状病毒科 蛋白组成 蛋白
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猪传染性胃肠炎课题组简介 被引量:1
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作者 佟有恩 《畜牧兽医科技信息》 2002年第2X期2-2,共1页
猪传染性胃肠炎与猪流行性腹泻课题组组建于1977年,现已走过近20年的风雨历程,先后完成了4项国家攻关及1项国家自然科学基金课题。研制成功了猪传染性胃肠炎弱毒疫苗、猪流行性腹泻氢氧化铝组织灭活疫苗。
关键词 猪传染性胃肠炎 猪流行性腹泻 灭活疫苗 弱毒疫苗 二联 实验室诊断 衣壳蛋白 序列分析 结构蛋白
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