补体旁路过度激活影响体内凝血功能

目的研究补体旁路的过度激活对体内纤溶、凝血及血小板的影响。方法采用尾静脉注射眼镜蛇毒因子(CVF)造成大鼠体内补体旁路的过度激活。检测大鼠给药前和给药后多个时间点血样的补体活性、t-PA、PAI-1、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)、P-selectin、PF-4、β-TG、血小板数量及聚集活性的变化,并检测小鼠静脉给予CVF后其尾部出血时间的变化。结果大鼠注射CVF后,血清补体活性在1h内基本消失。t-PA和PAI-1含量在1h内有明显增加,在48 h时间点t-PA/PAI-1比值有明显下降(P<0.01);PT、APTT、TT均略有变化,而血浆FIB含量明显下降;补体旁路的过度激活导致血中P-selectin、PF-4、β-TG明显上调,血小板数量明显减少,凝血酶和花生四烯酸诱导的血小板聚集被明显抑制,而ADP诱导的血小板聚集只受到轻微影响。小鼠尾部出血时间在1 h时明显缩短。结论补体旁路的过度激活能明显影响体内凝血功能,导致血液的高凝状态。

肝细胞癌源血液相关外泌体组分通过补体和凝血级联参与肿瘤组织天然免疫

目的:探索肝细胞癌(HCC)来源血液相关外泌体组分参与天然免疫的可能机制。方法:以肝细胞癌模型小鼠的瘤体组织和癌旁肝组织为实验材料,分别提取各组织中的总RNA,通过RNA测序(RNA-seq)和生物信息学手段分析两样本中HCC源血液相关外泌体差异表达基因,并用RT-qPCR验证实验结果。结果:发现在瘤体组织和癌旁肝组织中存在81个HCC源血液相关外泌体差异表达基因。对这些差异表达基因功能富集,共富集到10个生物学过程、4个细胞组分、3个分子功能和2个KEGG通路。进一步分析发现它们主要参与天然免疫反应、血液凝固、炎症反应等生物学过程,以及受体结合、丝氨酸型肽酶活性等分子功能。其中33个HCC源血液相关外泌体差异表达基因参与了补体和凝血级联信号通路。结论:HCC源血液相关外泌体组分可能主要以受体结合、丝氨酸型肽酶催化活性等,通过补体和凝血级联信号途径,参与HCC组织中的天然免疫反应。

凝血级联活化与大气颗粒物引发心血管疾病关联的研究进展

大量流行病学和毒理学研究证明,大气颗粒物(PM)暴露与心血管疾病发病密切相关,但具体的生物学机制尚不清楚.目前推测可能与吸入体内的PM促进血液凝结有关,血液凝结是心血管疾病发展的重要机制,与多种血栓性疾病相关.该文关注凝血级联活化在PM促凝效应中的关键作用,主要综述了目前PM暴露后外源性和内源性凝血级联通路活化的研究进展.结果表明:①PM暴露能促进凝血级联活化,进而诱导纤维蛋白网形成、纤维蛋白溶解抑制和血小板活化等凝血效应.②PM暴露对外源性通路的影响主要表现为组织因子(tissue factor,TF)的表达增加.③PM可通过表面接触激活因子Ⅻ(FⅫ),进而诱导凝血酶的生成,激活内源性凝血级联通路.研究显示,凝血级联活化是大气颗粒物引发心血管疾病的重要机制之一.

急性胰腺炎患者外周血凝血功能及补体的变化

急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)的发生、发展过程中常并发全身性炎症反应综合征,并可能发展成为脓毒血症、多器官功能障碍综合征乃至死亡.重症AP(SAP)导致的组织损伤可刺激炎症细胞释放多种炎症介质,并激发炎症介质"瀑布"样释放,使胰腺微循环障碍,导致全身炎症反应综合征.机体通过内源性抗炎症机制,即代偿性抗炎症反应综合征,对炎症介质产生拮抗作用,与此同时出现凝血功能变化,及一系列补体激活及变化.本文观察30例AP患者外周血凝血功能及补体改变,对其临床意义进行探讨,现报道如下.

补体与凝血级联激活等通路调控麝鼠香腺周期性退化过程

雄性麝鼠(Ondatra zibethica)具有一种特殊的腺体——香腺。香腺在形态和功能上有着明显的周期性变化。在泌香期,香腺逐渐发育膨大并分泌大量麝香。麝鼠麝香在个体间信息交流等方面发挥着重要作用。非泌香期的香腺萎缩退化,不再泌香。目前,对麝鼠香腺周期性变化调控机制的研究还十分稀少。本研究利用转录组技术,对泌香期及非泌香期麝鼠香腺细胞内的调控通路变化规律进行了分析。研究结果表明,补体与凝血级联激活通路、磷脂酰肌醇信号系统、酪氨酸激酶-信号传导和转录激活因子(JAK-STAT)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路被注释。同时,相比于泌香期,上述通路内的基因在非泌香期的组织中表达量显著升高,与香腺周期性退化过程一致。因此,补体与凝血级联激活通路、磷脂酰肌醇信号系统、JAK-STAT信号通路、MAPK信号通路可能在香腺的周期性退化过程中发挥调控作用。本研究对麝鼠香腺周期性变化的通路调控过程进行了初步探索。

丹参减轻新生大鼠低灌注性白质损伤

背景:早产是一个高发病率和高死亡率的重大的全球性健康问题。白质损伤是早产儿最常见的脑损伤。丹参是一种传统的草药,在亚洲国家最常用于治疗心脑血管疾病。目的:探讨丹参在早产儿脑白质损伤方面的治疗作用。方法:选取3 d龄新生雄性SD大鼠18只,随机分为正常组、白质损伤组、白质损伤+丹参组,后两组通过永久性结扎右侧颈总动脉建立早产白质损伤大鼠模型,正常组不造模。白质损伤+丹参组自造模第1天起给予丹参5 mg/(kg•d)腹腔注射,正常组及白质损伤组给予同剂量PBS进行干预,连续给药7 d。造模14 d后处死大鼠,采用苏木精-伊红染色显微镜下观察大鼠脑组织病理情况,免疫荧光法观察髓鞘碱性蛋白和CC1在脑组织中的表达水平,应用液相色谱-质谱联用仪分析丹参发挥作用的可能途径。结果与结论:①白质损伤组大鼠胼胝体结构不规则,细胞肿胀坏死,髓鞘形成显著减少,神经纤维排列不规则且松散,髓鞘显著减少;与白质损伤组相比,白质损伤+丹参组大鼠脑组织细胞肿胀减轻,损伤减轻,髓鞘增多;②髓鞘碱性蛋白与髓鞘的形成密切相关,CC1是髓鞘少突胶质细胞的标志物,白质损伤组大鼠脑组织中髓鞘碱性蛋白及CC1表达显著降低;白质损伤+丹参组大鼠脑组织中髓鞘碱性蛋白及CC1的表达显著增加(P<0.0001),表明丹参减轻了白质损伤;③液相色谱-质谱联用仪分析发现白质损伤+丹参组和白质损伤组之间差异最显著的蛋白与补体和凝血级联反应有关;④研究表明丹参具有治疗早产白质损伤的潜在运用价值。

补体及凝血级联途径影响原因不明复发性自然流产

目的探究补体及凝血级联途径在原因不明复发性自然流产(URSA)发病机制中的作用。方法应用iTRAQ技术对4例URSA患者在淋巴细胞免疫治疗(LIT)前后的血浆蛋白质进行定量分析。显著差异蛋白以变化倍数>1.2和Q值<0.05两个条件进行筛选,然后将显著差异蛋白进行GO富集分析和KEGG富集分析。结果共鉴定出97个差异蛋白分子,其中53个上调蛋白分子、44个下调蛋白分子。GO功能分析显示,显著差异蛋白分子主要参与胞外区、脂质结合和运输的生物学过程;在代谢通路分析中,补体和凝血级联途径是URSA患者在LIT前后受影响最大的分子代谢活动(P=0.0001)。经治疗后,纤维蛋白原(FIB)、凝血因子(F13)、补体C5、肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)、蛋白S(PS)和蛋白C(PC)等显著上调;凝血因子X(F10)和C1抑制剂(C1INH)等水平显著下调。结论补体和凝血级联途径中的显著差异蛋白分子可能与URSA发病有关,有望成为URSA早期诊断和LIT治疗的生物学靶标。

补体系统激活在烧伤后免疫中的作用研究进展

免疫激活是烧伤后继发性损伤的重要因素之一,也是抗感染过程中主要的机体反应。补体系统作为先天性免疫反应中的重要部分,能够在烧伤后诱导免疫细胞激活,促进炎症与介导免疫屏障的破坏,甚至与凝血级联发生复杂交联。该文从先天性免疫、获得性免疫以及补体系统与凝血级联交联的角度,综述补体系统激活在烧伤后免疫中的作用及其在临床中转化的可能性。

滋肾育胎丸防治早发性卵巢功能不全的转录组和生物信息学研究

目的:通过转录组与生物信息学结合解析滋肾育胎丸防治早发性卵巢功能不全的关键机制。方法:滋肾育胎丸对早发性卵巢功能不全小鼠模型行预防给药,采用二代高通量测序技术对模型组和给药组小鼠卵巢组织行转录组测序,应用基因本体(GO)富集分析和京都基因和基因组百科全书(KEGG)行生物功能富集分析,通过蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)分析方法预测靶基因。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术验证转录组预测靶基因结果的一致性。结果:给药组较模型组,雌激素、抗米勒管激素和卵巢系数升高,组织中不同发育阶段卵泡数目增加;转录组学结果显示,2组间差异表达基因共57个。GO富集分析发现,差异表达基因涉及调控补体和凝血级联反应等通路;KEGG富集分析发现,差异表达基因涉及胆固醇代谢和脂肪消化与吸收等信号通路。PPI与KEGG富集通路结果中重合基因有Apob、Fga、Plg、Fgb、Apoh,是潜在的靶基因;qRT-PCR验证发现,滋肾育胎丸明显升高Fga和Fgb mRNA表达,降低Apob、Plg、Apoh mRNA表达。结论:滋肾育胎丸可通过Fga、Plg、Fgb调控补体和凝血级联反应通路,Apob和Apoh调控胆固醇代谢和脂肪消化与吸收,进而发挥防治早发性卵巢功能不全作用。

脓毒症肘抑制补体能降低凝血活性从而保护器官功能

严重脓毒症时补体的级联反应和凝血活性升高会引起多器官功能衰竭（MOF）甚至死亡。最近，美国学者应用狒狒脓毒症模型，通过在早期和晚期分别给予补体抑制剂Cornpstatin，研究了补体及相关物质对凝血系统和脓毒症治疗的影响。结果显示，Compstatin可降低脓毒症血浆和组织中补体活性，减少巨噬细胞和血小板在器官中的积蓄；

多发性硬化症和帕金森病共有差异基因的生物信息学分析

目的 运用生物信息学的方法筛选多发性硬化症和帕金森病的相关基因及其作用的分子机制,为自身免疫性疾病的分子发病机制提供有益的探索和依据。方法 从美国国立生物技术信息中心(NCBI)的共享数据库GEO(Gene Expression Omnibus)下载多发性硬化症(multiple sclerosis,MS)的基因芯片数据GSE83670和帕金森病(Parkinson’ s disease,PD)的基因芯片数据GSE22491,借助R软件和GEO2R筛选差异表达基因,通过DAVID在线分析网站和Cytoscape软件对差异基因进行生物学功能富集分析和信号通路分析,筛选两类疾病中正常人和患者的差异基因,找出共有的关键基因。结果 通过分析,分别从GSE83670和GSE22491中筛选出737个和1 081个差异表达基因,其中共有的差异基因有36个,这些基因主要富集于细胞膜,参与介导免疫应答等生物学过程,并在与免疫调节相关的补体和凝血级联信号通路富集。筛选出 C1QB,PROS1和C1QC 3个与多发性硬化症和帕金森病相关的共有关键基因。结论 多发性硬化症和帕金森病的发病机制可能是通过补体与凝血级联反应信号通路实现的,该信号通路上的差异基因可能有望成为自身免疫性疾病的潜在治疗靶点。

RNA能触发凝血的发现可能创造重大商机

德国Justus-Liebig大学Preissner等发现，受损细胞或微生物释放的RNA能通过激活凝血因子而启动凝血级联反应。此发现能产生新的抗血栓形成药物以及治疗脓毒病、癌症和心血管疾病的新方法。

基于凝血级联途径研究血栓通注射液对博来霉素诱导肺纤维化大鼠的作用机制

基于凝血级联途径探讨血栓通注射液(Xueshuantong Injection,XST)对博来霉素(bleomycin,BLM)所致肺纤维化大鼠的作用机制。将60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、吡非尼酮组(pirfenidone,PFD,50 mg·kg^(-1))组和27、54、81 mg·kg^(-1)XST组,采用气管内注入博来霉素(5 mg·kg^(-1))建立肺纤维化大鼠模型。24 h后,给药组分别给予相应的药物,假手术组、模型组给予等体积的生理盐水。第28天取材,观察大鼠肺部影像学与胶原纤维变化,并采用免疫荧光法检测大鼠肺组织α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原(collagenⅠ,Col-Ⅰ)、波形蛋白(vimentin,Vim)与E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)的表达,Western blot法检测肺组织α-SMA、Col-Ⅰ、Vim和E-cad的蛋白表达水平,采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测大鼠肺组织中凝血酶原片段(prothrombin fragment 1+2,F1+2)、凝血酶-抗凝血酶复合物(thrombin-antithrombin complex,TAT)、可溶性纤维蛋白单体复合物(soluble fibrin monomer complex,SFMC)和大鼠血纤蛋白原降解产物(fibrinogen degradation product,FDP)含量,最后通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、Western blot与免疫荧光法测定肺组织中蛋白酶激活受体-1(protease-activated receptors-1,PAR-1)mRNA水平与蛋白水平。与模型组相比,给予XST后肺部扫描也显示出斑片状、不均匀的阴影,但这些阴影的密度低于模型组;同时大鼠肺部Ⅰ型胶原纤维显著减少;并且XST抑制上皮-间充质转化并下调α-SMA、Col-Ⅰ蛋白表达。在凝血系统方面,给予81 mg·kg^(-1)XST可显著降低SFMC与FDP的含量;同时81 mg·kg^(-1)XST可显著下调PAR-1 mRNA水平与蛋白水平。XST具有抗大鼠肺纤维化的作用,其机制可能与下调PAR-1从而改善凝血途径的异常有关。

羊水栓塞症的发病机制研究进展

羊水栓塞症(AFE)是产科罕见病,病死率高,预后极差。本文简要回顾了近年来其病理生理机制的研究进展,重点探讨了肥大细胞、补体系统和急性子宫肌炎在发病过程中的作用。AFE的发病机制可以分为三大类型,一是机械阻塞型,主要是由于胎儿抗原和羊水成分的机械性阻塞,尤其是肺血管的机械阻塞所致,所占比例较小;其次是过敏样反应型,由于母体对胎儿抗原和羊水成分的过敏样反应所引起,与抗原的剂量无关;三是DIC型,由于肥大细胞兴奋、补体激活等释放激活的活性介质,激活了凝血系统,导致凝血因子大量消耗,引起DIC的出现,此型可能是过敏样反应型的进一步发展。在这些过程中,肥大细胞的活化、补体激活发挥着关键作用。在子宫,由于机械性阻塞、炎性介质的激活所引起的急性子宫肌炎在子宫张力丧失中发挥着重要作用,并进而引起子宫的产后出血和DIC。