应用流式补体依赖淋巴细胞毒技术检测肾移植病人HLA抗体

目的为了更好地识别造成移植肾排斥的特异性抗供者HLA的IgG类型同种抗体,对Flow-CDC方法应用于肾移植及其临床相关性进行研究。方法对96例等候肾移植受者同时进行PRA、NIH-CDC和Flow-CDC实验,并观察其中34例接受NIH-CDC阴性肾移植术的受者近期移植效果。结果Flow-CDC和NIH-CDC两种实验方法的阳性率[27.8%(42/151)和17.3%(26/151)]之间差异有统计学意义(χ2=4.86,P<0.05)。另外,PRA阴性受者其NIH-CDC和Flow-CDC均为阴性,阴性吻合率为100%;在接受同种异体肾移植术的34例受者,其中20例PRA阴性受者接受了NIH-CDC和Flow-CDC均阴性供肾,移植后未发生排斥,移植肾功能迅速恢复;13例PRA阳性的致敏受者接受NIH-CDC和Flow-CDC均阴性供肾的,1例发生急性排斥经治疗后逆转,12例无排斥移植肾功能良好;1例PRA阳性再次移植受者接受了NIH-CDC阴性而Flow-CDC阳性的供肾,移植后第2天出现少尿,10 d切除移植肾。结论Flow-CDC方法是一种能够识别具有补体结合能力的抗供者特异性HLA抗体的交叉配型技术,比经典的NIH-CDC方法具有更敏感、可标准化、快速等优点,对预示肾移植术后的排斥反应方面更具有前瞻性。

抗人胸腺细胞免疫球蛋白与抗人T淋巴细胞免疫球蛋白体外淋巴细胞杀伤效价的比较

目的探讨相同浓度下抗人胸腺细胞免疫球蛋白（ATG）与抗人T淋巴细胞免疫球蛋白（ALG）杀伤淋巴细胞的效价。方法将相同浓度的ATG和ALG倍比稀释,对正常受试者外周血淋巴细胞进行淋巴细胞毒试验（CDC）,用流式细胞仪进行相关检测。结果体外淋巴毒试验中,ATG和ALG对6名健康志愿者外周血淋巴细胞的杀伤作用随着稀释滴度的增加逐渐下降。ATG及ALG滴度为1∶1时对淋巴细胞杀伤比率分别为54.06%～82.49%和38.06%～70.38%;ATG在1∶128时杀伤比率〈10%,ALG在1∶64时杀伤比率〈10%。ATG和ALG对外周血T淋巴细胞杀伤差异无统计学意义（P〉0.05）,对B淋巴细胞杀伤差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 ATG和ALG均可显著清除正常人外周血淋巴细胞。相同浓度下,ATG的效价大约是ALG的2倍。ATG较ALG有更强的清除B细胞的作用。

补体依赖交叉配型相合的血小板输注疗效的临床研究

目的 探讨解决临床上血小板输注无效的途径 ,改善血小板输注效果。方法 选择淋巴细胞毒试验(LCT)阳性及血小板输注无效的患者 2 0名 ,采用补体依赖交叉试验 (CDC)从随意献血者中选出配型相合的血小板输注。结果 所有患者从血小板输注无效转为有效 ,LCT阳性率也逐渐下降至消失。

补体依赖性微量淋巴细胞毒试验方法的探讨

探讨了补体依赖性微量淋巴细胞毒试验的影响因素。结果表明，采用玻璃珠脱纤维抗凝外周静脉血的方法比用肝素抗凝法好，脱纤维抗凝法可提高细胞悬液中淋巴细胞的纯度。适当地延长试验的反应时间和采用高效价的补体能提高试验的敏感性。伊红和甲醛的量分别选用２和３μｌ足以满足细胞染色和固定的要求．

人类白细胞抗原(HLA)与骨髓移植

各种造血干细胞缺损或调控失常的疾病如急、慢性白血病,重症再生障碍性贫血等以及8Gy以上全身照射引起的极重度骨髓型和轻度肠型急性放射病,一般临床治疗效果不佳,特别是后者,常规综合对症治疗结合辐射防治药物的应用难以奏效。自Jacobson (1950)和Lorenz(1951)以致死剂量照射小白鼠后,可因输入骨髓或脾细胞获得保护以来,骨髓移植(BMT)的实验研究十分活跃,日益深入。Thomas于1957年和Mathe最先应用于临床。

CDC法与ELISA法检测RSA患者封闭抗体的实验诊断价值

目的探讨和比较补体依赖的淋巴细胞毒试验(CDC)与酶联免疫吸附试验(ELISA)检测反复自然流产患者(RSA)封闭抗体(BA)的诊断意义。方法运用CDC法和ELISA法对110名行淋巴细胞主动免疫治疗的RSA患者作BA检测,用kappa系数评价2种检测方法的一致性,用McNemar检验比较两者抗体阳性率的差异。结果CDC法检出的补体依赖型BA阳性率为9.09%(10/110);ELISA法检出的IgG型HLA抗体阳性率为41.82%(46/110)(P<0.01),其中Ⅰ类抗体阳性、Ⅱ类抗体阳性、Ⅰ和Ⅱ类抗体均阳性者分别为6人、10人和30人。2种方法符合率为19.6%(9/46),kappa系数为0.202。ELISA法对HLA-Ⅰ和Ⅱ类抗体的检出率为32.7%(36/110)vs36.4%(40/110)(P>0.05)。结论 CDC法和ELISA法检测封闭抗体的结果一致性较弱,ELISA法灵敏度明显高于CDC法。CDC法和ELISA法检测的BA不完全相同,各有其诊断意义。

4817例HLA-B27检测对SpA和非SpA诊断价值的分析

目的:探讨HLA-B27对腰背痛疑诊或待排除SpA患者的鉴别诊断价值。方法:采用补体依赖淋巴细胞毒试验(CDC)检测4 414例以腰背痛就诊的患者及403名健康对照者的HLA-B27,结合患者临床资料分析HLA-B27在不同性别和疾病(SpA和非SpA两组)中的阳性分布情况。结果:4 414例腰背痛疑诊或待排除SpA人群HLA-B27的阳性率为49.81%,男女HLA-B27阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05);在SpA组AS、未分化型SpA(USpA)、幼年SpA(JSpA)、反应性关节炎(ReA)和银屑病关节炎(PsA)HLA-B27阳性率分别为90.07%、28.85%、68.81%、52.94%和67.74%。非SpA组HLA-B27阳性率为19.33%,与健康对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:非SpA患者HLA-B27也可能阳性,HLA-B27检测阳性不能单纯考虑SpA。

强直性脊柱炎患者HLA-B27的检测

目的 探讨强直性脊柱炎 (AS)患者HLA B2 7检测方法的特点。方法 采用补体依赖性微量淋巴细胞毒法、聚合酶链反应 -序列特异性引物法、流式细胞仪法 ,对 4 3例AS患者与 4 5例健康体检者的HLA B2 7抗原进行检测。结果 三种方法AS组的HLA B2 7阳性率均高 ,且均极显著高于对照组 (P <0 .0 1) ,三种方法之间的阳性率无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 AS与HLA B2 7存在相关性 ;三种方法均可用于检测HLA B 2 7,但各有其特点。

血液肿瘤病患者CDC交叉配型相合的血小板输注疗效

【目的】解决临床上血小板输注无效的途径 ,改善血小板输注效果。【方法】选择淋巴细胞毒试验 (LCT)阳性 ,血小板输注无效的患者 2 0例 ,给予作补体依赖交叉试验 (CDC) ,从随意献血者中选出配型相合的血小板输注。【结果】所有患者从血小板输注无效转为有效 ,LCT阳性率也逐渐下降至消失 ,使血小板输注获得良好的效果。【结论】CDC交叉配型相合的血小板输注逆转了血小板输注无效的状况。

Flow-CDC技术在肾移植中的应用研究

目的为了更好地识别造成移植肾排斥的特异性抗供者HLA的IgG类型同种抗体,将Flow-CDC方法应用于肾移植及其临床相关性研究。方法对96例等候肾移植受者同时进行PRA、NIH-CDC和Flow-CDC实验,并观察了其中34例接受NIH-CDC阴性肾移植术的受者近期移植效果。结果Flow-CDC和NIH-CDC两种实验方法的阳性率[27·8%(42/151)和17·2%(26/151)]之间呈显著性差异(2=14·06,p<0·001)。另外,PRA阴性受者其NIH-CDC和Flow-CDC均为阴性,阴性吻合率100%;在接受同种异体肾移植术的34例受者,其中20例PRA阴性受者接受了NIH-CDC和Flow-CDC均阴性供肾,移植后未发生排斥,移植肾功能迅速恢复;13例接受NIH-CDC和Flow-CDC均阴性供肾的致敏受者中,1例发生急性排斥经治疗后逆转,12例无排斥移植肾功能良好;1例PRA阳性再次移植受者接受了NIH-CDC阴性而Flow-CDC阳性的供肾,移植后第2d出现少尿,第10d切除移植肾。结论Flow-CDC方法是一种能够识别具有补体结合能力的抗供者特异性HLA抗体的交叉配型技术,比经典的NIH-CDC方法具有更敏感,可标准化,快速等优点,对预示肾移植术后的排斥反应方面更具有前瞻性。

人血痕的HLA-A,-B抗原的测定

前言HLA(人类白细胞抗原)是迄今所知最复杂的一种人类遗传标记系统,至1980年确定的抗原已达92种,在法医学亲权鉴定中已广泛应用HLA分型,并成为最有效的工具之一。但在血痕检验方面,尚处于探索阶段。C·H·Rittner等(1974)首先采用淋巴细胞毒抑制试验测定血痕的HLA抗原。

肾移植组织配型及免疫监测技术操作规范(2019版)

为了进一步规范肾移植组织配型及免疫监测技术操作,中华医学会器官移植学分会组织器官移植学专家从组织配型基本技术、配型方法、群体反应性抗体、供体特异性抗体、受者免疫监测等方面,制订本规范。

CDMA和PCR-SSP方法对HLA-B_(27)分型的探讨

目的了解补体依赖性微量淋巴细胞毒实验(CDMA)对人类白细胞抗原B27(HLA-B27)检测结果情况。方法采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)实验作为参考实验,对用CDMA方法检测过的标本用PCR-SSP方法进行复检,比较2种检测结果。结果用2种方法对216例标本进行检测,其中212例标本结果一致,4例标本CDMA为阴性而PCR-SSP为阳性,经统计学分析,差异无统计学意义(χ2=2.25,0.1<P<0.25)。结论CDMA方法能够为临床提供可靠的结果。