补体成分C3的系统发生

补体系统是先天免疫系统的重要组成部分,在宿主抗感染防御过程中起着关键作用.补体成分C3(complement component 3)是补体激活途径的中心成分,其通过3条补体激活途径参与免疫监督和免疫应答过程.虽然补体成分C3的基因和蛋白已在许多不同物种中被克隆和鉴定,对其基因的结构、功能和表达也进行了很多研究,但对C3分子的演化进程目前还不清楚.本文对近年来补体成分C3系统发生进行了分析,同时对C3的结构、作用机制和功能进行了综述.

载脂蛋白J及补体C3在大鼠脑出血模型中表达的实验研究

目的探索载脂蛋白J(ApoJ)及补体C3在实验性大鼠脑出血(ICH)损伤中的作用机制。方法将雌雄各半Sprauge-Dawley(SD)大鼠150只随机分为正常对照组、假手术组及ICH组。通过脑立体定向仪建立大鼠ICH模型,于建模后3、61、2 h以及1、3、5、7 d 7个时间点处死大鼠。用干湿质量法测量脑组织含水量;RT-PCR检测ApoJmRNA及补体C3 mRNA的表达水平。结果 ICH组ApoJ、补体C3 mRNA的表达水高于假手术组和正常对照组(P<0.05),补体C3、ApoJmRNA的表达分别于ICH后36、h开始增强;ICH组ApoJ、补体C3 mRNA表达水平、脑组织含水量呈正相关(R=0.758,P<0.05;R=0.702,P<0.05),ApoJmRNA与补体C3 mRNA表达水平呈正相关(R=0.908,P<0.05)。结论补体系统参与了大鼠ICH后脑水肿的形成及神经元的损伤;ApoJ可能通过抑制补体激活而发挥ICH后机体内源性应激保护作用。

泽泻醇B抑制C3a介导的人肾小管上皮细胞间充质转分化的实验研究

目的探讨泽泻醇B能否抑制C3a介导的肾小管上皮细胞间充质转分化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)。方法将体外培养的人肾小管上皮细胞(HK-2)分别用5ng/mL转化生长因子β(transfor-ming growth factor-β,TGF-β)、0.1μmolC3a和0.1μmolC3a加10μmol泽泻醇B进行干预。分别采用RT-PCR、Western blot和细胞免疫荧光法检测HK-2细胞C3、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和上皮钙黏蛋白(E-cadherin)mRNA及蛋白表达。结果经C3a刺激后,HK-2细胞C3mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.01),α-SMA mRNA及蛋白表达明显增加(P<0.01),E-cadherin mRNA及蛋白表达明显减少(P<0.01)。与经外源性C3a干预组比较,经泽泻醇B干预后,HK-2细胞α-SMA mRNA及蛋白表达明显减少(P<0.01),E-cad-herin mRNA及蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论外源性C3a能诱导肾小管上皮细胞发生EMT,泽泻醇B可抑制C3a诱导的EMT。

阻断脉络丛中C3a受体活性对小鼠肺癌脑转移的影响

目的:研究脉络丛中补体成分C3a对小鼠肺癌脑转移的促进作用及分子机制。方法:60只雄性BALB/c-nu/nu小鼠随机分为对照组、PC-14细胞注射组以及PC-14细胞联合SB290157处理组。利用尾静脉注射PC-14细胞方法制备BALB/c-nu/nu小鼠荷瘤模型,给予小鼠SB290157,通过商品化的试剂盒检测脑脊液中肿瘤细胞数量,ELISA检测脑脊液中C3a的水平,Western Blot方法检测脉络丛中C3a受体(C3aR)、紧密连接蛋白ZO-1和Claudin的表达。结果:通过尾静脉注射PC-14细胞方法制备成功制备脑转移瘤小鼠模型,SB290157处理显著降低小鼠脑转移灶的数量,荷瘤小鼠脉络丛中C3aR表达增加,ZO-1和Claudin的表达降低,脑脊液中C3a水平增加,SB290157处理后,ZO-1和Claudin的表达增加。结论:脉络丛中C3a及受体相互作用参与肺癌小鼠模型发生脑转移,其机制可能与破坏血脑屏障有关。

羊瘙痒因子139A感染引起小鼠脑组织中的α1-ACT表达增加

目的探究α1-ACT在羊瘙痒因子139A感染小鼠脑组织中的变化情况。方法利用蛋白免疫印迹、免疫组织化学、间接免疫荧光及荧光共聚焦方法分析羊瘙痒因子139A感染小鼠脑组织中α1-ACT表达的变化和分布特点。结果蛋白免疫印迹方法显示在羊瘙痒因子139A感染小鼠终末期脑组织中α1-ACT的含量较正常对照小鼠明显上调且随着潜伏期的延长而逐渐增加;免疫组织化学方法发现α1-ACT主要分布于羊瘙痒因子139A感染小鼠的皮层、丘脑和小脑区域;间接免疫荧光实验显示羊瘙痒因子139A感染终末期小鼠脑组织中补体成分C3含量明显增加,同时荧光共聚焦实验表明α1-ACT与补体成分C3存在明显的共定位现象。结论羊瘙痒因子139A感染终末期小鼠脑组织中α1-ACT含量明显增加。