蛹虫草多糖脱色工艺优化及其抗补体活性研究

目的优化蛹虫草多糖脱色工艺,并评价其抗补体活性。方法在单因素试验基础上,以多糖质量浓度、脱色温度、脱色时间、液料比为影响因素,脱色率、多糖回收率、选择性系数的综合评分为评价指标,响应面法优化脱色工艺。采用免疫溶血反应测定多糖抗补体活性。结果最佳条件为AB-8大孔吸附树脂,多糖质量浓度28 mg/mL,脱色温度48℃,脱色时间97 min,液料比5∶1,综合评分为6.42±0.54。多糖通过经典、旁路途径抑制补体活化,CH 50、AP 50值分别为(0.63±0.08)、(0.47±0.13)mg/mL。结论该方法稳定可靠,可用于脱色抗补体活性良好的蛹虫草多糖。

青蒿化学成分及其抗补体活性

目的研究青蒿Artemisia annua L.化学成分及其抗补体活性。方法青蒿75%乙醇提取物采用硅胶、Sephadex LH-20、TLC、半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用溶血试验法评价其抗补体活性。结果从中分离得到11个化合物,分别鉴定为chrysosplenetin(1)、artemetin(2)、东莨菪内酯(3)、山柰酚(4)、casticin(5)、芹菜素(6)、木犀草素(7)、青蒿素(8)、loliolide(9)、圣草酚(10)、3,7-dimethylquercetin(11)。化合物4、6~8、10~11对补体的经典和旁路途径均有抑制作用,活性最强的化合物8作用于补体C1q、C3~C5、C9靶点。结论化合物9、11为首次从该植物中分离得到。从青蒿中分离得到的青蒿素抗补体活性最强,可以作为补体抑制剂的候选化合物。

5种马鞭草科药用植物的抗补体活性

采用细胞溶血法考察了千解草(Pygmaeopremna herbacea)、白花灯笼(Clerodendrum fortunatum L.)、尖尾枫[Callicarpa longissima(Hemsl.)Merr.]、赪桐[Clerodendrum japonicum(Thunb.)Sweet]及臭茉莉(Clerodendrum philippinum Schauer var.simplex Moldenke)等5种马鞭草科药用植物提取物经典途径和旁路途径的抗补体活性。结果表明:千解草水提取物、白花灯笼水提取物和醇提取物、尖尾枫水提取物和醇提取物、赪桐醇提取物及臭茉莉醇提取物有较强的经典途径抗补体活性,对经典途径的抗补体活性(CH50)分别为0.092±0.008,0.074±0.008,0.088±0.006,0.134±0.017,0.123±0.010,0.380±0.080及0.200±0.015 g/L;仅千解草和尖尾枫水提取物及白花灯笼醇提取物具有旁路途径抗补体活性,对旁路途径的抗补体活性(AP50)分别为0.533±0.033,0.758±0.031和0.362±0.029 g/L。因此,5种植物均具有不同程度的抗补体活性,其中白花灯笼醇提取物抗补体活性最强。

野木瓜水溶性多糖的分离纯化及抗补体活性研究

采用水提醇沉工艺获得了水溶性野木瓜粗多糖(CCP),经过Sevag法脱蛋白,大孔树脂脱色及透析,得到野木瓜精多糖,再经DEAE-纤维素和Sepharose Cl-6B柱层析,从野木瓜中分离得到多糖组分CCP1,经过高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)鉴定为均一组分,测定其相对分子量(MW)为2.879×106D。高效液相法测定CCP1的单糖组成为:鼠李糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖、葡萄糖,其摩尔比为0.034:0.228:0.045:0.055:0.638。补体结合实验表明,多糖CCP1在体外具有一定抗补体活性,并呈一定的剂量效应关系。

健美操对机体补体活性的影响

研究目标:研究有氧健美操对女大学生机体免疫分子补体活性的影响,为进一步开展健美操运动提供医学免疫学实验依据。研究对象:南华大学护理学院2003级30名女生。研究内容:分别利用单向免疫扩散试验与50%溶血法(CH50)测定系统锻炼前后血清中C3、C4含量与补体活性。研究结果:每周参加3次锻炼者,从第8周起可提高机体总补体活性,并维持较高水平。研究结论:坚持运动量适中的有氧运动,能提高机体合成补体的能力,并增强补体的活性。

杜仲叶多糖的提取分离、抗补体活性及结构研究

经石油醚脱脂、除胶后,采用热水提取、分步醇沉工艺获得杜仲叶水溶性多糖PsEUL1、PsEUL2、PsEUL3,分别经S-8大孔树脂脱色,Sevag法脱蛋白及透析,其中PsEUL1经DEAE-52纤维素柱层析分离得多糖组分PsEUL11、PsEUL12、PsEUL13,抗补体活性实验表明,其中有多个组分有不同程度的抗补体活性,并呈一定的剂量效应关系。活性多糖PsEUL13经硫酸-咔唑反应及气相色谱法测定,单糖组成为:L-鼠李糖、D-岩藻糖、D-阿拉伯糖、D-木糖、D-葡糖糖、D-半乳糖、糖醛酸,含量比为11.8∶1.6∶37.7∶4.2∶10.7∶12.8∶21.2。

白茅根的化学成分及其抗补体活性

目的:研究白茅根的化学成分及其抗补体活性。方法:通过溶血试验,以抗补体活性作为导向分离手段对白茅根各提取部位进行抗补体活性测试,采用各种色谱法分离,运用多种现代波谱技术进行结构鉴定,确定抗补体活性成分。结果:白茅根石油醚部位、乙酸乙酯部位、水提部位有抗补体活性,其中石油醚部位、乙酸乙酯部位活性较强,从白茅根的石油醚和乙酸乙酯部位分离鉴定了10个化合物,分别为:白茅素(1)、芦竹素(2)、木栓酮(3)、β-谷甾醇(4)、4,7-二甲氧基-5-甲基香豆素(5)、对羟基苯甲酸乙酯(6)、5-甲氧基黄酮(7)、香草酸(8)、反式对羟基桂皮酸(9)、5-羟甲基糠醛(10)。结论:化合物6、7、8、10为首次从该属植物中分离得到,化合物3、8、9对经典途径的补体激活具有抑制作用。

太极拳对增强女大学生血清总补体活性的影响

研究太极拳运动对四年级女大学生血清补体3(C3)与补体4(C4)及总补体活性的影响,为在高年级大学生中开展太极拳有氧运动提供免疫学实验依据。从南华大学护理学院2001级随机抽取40名女生,分成4组,分别设为对照组、实验1、23、组。实验组分别每周进行1、2、3次太极拳训练。于0、2、4、6、8、10、12周后抽血分离血清,分别利用免疫球透射比浊法与50%溶血法(CH50)测定训练前后血清中补体C3、C4质量浓度与总补体活性。结果显示每周参加3次太极拳训练者,血清补体C3、C4质量浓度与总补体活性比对照组及每周锻炼1或2次者高,且在第10周与第12周与对照组及每周锻炼1次者差异有显著性(P<0.05)。说明坚持运动量适中的太极拳有氧运动,能提高高年级女大学生机体合成C3与C4的能力,增强总补体活性。从而增强非特异性抗感染免疫,提高免疫应答水平。

白骨壤酸性多糖的分离纯化及抗补体活性研究

采用热水浸提,乙醇沉淀,超滤,三氯乙酸脱蛋白,DEAE-纤维素柱层析脱色,再经DE-AE-Sepharosefastflow和SephacrylS-400层析,从白骨壤树枝分离纯化得到多糖化合物HAM-3-Ⅱb-Ⅱ,经高效凝胶过滤色谱法和比旋光度测定法鉴定为均一性组分,其重均相对分子质量(Mw)为105200,比旋光度为+27.54°。糖组成分析表明它为酸性杂多糖,主要由半乳糖醛酸、阿拉伯糖、半乳糖和鼠李糖组成。紫外光谱表明其不含核酸和蛋白质等杂质成分;红外光谱证实它是一种酸性果胶类多糖,以α型差向异构为主;补体结合实验表明,该多糖通过经典途径和替代途径共同作用产生显著的抗补体活性,并呈一定的剂量效应关系。

4种动物血清总的补体活性比较

方法：豚鼠、人、鸡、小鼠4种动物的新鲜血清分别以全溶血,CH50为标准,在1,3,5,7,9,11,13,15 d测其总的补体活性.结果：总的补体的活性大小为,豚鼠〉人〉鸡〉小鼠.总的补体活性随着时间的延长呈现下降趋势.豚鼠和人的血清在不稀释条件下,7 d内均能全溶血.人与豚鼠的CH50均在5-9 d出现1个下降的对数期.结论：在短时间内,人血清可以代替豚鼠血清.

天然抗补体活性物质研究进展

补体系统的非正常激活可引起人体的多种疾病,包括类风湿性关节炎和老年性痴呆等,但目前还没有较好的抗补体制剂。化学合成的抗补体制剂成本高、选择性差、并能产生多种副作用,天然产物来源的抗补体活性成分引起了国内外学者的普遍关注。迄今为止,已经从动植物及微生物中分离出多种具有抗补体活性的物质,包括多糖、黄酮、甾体、皂苷、萜类、生物碱等。本文对近年来天然产物中具有抗补体活性的成分进行了综述,由于微生物易于培养及基因工程改良,而且产品质量容易控制,来自微生物的抗补体活性物质值得关注。

玫瑰花中抗补体活性成分研究

[目的]分离鉴定玫瑰(Rosa rugosa)花中的抗补体活性成分。[方法]在活性筛选指导下,并用多种色谱方法进行分离纯化,并用核磁共振、质谱数据与文献数据对比鉴定化合物结构。[结果]从活性部位中分离出3个黄酮类化合物,分别为木犀草素(1)、槲皮素(2)和山柰酚(3)。[结论]玫瑰花提取物有体外抗补体作用,其中黄酮类化合物是其活性成分。

牡蛎糖原的提取、纯化及补体活性研究

采用酶解结合醇沉法从新鲜牡蛎中提取制备牡蛎糖原(oyster glycogen,OG),经阴离子交换柱DEAE-52、葡聚糖凝胶柱Sephadex G-100分离纯化,得到纯度较高的牡蛎糖原组分OG11。其蛋白质量分数为0.33%,糖质量分数为97.77%。用气相色谱法对OG11进行单糖组成鉴定,结果表明其中只含有葡萄糖。补体实验表明,OG11对补体具有较强的抑制活性,在5.0mg/mL时补体抑制率可达到77.38%。

FMMU白化豚鼠与花色豚鼠血清Ig和补体含量及总补体活性比较

测定比较了 2月龄的封闭群 FMMU白化豚鼠与花色豚鼠的血清免疫球蛋白含量、补体含量及活性。结果表明 :白化豚鼠血清 Ig G含量极显著低于花色豚鼠 ,而 Ig A、Ig M含量显著低于花色豚鼠。白化豚鼠 C3含量极显著低于花色豚鼠 ,C4含量显著低于花色豚鼠。血清总补体活性 ( CH50 )显著低于花色豚鼠。

静脉注射用免疫球蛋白的抗补体活性及部分免疫学特性测定

本文采用100CH_(50)法测定静脉注射用免疫球蛋白(IVIG)的抗补体活性(ACA)。对IVIG的pH,Na^+含量及不同成分的缓冲液进行了试验比较;ACA重复测定结果的变异系数在15％以内;MG在含微量IgG多聚体情况下,多聚体与ACA的关系不明显;17批MG都含有麻疹抗体和白喉抗体,IgA含量不等,不含IgM。

云木香多糖的抗补体活性研究

目的从云木香中分离纯化出均一多糖,并研究其抗补体活性。方法采用水提醇沉方法得到了云木香的粗糖(APS),用DEAE-52色谱柱对云木香粗糖进一步纯化并得到了两种均一多糖,并测定了其理化性质和单糖组成。测定了这两种云木香多糖经典途径抗补体活性,旁路途径抗补体活性,并对其抗补体靶点进行了确定。结果从云木香中分离得到了两种均一多糖,其中一种为葡聚糖APS-1,另一种为葡甘聚糖APS-2。抗补体活性研究表明,APS-2表现出很好的抗补体活性,而APS-1没有明显的活性。结论云木香多糖APS-2具有很好的抗补体活性,有望成为免疫疾病治疗的药物。

极谱免疫法测定人血清补体活性的研究

提出一种极谱免疫法测定人血清补体活性的新方法，利用补体作用下的免疫溶血反应释放出的具有拟过氧化物酶活性的血红蛋白，催化邻苯二胺和Ｈ_２Ｏ_２的反应，通过酶促产物２，２′－二氨基偶氮苯的极谱检测来确定补体的活性。测定范围为０．１０～１．００ＣＨ_（５０）ｕｎｉｔ／ｍＬ，检出限为０．０８ＣＨ_（５０）ｕｎｉｔ／ｍＬ，灵敏度比分光光度法高１０倍，一次可分析２５份血样，已用于正常人和病人血清中补体活性的测定。

不同产地意大利牛舌草中芦丁和山奈酚的含量测定及其抗补体活性研究

目的:测定不同产地意大利牛舌草中芦丁和山奈酚的含量和其抗补体活性研究。方法:采用UPLC法,色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相为甲醇(A)-0.4%甲酸(B);洗脱程序(0~3 min,5%~31%A;3~10 min,31%~37%A;10~12 min,37%~40%A;12~30 min,40%~40%A),柱温30℃;检测波长366 nm。通过溶血试验评价芦丁和山奈酚的抗补体活性。结果:意大利牛舌草中芦丁和山奈酚的含量分别在1.25-3.34 mg/g和2.86-6.05 mg/g范围内,且芦丁和山奈酚均具有较好的抗补体活性。结论:意大利牛舌草中2种主要活性成分的含量同地区之间差异较小,不同地区之间存在差异,且这两种成分均具有较好的抗补体活性。

苍术、葶苈子不同溶剂萃取多糖的抗补体活性研究

目的研究苍术、葶苈子不同溶剂萃取多糖的抗补体活性。方法采用细胞溶血法。结果苍术、葶苈子粗多糖药物浓度在接近0.08mg/mL时,其最大溶血抑制率超过相应浓度肝素的最大溶血抑制率。结论苍术正丁醇萃取物、葶苈子乙醇及正丁醇萃取物活性较好。

人参红景天合剂对机体补体活性的影响

目的 :探讨人参红景天合剂对小鼠机体补体活性的影响。方法 :采用琼脂糖平板溶血法。将 60只小鼠分成六组 ,每组 1 0只 ,进行血清总补体活性测定。结果 :游泳组、高运组和高游组与对照组比较总补体活性明显降低 (P<0 .0 1 ) ,而药运组和药游组总补体活性已接近正常 ,与对照组比较无显著性差异 (P>0 .0 5)。结论