变应性鼻炎大鼠鼻黏膜中补体调节蛋白C_1-INH和CD46的表达

目的:检测补体调节蛋白C1-INH和CD46在变应性鼻炎大鼠鼻黏膜中的表达水平,探讨其参与变应性鼻炎病理过程的可能机制。方法:9只SD大鼠以0.1%卵清蛋白辅以氢氧化铝佐剂进行基础致敏,继之鼻部激发建立大鼠变应性鼻炎模型(AR组),另9只以生理盐水代替0.1%卵清蛋白作为对照组(N组)。取大鼠呼吸区鼻黏膜,采用Western印迹法检测组织中补体调节蛋白C1-INH和CD46的表达含量,进行对比。结果:Western印迹结果显示两组大鼠C1-INH和CD46均阳性表达,而AR组大鼠鼻黏膜中C1-INH表达低于N组(P<0.05),CD46表达则高于N组,差异显著(P<0.01)。结论:补体调节蛋白CD46和C1-INH可能参与了变应性鼻炎的病理过程,其调控作用可能与补体激活的经典途径有关。

虹鳟补体活化调节因子CD46的分子特征及功能

为进一步研究硬骨鱼类中补体活化调节因子的分子特征和功能,研究克隆了虹鳟(Oncorhynchus mykiss)的CD46基因,对其分子特征进行了系统分析,结果显示:虹鳟CD46基因由10个外显子和9个内含子组成,cDNA序列全长2812 bp,编码317个氨基酸,蛋白序列由1个信号肽、4个SCR结构域、1个跨膜区和1个胞内区组成,预测分子量为33.9 kD。基因组共线性分析显示,虹鳟CD46基因位于16号染色体,其基因座在脊椎动物中具有保守的共线性。组织和白细胞亚群表达分析显示,虹鳟CD46基因在各种组织和白细胞亚群中均有表达。为了进一步阐明虹鳟CD46的免疫功能,研究原核表达纯化了标签蛋白GST和融合蛋白GST-CD46。溶血活性实验表明,与GST相比,GST-CD46能够显著抑制虹鳟血清对兔红细胞的溶血活性,且呈现剂量依赖效应,表明虹鳟CD46是补体活化的调节因子。此外,研究用HEK293T细胞过表达了GFP和GFP-CD46。细胞损伤实验显示,与GFP相比,GFP-CD46能够显著抑制虹鳟血清对HEK293T细胞的损伤,进一步表明虹鳟CD46是补体活化的调节因子,能够保护细胞免受补体系统的损伤。总之,研究不仅增加了对虹鳟CD46的分子特征和功能的认知,还为深入研究此分子的免疫功能及其在抗病免疫中的应用提供了理论基础。

补体调节蛋白CD 46、CD 55和CD 59在胃肠肿瘤中的研究进展

胃肠肿瘤细胞的细胞膜高表达补体调节蛋白(complement regulatory proteins,CRPs)中的一种或几种分子。这些高表达分子可抑制机体的体液免疫和细胞免疫,可能是导致肿瘤细胞逃避机体免疫监视的机制之一。近年来许多学者在研究CRPs在胃肠肿瘤中的表达及其作用机制,以及将CRPs相关的单克隆抗体(monoclonal antibodies,McAbs)应用于肿瘤免疫治疗,取得了一定疗效。本文将CRPs在胃肠肿瘤研究中所取得的进展作一综述。

补体调节蛋白CD46与肾脏疾病

补体调节蛋白是参与调节补体系统活化和影响其效应的一类蛋白质，包括CD59、CD55、CR1、CD46等，它们在补体活化链的关键步骤中起着类似抑制的作用，从而保护组织细胞免遭补体破坏。CD46是补体调节蛋白中的一员，最初发现其可辅助I因子抑制C3转化酶的形成，

新风胶囊对类风湿性关节炎补体调节蛋白红细胞CR1及CD59的影响

目的:探讨新风胶囊对类风湿性关节炎(RA)补体调节蛋白的影响及其作用机制。方法:将40例RA患者按随机数字表分为新风胶囊实验组(20例)和正清风痛宁对照组(20例),并设10名健康者为健康对照组,观察两组RA患者治疗前后补体调节蛋白红细胞CR 1、CD 59以及临床症状、体征关节疼痛度、关节肿胀度、关节压痛度、晨僵时间、握力、步行15 m时间和实验室指标〔血沉(ESR),类风湿因子滴度(RF),C反应蛋白(CRP),补体C 3、C 4,免疫球蛋白IgG、IgM、IgA,α1糖酸蛋白(1αAGP),红细胞计数(RBC)〕的改善情况。结果:RA患者治疗前红细胞CR 1与CD 59表达水平均显著低于健康对照组(P均<0.05);治疗后两组RA患者临床症状、体征及实验室指标均较治疗前有明显改善(P均<0.05),其中实验组关节疼痛度、晨僵时间、双手平均握力、15 m步行时间及ESR、补体C 3、RBC改善程度均较对照组显著(P<0.05或P<0.01)。两组治疗后红细胞CR 1、CD 59均比治疗前显著升高(P均<0.05),治疗后实验组的红细胞CR 1、CD 59均值均显著高于对照组(P均<0.01)。结论:新风胶囊能有效提高体内过低的补体调节蛋白红细胞CR 1、CD 59含量,进而抑制过亢的体液免疫反应,使补体有效清除体内循环免疫复合物,并减少补体对自身细胞的攻击损伤,从而控制病情活动,这也是其治疗RA的机制之一。

补体调节蛋白CD55、CD59调控T淋巴细胞免疫研究进展

补体系统在多种可溶性和膜结合调节因子作用下,参与机体抗感染防御、获得性免疫应答的启动及维持等生物学效应。其中补体调节蛋白以特定方式与不同补体成分相互作用,使补体激活与抑制维持精细的平衡状态,从而既防止对自身组织造成损害,又能有效杀灭外来微生物,目前对膜结合调节蛋白CD55（decay-accelerating factor,DAF）、

补体调节因子与视神经脊髓炎谱系疾病的研究进展

视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)是一种获得性、异质性神经眼科交叉性罕见免疫性疾病,特异性高发于视神经和脊髓等中枢神经系统部位,有严重的致残致盲性。虽然补体在NMOSD发病中的重要性已被证实,但膜补体调节因子在NMOSD发病机制中的关键调控作用尚不完全清楚,论述其在NMOSD发病中的生理和病理作用,可能成为解释NMOSD中枢发病的重要原因之一。本文重点回顾近些年来与NMOSD发病相关的补体调节因子CD46、CD55和CD59的研究进展,试图分析、综述补体调节因子在NMOSD发病机制中的作用现状及未来发展前景。

血液透析对转化生长因子β1及补体调节蛋白CD59基因表达的影响

目的 研究不同透析膜对维持性血液透析 (MHD)患者外周血转化生长因子 β1及补体调节蛋白CD5 9活性表达的影响。方法 通过流式细胞术和酶联免疫吸附法测定长期采用铜仿膜 (CU)与聚砜膜 (PSU)透析患者外周血TGF β1水平及CD5 9活性表达。结果 MHD患者血浆TGF β1水平明显增加 (P <0 .0 5 ) ,其中CU组为 (81.7± 8.7)ng mL ;PSU组为 (6 4 .3±8.3)ng mL ,与正常对照组 (49.3± 6 .1)ng mL相比均有显著差异 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ;而PSU组与CU组相比 ,外周血TGF β1水平明显下降 (P <0 .0 5 )。CD5 9在正常人外周血单个核细胞中无表达 ,而在尿毒症未透析组及血透组均有表达 ,其中未透析组表达较低 ,而血透组表达较高 ,CU膜血透组较PSU血透组表达要高 (P <0 .0 5 )。经相关分析结果显示 :CU组与PSU组内TGF β1水平与CD5 9表达均呈现良好的相关性 (r=0 .6 4 0 9与 0 .5 83,P <0 .0 5 )。 结论 血液透析通过血液 透析膜间相互反应可活化补体 ,诱导外周血单个核细胞 (PBMC)合成TGF β1增多 ,而增高的TGF β1水平可上调CD5 9基因表达 ,抑制补体异常活化造成的细胞破坏 ,对机体具有代偿性保护意义。然而不同透析膜如CU和PSU对MHD患者TGF β1与CD5 9的影响有所不同 。

血脂平冲剂对HLP大鼠补体调节蛋白CD55、CD59表达的影响

目的:揭示血脂平冲剂对实验性高脂血症大鼠CD55、CD59表达的影响。方法:将60只昆明种雄性SD大鼠随机分为六组:空白对照组、病理模型组、西药组、血脂平冲剂大剂量组、血脂平冲剂中剂量组、血脂平冲剂小剂量组。测定各组大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的水平,流式细胞仪测定各组大鼠白细胞CD55、CD59表达的变化。结果:血脂平冲剂组大鼠TC、TG、LDL-C水平明显低于模型组(P<0.05),白细胞CD55、CD59的表达明显上调,且具有明显的量效关系。结论:血脂平冲剂具有明显的降脂作用,其机制可能与其促进CD55、CD59的表达上调有关。

高脂血症患者血清抵抗素水平及与补体调节蛋白CD55、CD59表达的关系

目的观察高脂血症患者血清抵抗素与补体调节蛋白的表达的关系。方法高脂血症患者50例,年龄、性别、体重与其匹配的健康对照21例,使用酶联免疫法测定空腹血清抵抗素浓度,使用流式细胞仪测定外周血白细胞CD55、CD59的表达。结果高脂血症患者空腹血清抵抗素浓度较正常对照增高(P<0.05),女性血清抵抗素浓度高于男性(P<0.05),抵抗素与血清总胆固醇明显正相关(r=0.297,P<0.05),与体重指数、腰臀比、血糖均无相关性,与补体调节蛋白CD55、CD59阳性细胞平均荧光强度及百分率亦无相关性。多元回归分析腰臀比是CD55阳性淋巴细胞平均荧光强度的独立预测因子,腰围是CD55阳性单核细胞百分率的独立预测因子。结论高脂血症患者空腹血清抵抗素浓度增高,有性别差异,且与血清总胆固醇明显正相关,提示抵抗素可能参与脂代谢紊乱。高脂血症者补体调节蛋白表达下调,且与腰臀比、腰围密切负相关,提示肥胖,特别是中心型肥胖可影响补体调节蛋白的表达。空腹血清抵抗素与补体调节蛋白CD55、CD59表达无相关性,是否有其他脂肪细胞因子参与影响补体调节蛋白的表达有待进一步研究。

肾炎患者尿中sC5b-9水平及CD16^+单核巨噬细胞膜补体调节蛋白的表达

目的 :探讨肾炎患者补体激活时尿中活化单核巨噬细胞 (CD16 + Mo MΦ)膜辅因子蛋白 (MCP)、促衰变因子 (DAF)及同种限制因子 2 0 (HRF 2 0 )表达水平。方法 :采用流式细胞术测定 134例肾小球肾炎患者尿中CD16 + Mo MΦMCP、DAF和HRF 2 0表达水平 ,采用ELISA法测定尿中可溶性C5b 9(sC5b 9)水平。结果 :MC病人尿中sC5b 9水平及CD16 + Mo MΦMCP、DAF、HRF 2 0表达水平与正常组无显著差异 (P >0 0 5 ) ,GS、MN及PGN病人尿中sC5b 9水平、CD16 + Mo MΦMCP、DAF、HRF 2 0表达水平均显著高于正常组 (P <0 0 1) ,且MCP、DAF、HRF 2 0表达水平与sC5b 9水平呈显著正相关 (P <0 0 1)。结论 :肾小球肾炎补体激活时尿中CD16 + Mo MΦMCP、DAF、HRF 2 0表达水平显著上调 ,以保护浸润肾组织的CD16 + Mo MΦ不被激活的补体损伤。从而 ,CD16 + Mo MΦ产生促炎作用 ,参与肾小球肾炎的发病及发展。

血液透析对转化生长因子β_1及补体调节蛋白CD59基因表达的影响

目的 研究不同透析膜对维持性血液透析(MHD)患者外周血转化生长因子β1及补体调节蛋白CD59活性表达的影响。方法 通过流式细胞术和酶联免疫吸附方法测定长期采用铜仿膜(CU)和聚砜膜(PSU)透析患者外周血TGF-β1水平和CD59活性表达。结果 MHD患者血浆TGF-β1水平明显增加(P<0.05),其中CU组为[(2.62±0.:18)ng/ml];PSU组为[(1.19±0.12)ng/ml],与正常对照组相比均有显著差异(P<0.01,P<0.05);而PSU组与CU组相比,外周血TGF-β1水平明显下降(P<0.05)。CD59在正常人外周血单个核细胞中无表达,而在尿毒症未透析组及血液透析组均有表达,其中未透析组表达较低,而血液透析组表达较高,CU膜血液透析组较PSU血液透析组表达要高(P<0.05)。经相关分析结果显示:CU组与PSU组内TGF-β1水平与CD59表达均呈现良好的相关性(r=0.6409与0.583,P<0.05)。结论 血液透析通过血液-透析膜间相互反应可活化补体,诱导外周血单个核细胞(PBMC)合成TGF-β1增多,异常增高的TGF-β1水平,则可上调CD59基因表达,抑制补体异常活化造成的细胞破坏,对机体具有代偿性保护意义。然而从生物相容性的角度看,不同透析膜如CU和PSU对MHD患者TGF-β1与CD59的影响有所不同,从细胞因子基因表达水平看,铜仿膜生物相容性较聚砜膜差。

血脂平冲剂对HLP大鼠补体调节蛋白CD55、CD59表达的影响

目的:揭示血脂平冲剂对实验性高脂血症大鼠CD55、CD59表达的影响。方法:将60只昆明种雄性SD大鼠随机分为空白对照组、病理模型组、西药组、血脂平冲剂大剂量组、血脂平冲剂中剂量组、血脂平冲剂小剂量组。测定血脂平冲剂对SD大鼠总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)的影响。测定血脂平冲剂对SD大鼠CD55、CD59表达的影响。结果:血脂平冲剂能显著降低SD大鼠TC、TG、LDL-C水平,能使CD55、CD59表达明显上调,且具有明显的量效关系。结论:血脂平冲剂可影响CD55、CD59的表达,有显著的降脂效果,干预动脉粥样硬化的发生。

阿托伐他汀对高脂血症患者白细胞补体调节蛋白表达的影响

目的观察阿托伐他汀对高脂血症患者白细胞补体调节蛋白表达的影响.方法高脂血症患者25例采用阿托伐他汀治疗8～12 w,应用流式细胞仪测定治疗前后外周血白细胞补体调节蛋白CD55、CD59的表达.结果高脂血症患者CD55阳性淋巴细胞平均荧光强度低于对照组[(2.03±0.30) vs(2.27±0.42),P＜0.05],白细胞CD59表达水平与对照组无显著差异;治疗8～12 w,CD59阳性淋巴细胞、单核细胞、粒细胞平均荧光强度均显著升高[(4.34±1.14) vs(3.69±0.74),(4.51±1.33) vs(3.89±0.88),(5.65±1.68) vs(4.65±0.98);P＜0.01,P＜0.05,P＜0.01],治疗前后白细胞CD55表达水平无明显变化.结论高脂血症患者淋巴细胞CD55表达水平较正常人降低,CD59与正常人无明显差别,阿托伐他汀治疗可上调CD59表达,但对CD55表达无明显影响.

补体调节蛋白CD55和CD59在Stevens-Johnson综合征/中毒性表皮坏死松解症患者外周血的表达水平

目的检测Stevens-Johnson综合征(SJS)和中毒性表皮坏死松解症(TEN)患者外周血补体调节蛋白CD55和CD59的表达水平,初步分析其在发病中的可能作用。方法收集2017年12月至2022年12月在安徽医科大学第一附属医院和安徽医科大学第二附属医院皮肤科住院治疗的SJS和TEN患者(SJS/TEN组),同时收集发疹型药疹患者(轻症对照)和健康对照。采用流式细胞仪检测外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞的比例。通过流式液相多重蛋白定量技术检测炎症相关细胞因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-17、IL-10、γ干扰素(IFN-γ)、IL-2和IL-4的表达水平。采用实时荧光定量PCR检测PBMC中CD55和CD59 mRNA水平。采用流式细胞术检测CD8+T淋巴细胞表面CD55和CD59蛋白的表达情况。采用单因素方差分析和Tukey检验进行统计学分析。结果共收集13例SJS/TEN患者,27例发疹型药疹患者,40例健康对照。SJS/TEN患者中,男8例,女5例,18~84(47.15±19.99)岁,病程(7.74±2.63)d,3组性别和年龄的差异均无统计学意义(P>0.05)。3组CD4+T淋巴细胞比例差异无统计学意义(F=3.84,P=0.051)。SJS/TEN患者外周血CD8+T淋巴细胞比例(25.60%±4.57%)较健康对照(16.20%±6.28%)更高(q=4.59,P=0.018)。SJS/TEN患者细胞因子TNF-α、IL-6、IL-10、IL-17和IFN-γ的表达水平高于健康对照和轻症对照组(均P<0.001)。此外,SJS/TEN患者PBMC中CD55(F=9.46,P<0.001)和CD59 mRNA表达(F=15.14,P<0.001)均低于健康对照和轻症对照组。SJS/TEN患者CD8+T淋巴细胞表面CD55(F=51.51,P<0.001)和CD59蛋白(F=31.59,P<0.001)亦明显低于其他两组或健康对照组。结论补体调节蛋白CD55和CD59在SJS/TEN患者中表达降低,可能与SJS/TEN患者CD8+T淋巴细胞激活以及体内过度的炎症反应相关。

CD46在小鼠脑缺血再灌注损伤中的表达和意义

目的观察补体调节蛋白CD46在小鼠脑缺血．再灌注损伤过程中的表达变化情况，探讨其在脑缺血-再灌注损伤中的可能意义。方法采用线栓法制备小鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）模型，缺血1h后再灌注。记录脑组织病理的动态变化，应用免疫荧光组织化学法及荧光定量PCR法检测脑内补体调节蛋白CD46的表达变化。结果脑组织病理损伤在再灌注后24h达最重，脑内补体调节蛋白CD46的表达水平逐渐减少，至再灌注后24h达最低，再灌注96h基本恢复正常。补体调节蛋白CD46表达水平与脑组织病理损伤呈负相关。结论脑缺血-再灌注后补体调节蛋CD46的表达水平发生显著变化，推测其可能参与脑缺血-再灌注后的免疫损伤过程，通过调节补体调节蛋nCD46的激活可为治疗脑缺血-再灌注损伤提供参考。

GPI锚固型CD46/CD55嵌合分子的设计及构建

目的 选取调控补体活化中心环节C3转化酶的两种膜调节蛋白CD4 6和CD5 5 ,设计构建了新型的GPI锚固型CD4 6 /CD5 5嵌合分子。方法 以CD4 6cDNA和CD5 5cDNA为模板 ,通过PCR及PCR重叠延伸技术 (SOE)得到CD4 6 /CD5 5嵌合cDNA。为避免双分子连接后的空间结构和功能的变化 ,在CD4 6与CD5 5之间引入了多肽氨基酸接头 (Linker) ,然后克隆构建GPI锚固型CD4 6 /CD5 5 BluescriptM13克隆载体。结果 获得了阅读框完整、连接部位正确的GPI锚固型CD4 6 /CD5 5嵌合分子cDNA。结论 本研究为研制开发新一代的多功能。

版纳微型猪近交系CD46基因克隆、序列及组织表达分析

根据猪NM_213888及EST序列,设计特异引物扩增BMI CD46基因,并进行克隆、测序和生物信息学分析。同时应用半定量RT-PCR技术对BMI 30个重要组织进行表达谱分析。获得了BMI CD46 1 092 bp的编码区序列(Gen Bank登录号:KJ513478),编码363个氨基酸。分析表明,CD46蛋白质分子量(Mw)为39.60 k D,等电点(p I)为5.39,存在4个保守域和1个跨膜结构域,N端有信号肽序列;其N末端疏水,C末端亲水;亚细胞定位显示,该蛋白位于细胞周质的概率是56.7%。活性位点分析表明,BMI CD46蛋白有6类活性位点。系统进化分析表明,BMI与牛的亲缘关系最近。BMI 30种组织表达分析表明,CD46基因在十二指肠中高表达;在睾丸、胸腺、甲状腺、附睾、肺、淋巴结、空肠、回肠、结肠、小脑及舌下腺中中度表达;在颌下腺、肝、肾上腺、盲肠、直肠、食管、垂体及脑干中低表达;在心、脾、肾、肌肉、胰脏、胃、皮肤、大脑、下丘脑及脊髓中不表达。该结果为进一步研究基因功能奠定基础。