利用溶氧作为控制信号补料分批培养生产PHA的研究

利用已构建的工程菌Escherchia coli XL1-Blue(pKSABC),在20L自动发酵罐里进行补料分批培养。研究表明,底物浓度、温度、pH、DO等参数是影响菌体生长和PHA积累的重要因素;通过补料分批培养可以提高PHA的积累量。通过对DO在发酵过程中的变化规律的分析,确定DO作为补料时间的在线控制信号。补料的原则是,使发酵前期菌体大量生长,发酵后期PHA大量积累。在优化条件下,对工程菌Escherchia coliXL1-Blue(pKSABC)进行了60 h的补料分批培养,菌体浓度、PHA浓度和PHA占细胞干重的百分比分别为179g/L,132g/L,73.7%。

基于补料贡献率的内高压成形质量控制策略的研究

提出了补料贡献率和相对补料贡献率的概念,研究了不同加载路径对补料贡献率的影响,及基于成形过程的补料贡献率的问题,虽然补料效果也作为衡量内高压工艺优劣的一个重要指标,但它也受到补料“时机”的影响,只有在合适的时间进行恰当的补料才能真正地体现补料作用,对其它类似制件的优化控制有一定的参考作用。

Candida krusei的分批培养与补料分批培养生产甘油

采用 Candida krusei分批发酵生产甘油 ,因菌体生长阶段形成副产物 ,甘油总得率仅为 0 .377g/ g。生长阶段改用流加培养 ,限制葡萄糖的供应 ,然后补入剩余葡萄糖 ,这样 ,菌体对葡萄糖的得率系数和甘油总得率比分批培养分别提高了 0 .2 5 8g/ g和 0 .0 5 8g/ g,最终甘油浓度提高了 10 g/ L

补料分批培养生产2-酮基-D-葡萄糖酸的研究

研究了补糖对荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)AR4生产2-酮基-D-葡萄糖酸的影响,并在50kL发酵罐上进行了补料分批培养工业应用性试验。研究结果表明,采用补料分批培养方法,能有效提高发酵液中的产物浓度;开始补糖时发酵液中的残糖浓度以3%～6%为宜;补料分批培养方法及AR4菌株可用于2-酮基-D-葡萄糖酸的工业化规模生产中。

重组大肠杆菌VG1(pTU14)产PHB的补料分批培养

利用已构建的同时含有透明颤菌血红蛋白基因 (vgb)、λ噬菌体裂解基因 (S-RRz)和PHB合成基因(phbCAB)的产PHB基因工程大肠杆菌VG1(pTU14 ) ,在 5L发酵罐里进行补料分批培养 .研究发现 :碳氮比(C/N) ,DO(溶氧 )及碳源和氮源的浓度是影响菌体生长和PHB积累的重要因素 ;补料时间可以通过DO和 pH值两个参数的变化在线综合识别 ;流加策略应使发酵前期菌体大量生长 ,发酵后期PHB大量积累 .在优化条件下 ,对VG1(pTU14 )进行 6 0h的补料分批培养 ,菌体细胞浓度、PHB浓度和PHB占细胞干质的分数分别高达2 15 .9g·L-1、 193.7g·L-1和 89.7% .

苏云金杆菌深层发酵补料分批培养工艺研究

补料培养与分批培养进行平行对比实验结果 ,补料培养相对于分批培养 ,培养过程Bt最大菌数平均提高了 4 0亿 /ml,晶体含量平均提高了 0 83mg/ml,毒力效价平均提高 1 80 0IU/μl。且补料工艺对生长高峰期溶氧的改善有明显的效果。

绣球菌的补料分批培养

在绣球菌不同生长时期分别补加不同浓度的碳氮源,并以不同补料方式进行摇瓶补料分批发酵试验,通过分析菌丝体的干质量和胞外多糖的产量,筛选绣球菌液体发酵的最佳补料方式.结果显示,在绣球菌对数生长后期分4次补加2.0%淀粉效果最佳,菌丝体干质量达(12.201±0.173)mg/mL,多糖产量达到(40.011±0.201)mg/mL;在对数生长后期分4次补加0.5%蛋白胨,其菌丝体干质量和胞外多糖产量最高,分别可达到(7.430±0.197)mg/mL和(33.541±0.215)mg/mL;在绣球菌对数生长后期分4次同时补加淀粉、蛋白胨各5 mL效果最佳,菌丝体干质量为(12.735±0.208)mg/mL,胞外多糖产量为(41.931±0.310)mg/mL.

恒pH补料分批培养技术培养谷胱甘肽合成酶系

采用一种新的补料分批培养技术 ,培养重组大肠杆菌生产谷胱甘肽合成酶系 .在分批培养和补料分批培养期间 ,采用不同的pH控制模式 :在发酵前期采用分批培养 ,加入碱以补偿pH值的降低 ;而在发酵后期 ,采用一种新的恒 pH补料分批培养方式 ,加入葡萄糖和碱调节发酵液的 pH .在这种模式中 ,根据培养过程中的pH变化确定pH参数 .实验结果表明 :同时设置发酵液的 pH上限和下限可避免恒 pH补料分批培养过程中葡萄糖的周期性缺乏问题 ;对于缓冲能力不同的发酵液 ,应设置不同的pH参数来进行

青霉素补料分批培养的人工神经网络模型

用基于△规则和最速下降法的反向传播算法构建了一个能够超前１ｈ预测青霉素补料分批培养状态变化的人工神经网络模型。分别考察了不同隐层层数及神经元数、不同步长、不同初始权矩阵及不同收敛准则对人工神经网络模型的影响。研究结果表明：当网络拓扑结构为５３５３，步长为１、初始权值取０９８及收敛准则为１０１０时。

利用补料分批培养技术生产红曲色素的研究

对摇瓶发酵生产红曲色素的补料分批培养技术进行了研究，结果表明：培养基中萄萄糖浓度大于４％时，红曲色素的形成受到明显的抑制，采用补料分批培养技术可以明显地提高发酵液的红曲色素总色价。当初始葡萄糖浓度为４％时，在接种３６ｈ到１３２ｈ之间，分８次补加葡萄糖，使总糖浓度达到１０％，发酵液的总色价可达到４４２．

假蜜环菌深层发酵补料分批培养工艺研究

研究了5L发酵罐上用酵母泥复合培养基,液体深层培养假蜜环菌的补料分批工艺。优化的补料流加方式(根据还原糖浓度补料并添加微量钴离子)相对于分批培养,培养过程中最大菌体干重平均提高了6.284g/L,即产量提高了77.3%。

补料分批培养过程模拟

引用广义对数方程描述了两次恒流补料分批培养的全过程。结果表明:过程模拟的好坏很大程度上取决于模拟精度的选择;微生物比生长速度μ及限制底物比消耗速度q与微生物细胞中核糖核酸的含量存在某种定量关系。

德氏乳杆菌保加利亚亚种补料分批培养研究

德氏乳杆菌保加利亚亚种等pH值培养的适宜pH值为6.0。对单一补料分批培养进行理论分析,在准恒定状态下,稀释率与比生长速率基本相同,即μ≈D。采用全营养物料连续流加法,在对数生长末期进行补料操作,确定德氏乳杆菌保加利亚亚种起始流加速率为5.874×10-4m3/h。补料培养的德氏乳杆菌保加利亚亚种的菌体密度可达1.0×1010cfu/mL。

补料分批培养提高转氨酶发酵产酶密度的研究

转氨酶是苯丙酮酸酶法制备L-苯丙氨酸的关键酶源,为提高转氨酶的发酵产酶密度,文章采用补料分批培养方式对大肠杆菌A5发酵产酶进行了研究。优化的补料培养工艺为:初始葡萄糖质量浓度5 g/L,初始氮源体积分数为玉米浆5 mL/L、蛋白胨质量浓度1.5 g/L,控制发酵过程pH值7.5,当葡萄糖质量浓度下降为2 g/L,开始每隔2 h补加质量浓度为120 g/L的葡萄糖溶液,从8 h起每隔2 h补加20 mL/L玉米浆+6 g/L蛋白胨及0.6 g/L的4种氨基酸溶液(L-甲硫氨酸、L-缬氨酸、L-异亮氨酸和L-谷氨酸)。在此条件下发酵培养24 h,菌体干质量浓度达10.5 g/L,比优化前产酶量提高了126%。

酿酒酵母重组人α2a干扰素补料分批培养

在 2 .6L全自动发酵罐中对人 α2 a干扰素重组酵母的补料分批培养过程作了初步研究。结果表明 ,培养过程中待葡萄糖耗尽时流加葡萄糖 ,并维持低糖浓度 ;在培养 1 0 h～ 2 0 h时 ,恒速流加 2 0 mg/L的腺嘌呤 ,能较大幅度提高表达水平 ,生物活性从原工艺的 3.1× 1 0 9IU/L提高至1 .3× 1 0 10 IU/L。表达期 p H值对生产水平有很大影响 ,宜控制在 5.0～ 5.

产PCA基因工程菌M18G反复补料分批培养研究

吩嗪-1-羧酸(PCA)是一种广谱、高效的微生物源农药,采用反复补料分批培养工艺可提高PCA合成速率,为实现PCA的商业化生产打下了良好的基础。本试验针对高产PCA的基因工程菌M18G,首先在摇瓶培养条件下,用正交试验法研究了培养基中各主要营养因子葡萄糖、黄豆粉、甘油、95%乙醇等对PCA产量的影响,并确定了适合PCA分泌的最佳培养基(1L)为:葡萄糖6g,黄豆粉40g,甘油6mL,95%乙醇5.9mL;然后确定了反复补料分批培养时更换新鲜培养基的最佳时间为每次培养进行48h后、体积比例为90%。在此条件下,培养进行五个周期后,PCA的合成速率可达到2.27mg/h,是优化后分批培养的1.34倍,同时延长了培养周期,有利于提高设备使用率,降低生产成本。

双歧杆菌BBMN02培养基优化及发酵罐补料分批培养

双歧杆菌（Bifidoba Cterium）是人体肠道内重要的生理性细菌，与其它细菌成员构成一个微生物群落，并与宿主构成微生态系统。双歧杆菌具有维持微生态平衡、生物拮抗、免疫调节、营养等多方面的生理功能。近年来随着研究的深入，还发现其具有抗癌、抗衰老、护肝和控制内毒素血症等多方面的功能。双歧杆菌BBMN02分离自广西巴马长寿区老人肠道内，具有很高的安全性，通过动物实验证实其具有调节肠道菌群及体内免疫刺激的功能。本文将通过优化培养基并采取发酵罐补料分批培养双歧杆菌BBMN02，以大量获得该菌株。

人丙酮酸羧化酶异位表达提高中国仓鼠卵巢细胞补料分批培养后期活率

构建了人丙酮酸羧化酶(hPC)异位表达的重组CHO细胞,并检测了重组细胞生长情况的改变。利用分子生物学实验技术构建hPC-pcDNA 3.0表达载体,将其转染CHO-K1细胞;转染细胞经过G418抗性筛选后,通过荧光定量PCR检测目的基因表达,并挑选表达量最高的克隆进行补料分批培养。电泳及测序结果显示,构建的hPC-pcDNA3.0表达载体序列与预期一致;在mRNA水平鉴定目的基因显示,4#克隆的mRNA表达水平最高;选其进行补料分批培养,生长曲线显示在培养后期,其活细胞密度和细胞活率均高于对照。成功构建了细胞生长和活率改善的重组CHO细胞,获得了生长改善的细胞株,为后续的重组蛋白表达研究与细胞培养工艺优化奠定了基础。