止泪补肝散加减治疗功能性泪溢的临床研究

目的:观察止泪补肝散加减对功能性泪溢的治疗效果。方法:将90例功能性泪溢患者随机分为治疗组和对照组,每组各45例。治疗组给予中药汤剂止泪补肝散加减口服,对照组给予复方硫酸锌滴眼液点眼,治疗时间为30 d。比较两组的总有效率、流泪频率、泪河高度、中医证候积分及安全性。结果:治疗组总有效率为79.27%(65/82),对照组为38.16%(29/76),治疗组总有效率高于对照组(P<0.01)。治疗后两组患者的流泪频率Munk分级值均较治疗前降低(P<0.05),且治疗组患者的Munk分级值低于对照组(P<0.01)。治疗后两组患者的泪河高度均较治疗前降低(P<0.05),且治疗组患者的泪河高度低于对照组(P<0.05)。治疗后两组患者的中医证候总评分均较治疗前降低(P<0.05),且治疗组患者的中医证候总评分低于对照组(P<0.01)。两组患者治疗后、随访期不良反应症状量表(TESS)评分比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:止泪补肝散加减能有效治疗功能性泪溢,降低患者流泪频率,降低泪河高度,减轻症状,且安全性高。

基于AGEs/RAGE/NF-κB通路探讨补肝散改善D-半乳糖致衰大鼠学习记忆障碍机制研究

目的探讨复方补肝散(BGSD)干预D-半乳糖致衰大鼠学习记忆能力的潜在作用机制。方法40只大鼠被随机分为对照组、模型组、BGSD[14.06 g/(kg·d)]组和吡拉西坦[0.4 g/(kg·d)]组,每组10只。腹腔注射D-半乳糖[400 mg/(kg·d)]建立衰老大鼠模型。每周记录大鼠体质量、摄水量、摄食量和抓力;八臂迷宫和跳台实验评估大鼠学习记忆能力;称取肝脏、胸腺、脾脏和脑组织重量以计算相应脏器指数;检测血清丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;苏木精-伊红(HE)染色观察海马病理学改变;酶联免疫吸附法(ELISA)检测海马肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6及IL-1β水平;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测海马晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、核因子-κB(NF-κB)、TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA表达;蛋白免疫印迹法(WB)检测海马晚期糖基化终末产物(AGEs)、RAGE和NF-κB蛋白表达。结果补肝散可显著增加D-半乳糖致衰大鼠的摄食量、摄水量、体质量、抓力及脏器指数(P<0.05),减少八臂迷宫中工作记忆错误(WME)、参考记忆错误(RME)以及总记忆错误次数(TE)(P<0.05),降低跳台实验中错误次数并延长跳台潜伏期(P<0.05)。此外,补肝散可减少海马神经元损伤,提高血清SOD活性,降低MDA含量及下调促炎因子TNF-α、IL-6和IL-1β水平(P<0.05)。进一步研究结果显示,补肝散可显著降低海马AGEs、RAGE和NF-κB表达(P<0.05)。结论补肝散可通过抑制AGEs/RAGE/NF-κB信号通路调节D-半乳糖致衰大鼠神经炎症损伤从而改善学习记忆能力。

补肝散不同极性部位抗抑郁活性及其作用机制研究

目的考察补肝散醇提物不同极性提取部位的抗抑郁活性及初步作用机制。方法采用急性应激抑郁模型,小鼠分别灌胃补肝散醇提物(1.92 g/kg)、石油醚提取物A(0.244,0.122 g/kg)、二氯甲烷提取物B(0.160,0.077 g/kg)、乙酸乙酯提取物C(0.232,0.116 g/kg)、正丁醇提取物D(1.04,0.518 g/kg)及阳性对照药盐酸帕罗西汀(PX,26 mg/kg),连续给药14 d,测定各组小鼠在悬尾实验和强迫游泳实验中的不动时间;采用酶联免疫吸附测定法,考察活性提取部位B、C、D对小鼠大脑额叶皮质中神经递质5-羟色胺(5-HT)和多巴胺(DA)含量的影响。结果 PX、醇提物、提取物C、D及B高剂量均能显著缩短小鼠悬尾和游泳不动时间,提取物A及B的低剂量有缩短小鼠悬尾和强迫游泳不动时间的趋势,但与对照组比较无明显差别。提取物C、D及B的高剂量均能明显增加实验小鼠额叶皮质中单胺类神经递质5-HT含量,对DA含量有增加趋势。结论补肝散醇提物的抗抑郁活性部位主要集中于乙酸乙酯、正丁醇提取部位,其次为二氯甲烷提取部位;其抗抑郁的作用可能与增加脑内单胺类神经递质5-HT、DA含量有关。

补肝散对感染血吸虫小鼠肝损伤后肝组织Bcl-2、Bax水平的影响

目的:观察补肝散干预感染血吸虫小鼠肝损伤模型后,对肝组织凋亡相关基因Bcl-2和Bax蛋白表达水平的影响,探讨补肝散对肝损伤的防护作用机制。方法:选择健康8周龄雄性昆明小白鼠108只,随机分为5组,将血吸虫尾蚴(18条/只)经小鼠腹部皮肤攻击感染造模,每组定期随机抽取6只小鼠,处死后留取其肝脏左叶,置于10%中性甲醛(用PBS配)固定,免疫组化法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达水平。结果:①Bcl-2、Bax表达在模型组小鼠肝组织中的阳性率均明显升高,与正常组比较差异有显著性意义(P<0.05),Bcl-2/Bax比值下降(P<0.05);②补肝散组与模型组相比小鼠Bcl-2表达升高差异有显著性意义(P<0.05),Bax表达升高差异无显著性意义(P>0.05),Bcl-2/Bax比值增高差异有显著性意义(P<0.05)。结论:补肝散可促进Bcl-2表达,使Bcl-2/Bax比值上调,减少肝细胞的凋亡,进而防护血吸虫性小鼠肝损伤,发挥抗纤维化的作用。

补肝散对四氯化碳诱导急性肝损伤小鼠TGF-β_1表达的影响

目的观察补肝散对急性肝损伤的保护作用及对转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响。方法 60只雄性昆明种小鼠随机分为正常组,模型组,联苯双酯组,补肝散大、中、小剂量组(45,22.5,11.25 g/mL)。用50%CCl4花生油溶液腹腔注射诱导小鼠急性肝损伤动物模型。补肝散组予补肝散灌胃给药,联苯双脂组采用联苯二酯灌胃给药,测血清谷丙转氨酶水平、肝组织丙二醛含量,备肝脏病理标本,原位杂交法测TGF-β1表达。结果与模型组相比较,补肝散大、中剂量组血清谷丙转氨酶水平及肝脏丙二醛含量明显降低,补肝散大剂量组TGF-β1表达显著降低。结论补肝散对CCl4诱导的小鼠急性肝损伤有明显的保护作用。

补肝散含药血清对肝星状细胞的外周型苯二氮卓受体表达及凋亡的影响

目的:探讨补肝散含药血清对培养肝星状细胞(HSC)的外周型苯二氮卓受体(PBR)及凋亡的影响,并从PBR角度探讨其作用机制。方法:在不同浓度(5%、10%、20%)补肝散含药血清液的作用下,在PBR高表达期的不同时间,采用流式细胞仪测定细胞凋亡指数,同时采用放射免疫法检测PBR特异性配基[3H]PK11195结合量。结果:与不含药血清组相比较,补肝散各含药血清组细胞凋亡指数明显增加,而HSC与[3H]PK11195结合量明显减少(P<0.05,P<0.01)。结论:补肝散含药血清可以促进HSC凋亡,可能通过PBR途径发挥作用。

补肝散治疗肝纤维化的临床观察

目的观察补肝散治疗慢性肝病肝纤维化的疗效。方法86例慢性肝病病人随机分为两组,对照组常规护肝治疗(甘草酸二胺,门冬氨酸钾镁,还原型谷胱甘肽等),治疗组在对照组的基础上加用补肝散疗程3个月,并随访6个月。观察患者症状与体征,肝功能指标、血清肝纤维化指标、评价临床疗效。结果治疗组临床疗效总有效率,高于对照组(P<0.05);治疗后两组患者肝功能和肝纤维化程度明显改善,与治疗前比较均有显著性差异(P<0.05),且治疗组肝功能和肝纤维化改善情况优于对照组,两组比较有显著性差异(P<0.05)。结论补肝散治疗慢性肝病肝纤维化有效。

正交优化微波提取补肝散中抗抑郁有效组分群的工艺

目的优选微波提取补肝散中总黄酮和总皂苷的工艺。方法以总黄酮和总皂苷的含量为考察指标,采用正交试验法,考察乙醇体积分数、辐射温度、微波功率和提取时间对微波醇提补肝散中总黄酮和总皂苷提取量的影响。结果总黄酮和总皂苷的微波提取最佳工艺为乙醇体积分数50%,辐射温度80℃,微波功率200W,提取时间15min。结论优化的微波提取补肝散中总黄酮和总皂苷的工艺条件稳定、可行。

补肝散对亚急性衰老模型小鼠SOD及MDA的影响

目的:观察补肝散对D—半乳糖(D-gal)衰老模型小鼠的心肝脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活力以及丙二醛(MDA)含量的影响。方法:48只小鼠分为6组,除正常对照组外,其余5组用5%D-gal100mg/kg注射于小鼠颈背部皮下,建立小鼠衰老模型。于造模第43天停止造模用药,正常对照组、自然恢复组用同体积蒸馏水灌胃。补肝散3个给药组分别按12.9g/(kg.d)、25.7g/(kg.d)、51.4g/(kg.d)给药(容积为0.54ml),连续灌胃2周。结果:与正常对照组相比,模型组小鼠心肝脑组织MDA含量明显增加,SOD活力下降,与模型组相比,3个给药组小鼠心肝脑MDA含量明显减少(P<0.05)、SOD活力增强(P<0.05)。结论:补肝散能拮抗自由基损伤,减少D-gal衰老模型小鼠心肝脑组织MDA含量,增强其心肝脑组织SOD活力。

秦裕辉运用四物补肝散加味治疗眼病经验

介绍秦裕辉教授运用四物补肝散加味治疗眼病的经验。四物补肝散,出自明傅仁宇《审视瑶函·卷四》,用于“治妇人产后,午后至夜昏花不明”,清顾世澄《疡医大全》用其治疗“雀目初起”。秦教授临证调整其原剂量,扩大其使用范围,常用该方治疗孕期及妇女产后目病、干眼、眼疲劳,取得满意疗效,并附验案3则,以资佐证。

基于线粒体自噬研究补肝散对衰老大鼠肝脏损伤的影响

目的:基于肝气虚理论和线粒体自噬探讨衰老机制,观察补肝散对衰老大鼠肝脏损伤的影响。方法:SPF级雄性SD大鼠32只,随机分为空白组、模型组、补肝散组、雷帕霉素组,每组8只。除空白组腹腔注射0.9%氯化钠溶液(10 mL/kg)外,其余各组均腹腔注射D-半乳糖溶液(D-gal,400 mg/kg),复制衰老大鼠模型。造模同时,补肝散组灌服补肝散煎液(14.06 g/kg),雷帕霉素组灌服雷帕霉素溶液(1 mg/kg),空白组和模型组灌服等量0.9%氯化钠溶液,连续56 d。测定各组大鼠体质量、抓力,血清丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)含量。HE染色观察各组大鼠肝组织病理学变化;RT-qPCR检测线粒体融合蛋白(Mfn)1、Mfn2、自噬关键分子酵母Atg6同系物1(Beclin1)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、p62 mRNA表达水平;免疫组化染色(ABC法)检测Beclin1、p62蛋白表达;Western Blot测定Mfn1、Mfn2、LC3蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠出现肝细胞水肿,肝血窦受挤压变窄,轻度脂肪变性及少量肝细胞坏死,另可见肝细胞嗜酸性病变及凋亡的肝细胞;体质量和抓力显著降低(P<0.05);血清MDA含量升高(P<0.05),SOD活性降低(P<0.05),ALT、AST、ALP含量升高(P<0.05);肝组织中Mfn1、Mfn2、p62 mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05),Beclin1、LC3 mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05)。与模型组比较,补肝散组大鼠肝细胞水肿减轻,脂肪变性减少,嗜酸性病变及凋亡的肝细胞明显减少;体质量和抓力显著升高(P<0.05);血清MDA含量降低(P<0.05),SOD活性升高(P<0.05),ALT、AST、ALP含量降低(P<0.05);肝组织中Mfn1、Mfn2、p62 mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05),Beclin1、LC3 mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论:衰老大鼠肝脏损伤与线粒体自噬功能下降关系密切,可作为肝虚致衰的重要机制;补肝散可通过提高肝脏线粒体自噬水平,减缓衰老大鼠肝脏损伤程度。

补肝散不同分离组份抗抑郁活性筛选

目的对补肝散醇提物不同分离组份的抗抑郁活性进行筛选。方法采用慢性不可预知温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)对小鼠进行为期8周的造模,造模4周后,分别以盐酸帕罗西汀(paroxetine hydrochloride,PX)、补肝散醇提物、石油醚(A)、二氯甲烷(B)、乙酸乙酯(C)及正丁醇(D)4个分离组份进行为期4周的灌胃治疗,考察各组小鼠的行为学及脑内神经递质含量的变化。结果连续给药4周(造模8周)后,PX组(0.026 g·kg^(-1))、补肝散醇提物组(1.92 g·kg^(-1))及其分离组份C(0.232 g·kg^(-1))、D(1.04 g·kg^(-1))和B(0.160 g·kg^(-1))组均能明显逆转模型小鼠的抑郁表现如糖水偏好率下降、强迫游泳不动时间延长等抑郁症状。能不同程度地增加其脑内额叶皮质中5-羟色胺和多巴胺的含量,其中PX、醇提物及分离组份C的作用更为明显(与模型组比较,P<0.05或<0.01)。结论补肝散醇提物的抗抑郁活性部位主要集中于乙酸乙酯和正丁醇分离组份,其次是二氯甲烷分离组份。

基于BDNF/TrkB介导的海马突触可塑性研究补肝散对衰老大鼠学习记忆功能的影响

目的基于肝气虚理论和海马突触可塑性探讨衰老机制,观察补肝散对D-半乳糖致衰老大鼠学习记忆能力的影响。方法 40只SPF级SD雄性大鼠随机分为空白对照组、模型组、吡拉西坦组和补肝散组,各10只。模型组、吡拉西坦组、补肝散组腹腔注射400 mg/kg D-半乳糖制备衰老大鼠模型,空白对照组腹腔注射等量生理盐水,每日1次,连续8周。造模当日始,补肝散组予以补肝散煎液灌胃(14.06 g/kg),吡拉西坦组予以吡拉西坦混悬液灌胃(0.40 g/kg),空白对照组和模型组给予等量蒸馏水(10 mL/kg),每日1次,连续8周。取材前1天称量大鼠体质量;抓力实验检测大鼠抓力大小;八臂迷宫和跳台实验评估大鼠学习记忆能力;尼氏染色观察海马神经元病理变化;免疫组织化学染色观察海马突触素(SYN)和突触后致密蛋白95(PSD95)表达特征;实时荧光定量PCR和免疫印迹法(Western blotting)分别检测海马脑源性神经营养因子(BDNF)、原肌球蛋白相关激酶B(TrkB)基因和蛋白表达。结果与空白对照组比较,模型组大鼠体质量下降,抓力降低,工作记忆错误、参考记忆错误和总记忆错误次数明显升高,平台潜伏期缩短,海马神经元数量明显减少,SYN和PSD95表达水平显著下降,BDNF、TrkB基因和蛋白表达水平显著降低(均P<0.05);与模型组比较,补肝散组大鼠体质量增加,抓力增大,工作记忆错误、参考记忆错误和总记忆错误次数显著下降,平台潜伏期延长,海马神经元数量显著增加,SYN和PSD95表达水平升高,BDNF、TrkB基因和蛋白表达水平显著升高(均P<0.05)。结论肝气亏虚是机体衰老的重要机制,调补肝气为其有效治法;补肝散可通过上调BDNF和TrkB水平以增强衰老大鼠海马突触可塑性,从而改善学习记忆能力,达到延缓衰老的目的。

补肝散对衰老大鼠学习记忆能力及氧化损伤的影响

目的:观察补肝散对衰老大鼠学习记忆及氧化损伤的影响,探讨肝气虚损与衰老的关系。方法:将24只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、补肝散组(14.06g·kg^(-1)·d^(-1))、吡拉西坦组(0.4g·kg^(-1)·d^(-1))。除空白对照组腹腔注射0.9%氯化钠溶液(10mL·kg^(-1)·d^(-1))外,其余3组腹腔注射D-半乳糖(400mg·kg^(-1)·d^(-1))诱导衰老大鼠模型。造模同时分别按照相应剂量给予药物干预,连续治疗8周。观察大鼠一般生物学特征;采用八臂迷宫和跳台实验评价大鼠学习记忆行为;测定脑、胸腺、脾脏、肝脏脏器指数及血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠记忆错误次数显著增多(P<0.01),跳台潜伏期显著缩短(P<0.01);脑、胸腺、脾脏、肝脏脏器指数显著下降(P<0.01,P<0.05);SOD活性显著降低(P<0.01),MDA含量显著升高(P<0.01)。与模型组比较,补肝散组大鼠记忆错误次数显著减少(P<0.05,P<0.01),跳台潜伏期显著延长(P<0.01);脑、胸腺、脾脏、肝脏脏器指数显著升高(P<0.01,P<0.05);SOD活性显著升高(P<0.01),MDA含量显著下降(P<0.05)。结论:补肝散可通过改善D-半乳糖致衰老大鼠氧化损伤程度从而提高学习记忆能力,此为探讨肝虚致衰理论提供了实验依据。

基于Rho/ROCK通路介导的细胞凋亡探讨补肝散对衰老大鼠心肌损伤的影响

目的观察衰老大鼠心肌损伤特征并探讨补肝散的干预机制。方法将32只SPF级SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组、补肝散组和维生素E组,除空白组腹腔注射等量生理盐水外,其余各组均腹腔注射D-半乳糖(D-galactose,D-gal)制备衰老大鼠模型。模型复制当日起,补肝散组与维生素E组分别灌胃浓度为14.06 g·kg^(-1)的补肝散和27 mg·kg^(-1)的维生素E,空白组和模型组给予等量生理盐水。以上均每日1次,连续8周,并于模型复制末日测定抓力。取血清及心脏组织,测定心脏脏器指数;检测血清丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性变化;检测血清谷草转氨酶(AST)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)含量;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠心肌组织病理形态学变化;Masson染色观察大鼠心肌组织胶原沉积和纤维化情况;TUNEL染色观察心肌细胞凋亡情况;免疫组织化学染色(ABC法)观察Ras同源基因A(RhoA)、Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1(ROCK1)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)表达特征;免疫印迹法(Western Blot)检测心肌组织RhoA、ROCK1、Bax和Bcl-2的蛋白表达。结果与空白组比较,模型组大鼠心肌细胞形态改变,呈现嗜酸性变性,胞质染色不均,部分心肌细胞坏死,心肌组织胶原沉积和纤维化明显;抓力及心脏脏器指数降低,MDA含量升高,SOD活性降低,心肌细胞凋亡指数及AST、CK、LDH含量升高(均P<0.05);RhoA、ROCK1、Bax蛋白表达增加,Bcl-2蛋白表达减少(均P<0.05)。与模型组比较,补肝散组大鼠心肌细胞轻度嗜酸性变性,偶有坏死、肥大情况,心肌组织胶原沉积较少,偶有纤维化产生,损伤情况较轻;大鼠抓力及心脏脏器指数升高,MDA含量降低,SOD活性升高,心肌细胞凋亡指数及AST、CK、LDH含量降低(均P<0.05);RhoA、ROCK1、Bax蛋白表达减少,Bcl-2蛋白表达增加(均P<0.05)。结论补肝散可通过调节Rho/ROCK介导的凋亡途径减轻衰老大鼠的心肌损伤,此为探讨肝气虚致衰理论提供了新的思路和实验支持。

《银海精微》肝气虚型眼病初探

[目的]探讨《银海精微》中肝气虚型眼病的辨证施治规律。[方法]运用文献学方法对《银海精微》中肝气虚型眼病的概况、症状及治疗方药进行归纳分析。[结果]《银海精微》一书中,共载眼病82个,其病机涉及肝气虚者共11个,肝气虚型眼病临床以流泪、视物不清、眼涩、目睛肿痛、羞明畏光为五大要症。有11个典型方剂,共使用药物41味。治疗选药以解表药为主组成方剂,约达三分之一,药物使用频次最多者为菊花;补虚药应用相对较少,仅占约五分之一,体现了肝气虚型眼病治疗"以通为补"的特色。其肝气虚型眼病名方,在现代中医工作者研究中,止泪补肝散使用最多。[结论]《银海精微》一书对肝气虚型眼病辨证论治全面完备,在丰富中医理论和指导眼病辨治方面均有深远意义;以眼病为切入点是研究肝气虚证的途径之一,值得深入研究。

从肝论治失眠探析

失眠的病位虽在心,但与肝关系密切;肝气郁结、肝郁化火、肝脉瘀滞、肝血亏虚、肝阴不足、肝气虚馁等病机变化极易导致阴阳失衡,从而阴阳失交发生本病。临床上从肝论治,分别采用疏肝解郁、清肝泻火、活血化瘀、补肝养血、滋阴清热、益气镇惊等法,取得了较好的疗效。

朱良春治疗肝病顽固胁痛的廉验特色发挥——著名老中医学家朱良春教授临床经验(57)

肝病胁痛的治疗说易亦难 ,历代医家各有千秋 ,吾师朱良春教授有其特色 ,笔者仿吾师严于辨证 ,精于用药之特色 ,临床治疗各种肝病 (包括肝癌 )胁痛 ,历年来均收廉验之效。中医方书浩如烟海 ,雷丰《时病论》云 :“甚矣 !医道之难也。”陈修园则著《医学实在易》。如何面对难与易 ?笔者认为如能明彻辨证 ,则登中医之堂室也 ,中医之疗效 ,多在于辨证的本领 ,而辨证的本领赖坚实的理论基础和临床心悟 ,才能有选方用药的灵感。清代医家徐大椿之辨证用药“无一病不穷究其因 ,无一方不洞悉其理 ,无一药不精通其性” ,当为后世之楷模。吾遵师训 ,每重辨证 ,凡遇疑难杂病 ,均注重寻根探源 ,索隐无遗 ,用药随机应变 ,力求继承中有所创新 ,今略谈体会 ,旨在杏苑共兴。