补肺消癥方治疗晚期肺癌60例临床观察

针对晚期非小细胞肺癌采用化疗存在的有效率低,中位生存期短,生活质量较差等主要问题,结合中医临床实践,采用益气养阴,祛瘀散结,化瘀解毒治疗原发性肺癌,临床收到较好的效果。

补肾益肺消癥方治疗老年COPD合并PIF的疗效及对患者血清VEGF、PAI-1、VCAM-1和肺功能的影响

目的 观察补肾益肺消癥方治疗老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并肺间质纤维化(PIF)的疗效,并探讨其对患者血清中血管内皮生长因子(VEGF)、纤溶酶原激活物抑制物1 (PAI-1)、血管细胞黏附因子(VCAM-1)和肺功能的影响。方法 收集2019年4月至2022年4月就诊于宝鸡市人民医院的102例老年COPD合并PIF患者为研究对象,采用随机数表法将患者分为观察组和对照组各51例,对照组患者以西药方式进行对症治疗,观察组患者在对照组基础上加用补肾益肺消癥方,疗程为2个月。比较两组患者的临床治疗效果,治疗前后的中医症状积分、血清VEGF、PAI-1、VCAM-1水平及肺功能指标[用力肺活量(FVC)、一秒用力呼气容积(FEV1)、FEV1/FVC]变化。结果 观察组患者的治疗总有效率为90.20%,明显高于对照组的72.55%,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗前,两组患者的中医症状积分比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后,观察组患者的喘促、咳嗽、胸闷积分分别为(1.77±0.51)分、(1.88±0.59)分、(1.57±0.45)分,明显低于对照组的(2.67±0.83)分、(2.55±0.76)分、(2.17±0.63)分,差异均具有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组患者的血清VEGF、PAI-1、VCAM-1水平均较治疗前明显降低,且观察组分别为(160.97±20.17) ng/L、(49.98±12.58) pg/mL、(359.17±103.05)μg/L,明显低于对照组的(171.17±21.53) ng/L、(57.65±13.36) pg/mL、(413.17±124.13)μg/L,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗前,两组患者的肺通气功能比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后,观察组患者的FEV1、FVC、FEV1/FVC%分别为(3.07±0.87) L、(3.58±1.09) L、(80.19±8.05)%,明显高于对照组的(1.97±0.43) L、(2.95±0.86) L、(66.26±7.19)%,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 补肾益肺消癥方对老年COPD合并PIF的治疗效果较好,且能够降低患者的血清VEGF、PAI-1、VCAM-1水平,改善肺脏通气功能。

补肾益肺消癥方干预肺纤维化大鼠TGFβ信号通路的作用机制

目的:探讨补肾益肺消癥方治疗特发性肺纤维化疗效的作用机制。方法:以博莱霉素致大鼠肺纤维化为动物模型,补肾益肺消癥方进行干预;检测血清中TGF-b1含量的差异、肺组织中TGF-b1R基因表达的改变以及Smad2/3、Smad4蛋白含量的差异。结果:该方可以明显下调IPF大鼠外周血血清中TGF-b1的含量和Smad2、3的表达,对TGF-bR1基因表达无影响。结论:通过调控TGF-b信号传导通路,缓解炎症反应并抑制肺组织纤维化,是补肾益肺消癥方疗效的关键作用机制之一。

补肾益肺消癥方干预肺纤维化大鼠JNK凋亡信号通路关键分子的表达调控内质网应激的作用机制

目的探讨补肾益肺消癥方干预肺纤维化大鼠内质网应激和JNK细胞凋亡信号通路的作用机制。方法将SD大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药物组、中药预防组、中药治疗组、中药防治组,除空白组外,其他组均以博莱霉素致大鼠肺纤维化模型。中药预防组及中药防治组造模1 d后开始给予补肾益肺消癥方12.68 g/(kg·d)灌胃,空白组和模型组予等量生理盐水灌胃。造模28 d后确定造模是否成功,并处死中药预防组大鼠,观察预防性给药对IPF的影响;造模成功后,阳性药物组给予吡非尼酮53.57 mg/(kg·d)灌胃,中药治疗组及中药防治组给予补肾益肺消癥方12.68 g/(kg·d)灌胃,空白组和模型组仍给予等量生理盐水灌胃,持续28 d。HE染色观察各组大鼠肺组织病理变化,real-time PCR及Westernblot检测肺组织中JNK信号通路相关因子GRP78、IRE1α、p-JNK、TRAF2基因表达及蛋白含量的差异。结果肺组织切片HE染色显示,阳性药物组、中药预防组及中药治疗组肺泡轻度破坏,成纤维细胞有一定程度增生;中药防治组肺泡结构完整,有少量成纤维细胞增生,较模型组纤维化程度明显改善;模型组肺组织中GRP78、IRE1α、p-JNK、TRAF2基因表达拷贝数比值及蛋白含量均明显高于空白组(P均<0.05);中药治疗组和中药防治组GRP78基因表达拷贝数比值及蛋白含量和TRAF2基因表达拷贝数比值均明显低于模型组(P均<0.05),阳性药物组和中药防治组IRE1α基因表达拷贝数比值均明显低于模型组(P均<0.05),阳性药物组、中药预防组、中药治疗组和中药防治组IRE1α蛋白含量均明显低于模型组(P均<0.05),中药防治组p-JNK蛋白含量明显低于模型组(P<0.05)。结论通过下调GRP78、IRE1α、p-JNK、TRAF2的水平,调控JNK信号通路,减轻内质网应激,减少细胞凋亡是补肾益肺消癥方延缓肺纤维化的作用机制之一。

补肾益肺消癥方对肺纤维化大鼠内质网应激及CHOP信号通路关键分子表达的影响

目的:探讨补肾益肺消癥方治疗特发性肺纤维化疗效的作用机制。方法:以博莱霉素致大鼠肺纤维化为动物模型,以吡非尼酮为阳性对照药物,补肾益肺消癥方干预,以透射电镜观察AECⅡ超微结构的变化,Real-time PCR和Western blot检测CHOP信号通路关键分子的基因及蛋白在病变肺组织中含量的变化。结果:透射电镜下与模型组比较,阳性对照组及中药各组弹性纤维、胶原纤维沉积及电子致密物减少,内质网扩张现象减轻。补肾益肺消癥方干预下,PERK、CHOP在蛋白水平和mRAN水平的表达呈下调趋势。结论:补肾益肺消癥方可以干预CHOP凋亡通路关键分子表达,调控肺纤维化大鼠细胞内质网应激,抑制AECⅡ细胞凋亡,阻滞和减缓肺组织的纤维化进程。

补肾益肺消癥方对肺纤维化大鼠MMPs基因表达及病理改变的影响

目的探讨补肾益肺消癥方治疗特发性肺纤维化的作用机制。方法将SD大鼠随机分为空白组、阴性对照组、阳性对照组、中药小剂量组、中药中剂量组、中药大剂量组,以博莱霉素致大鼠肺纤维化模型。阳性对照组给予地塞米松灌胃,空白组、阴性对照组分别给予等量生理盐水,中药小、中、大剂量组分别按成人剂量组5,10,20倍灌胃。通过Real-time PCR检测各组肺组织中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9基因表达情况,HE染色观察大鼠肺组织病理的改变。结果模型组大鼠肺组织中MMP-2基因表达量相比其他各组明显升高,中药治疗组表达量与空白组相近;中药治疗组大鼠肺组织中MMP-9明显高于模型组(P<0.01);肺组织切片HE染色分析结果显示,阳性对照组和中药治疗组肺泡壁轻度增厚,肺泡结构破坏程度较轻,存在成纤维细胞增生,纤维化程度较模型组明显改善。结论补肾益肺消癥方可以缓解免疫应答所导致的炎症反应及细胞外基质蛋白和胶原的沉积,从而抑制肺组织纤维化的进程,达到治疗效果。

补肾益肺消癥方对α-SMA及SP-C蛋白对肺纤维化大鼠病变肺组织分布及表达的影响

目的探讨补肾益肺消癥方干预肺纤维化大鼠α-SMA及SP-C蛋白在病变肺组织中分布及表达的作用机制。方法以博来霉素致大鼠肺纤维化的动物模型,以吡非尼酮作为阳性对照药物,补肾益肺消癥方分别于模型过程中、造模后及实验全程进行干预,观察动物活动及体重变化,免疫组化检测病变肺组织中α-SMA、SP-C蛋白表达。结果大鼠体重显示,模型组体重较正常组明显减轻(P<0.05),中药防治组体重较模型组明显升高(P<0.05)。免疫组化、免疫荧光结果显示,模型组病变肺组织中α-SMA、SP-C蛋白表达较正常组明显升高(P<0.05),阳性组和中药组α-SMA、SP-C蛋白表达较模型组明显减低(P<0.05)。结论补肾益肺消癥方可以通过减少α-SMA的表达及成熟SP-C蛋白沉积,减少成纤维灶的形成,抑制内质网应激反应,延缓特发性肺纤维化的病理进程,从而达到治疗的目的。

补肾益肺消癥方干预特发性肺纤维化Ⅱ型肺泡上皮细胞间充质转化调控内质网应激的作用机制

目的探讨补肾益肺消癥方抑制特发性肺纤维化病理进程的作用机制。方法以转化生长因子β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的A549细胞为模型,以TGF-β1抑制剂为阳性对照,筛选补肾益肺消癥方两种浓度冻干粉干预细胞模型,免疫荧光染色激光共聚焦显微镜下观察SP-C、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)及E-钙黏蛋白(E-Cadherin)表达,western-blot检测c-JUN氨基末端激酶(JNK)信号通路相关蛋白表达量。结果模型组较正常组细胞中SP-C、α-SMA表达明显增多(P<0.01),E-Cadherin表达明显降低(P<0.01),模型组细胞中JNK信号通路相关蛋白表达较正常组均明显升高(P<0.05,P<0.01);对照组及中药组较模型组细胞中SP-C、α-SMA表达明显降低(P<0.05,P<0.01),E-Cadherin表达明显升高(P<0.01);对照组及中药组细胞中JNK信号通路相关蛋白表达较模型组均明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论补肾益肺消癥方可抑制肺泡上皮细胞的间质转化,并通过减轻持续的内质网应激,抑制Ⅱ型肺泡上皮细胞的凋亡,达到延缓特发性肺纤维化病理进程的治疗作用。

补肾益肺消癥方对肺纤维化上皮间质转化中瘦素相关因子的影响

目的:明确肺纤维化上皮-间质转化(EMT)对瘦素相关因子的影响,对瘦素加速EMT的分子机制进行初探,并观察补肾益肺消癥方对EMT过程中瘦素相关因子的作用。方法:将A549细胞根据干预手段不同分为正常组、模型组[转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))]、中药组(TGF-β_(1)+补肾益肺消癥方)、尼达尼布组(TGF-β_(1)+尼达尼布),免疫荧光观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏附蛋白(E-cadherin)的表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清中的瘦素水平,Western Blotting检测瘦素受体(LEPR)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)的蛋白含量以及STAT3的活化程度。结果:与正常组比较,模型组细胞上清中瘦素水平升高(P<0.01),中药组、尼达尼布组出现不同程度的下降(P<0.001);与正常组比较,模型组LEPR蛋白表达升高(P<0.001),PPAR-γ表达下降(P<0.05),STAT3活化水平降低,中药组、尼达尼布组LEPR蛋白表达下调(P<0.001),PPAR-γ表达上调(P<0.05),中药组STAT3活化程度与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05),尼达尼布组与模型组比较,STAT3活化水平升高(P<0.01)。结论:EMT可促进细胞内源性肺瘦素的分泌,增加细胞表面LEPR的表达,下调与瘦素有拮抗作用的PPAR-γ的含量,减少STAT3的活化,为瘦素加速EMT进程提供物质基础。而补肾益肺消癥方则可能通过降低内源性肺瘦素分泌,减少LEPR,提高PPAR-γ的水平逆转此过程。

“辛以润之”辨治特发性肺纤维化

[目的]总结晏军主任“辛以润之”辨治特发性肺纤维化的临证经验。[方法]通过跟师学习,整理相关医案,归纳总结晏师对特发性肺纤维化病因病机的认识,阐述晏师运用补肾益肺消癥方治疗特发性肺纤维化的理论基础和临床用药经验,并附临床案例加以验证。[结果]晏师认为,特发性肺纤维化的病机为肺肾两虚,阴津不足,肺叶失养,而致肺痿;肺叶萎弱,宣降失司,气机壅滞,行水不能,痰饮内停,气滞血瘀,痰瘀内结,痹阻肺络而发肺痹,肺痹日久,功能失用,痿证加剧,肺痿肺痹相互影响、相互转化,其病理特点为气、血、痰互结。辛药能散能行,辛以入肺,辛通玄府,调气机,散血瘀,逐痰结,与特发性肺纤维化治则相合。晏师在临床中根据“辛以润之”创立补肾益肺消癥方,临床疗效良好。验案中特发性肺纤维化患者,辨证为肺肾两虚、痰瘀内蕴,以补肺益肾、化痰祛瘀法治之,方用补肾益肺消癥方加减,取得良好疗效。[结论]晏师运用“辛以润之”辨治特发性肺纤维化疗效显著,对临床具有较好的指导意义,值得学习和传承。

补肾益肺消癥方对肺纤维化大鼠IL-4信号通路关键分子表达的影响

目的:探讨补肾益肺消癥方治疗特发性肺纤维化疗效的作用机制。方法:以博莱霉素致大鼠肺纤维化(IPF)为动物模型,补肾益肺消癥方(当归、熟地黄、陈皮、法半夏、浙贝母、水蛭、炙甘草)进行干预;通过ELISA检测外周血血清中IL-4含量的差异,Real-time PCR检测肺组织中IL-4受体基因表达的改变,WesternBlot检测肺组织中信号传导子及转录激活子6(STAT6)蛋白含量的差异。结果:补肾益肺消癥方显著下调IPF大鼠外周血血清中IL-4的含量,尤以低剂量组明显(P<0.01);高、低剂量组可显著性增加IL-4受体基因的表达(P<0.05),对STAT6蛋白表达无影响。结论:补肾益肺消癥方可以通过下调IL-4的含量,干预IL-4信号传导通路关键分子的表达,缓解炎症反应,抑制肺组织纤维化进程,达到治疗效果,这可能是该方疗效的作用机制之一。

补肾益肺消癥方对肺纤维化大鼠T淋巴细胞亚群分化的影响

目的探讨补肾益肺消癥方对肺纤维化(IPF)大鼠外周血中T淋巴细胞亚群分化的影响及作用机制。方法通过博莱霉素致IPF模型,观察补肾益肺消癥方对IPF大鼠症状和体征的改变,通过流式细胞术检测CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+T淋巴细胞以及CD4+/CD8+T淋巴细胞比值的变化。结果补肾益肺消癥方可以明显改善IPF大鼠的症状和体征,治疗组与模型组对比体重明显增加,差异有极显著性(P<0.01)。阳性对照组T淋巴细胞总数显著下降,出现明显的免疫抑制作用;中药各剂量组可以明显地降低IPF大鼠的外周血中CD8+T淋巴细胞的含量,小剂量和大剂量组与模型组相比有极显著性差异(P<0.01);中剂量和大剂量组CD4+/CD8+T淋巴细胞比值相比模型组和空白组显著升高,差异有极显著性(P<0.01)。结论补肾益肺消癥方通过干预IPF患者T淋巴细胞亚群的分化,调控病变肺组织的免疫应答反应,进而延缓肺组织纤维化损伤的进程,达到治疗效果。

补肾益肺消癥方抑制肺成纤维细胞线粒体自噬与调控JNK/p62/Parkin通路机制的研究

目的:探究补肾益肺消癥方干预特发性肺间质纤维化(IPF)进展的可能机制,为“肺络微型癥瘕”理论在中医药防治IPF奠定客观基础。方法:通过TGF-β1诱导MRC-5细胞转分化肺成纤维细胞,制备补肾益肺消癥方冻干粉,激光共聚焦显微镜观察MRC-5细胞线粒体自噬体数量及状况,通过Western Blot法检测NOX4、JNK、p62、Parkin、PINK1蛋白的表达。结果:模型组在TGF-β1刺激后较正常细胞组线粒体自噬现象明显增多,而西药对照组及中药低、中、高浓度组线粒体自噬现象较模型组减少。与正常组比较,模型组TGF-β1可显著激活JNK/p62/Parkin信号通路,各给药组NOX4、JNK、p62表达显著降低(P<0.05),Parkin、PINK1表达显著升高(P<0.05),但中药中浓度组对于降低JNK的表达明显优于其他给药组(P<0.05)。结论:补肾益肺消癥方治疗IPF的机制之一可能是通过抑制细胞线粒体自噬功能与调控JNK/p62/Parkin通路减缓肺组织的纤维化进程。

补肾益肺消癥方对特发性肺纤维化大鼠Caspase-12信号通路关键分子基因和蛋白表达的影响

目的探讨补肾益肺消癥方干预特发性肺纤维化大鼠含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-12信号通路关键分子基因和蛋白表达的作用机制。方法以博莱霉素造大鼠肺纤维化模型。吡非尼酮作为阳性对照药物,补肾益肺消癥方分别于造模中(预防组)、造模后(治疗组)及实验全程(防治组)进行干预。Masson染色观察大鼠病变肺组织纤维化改变的程度,Western blot、Real-time PCR检测病变肺组织中Caspase-12信号通路相关分子基因与蛋白表达的改变。结果阳性对照组和中药各组肺泡结构轻度改变,有少量胶原纤维沉积,纤维化程度较模型组明显改善。模型组大鼠肺组织中Caspase-12通路基因及蛋白表达比正常组明显升高(P<0.05),阳性组及中药各组Caspase-12通路基因及蛋白表达较模型组明显降低(P<0.05或P<0.01),其中中药防治组效果更优。结论补肾益肺消癥方可以通过干预Caspase-12通路关键分子的表达,调控肺泡上皮细胞内质网应激反应,延缓和抑制特发性肺纤维化病理改变进程。

补肾益肺消癥方对肺纤维化大鼠肺组织病理及细胞超微结构改变的影响

目的:应用补肾益肺消癥方治疗肺纤维化大鼠,探讨该方治疗特发性肺纤维化对肺组织病理及肺泡上皮细胞超微结构改变的影响。方法:以博来霉素致肺纤维化大鼠模型,吡非尼酮为阳性药物,与补肾益肺消癥方于造模前、造模成功后和实验全程进行干预,病理组织切片HE染色、Masson染色观察病变肺组织的病理及纤维化改变,透射电镜观察肺泡上皮细胞超微结构的变化。结果:肺组织切片HE、Masson染色结果显示治疗组肺泡壁轻度增厚,胶原纤维较模型组减少,纤维化程度改善明显;透射电镜下显示治疗组胶原纤维沉积及电子致密物减少,内质网扩张及脱颗粒现象减轻。结论:补肾益肺消癥方可以延缓特发性肺纤维化病理改变的进程,恢复病变肺泡上皮细胞的功能达到治疗目的。

补肾益肺消癥方对TGF-β1诱导的A549细胞凋亡及Caspase12信号通路关键蛋白表达的影响

目的:观察补肾益肺消癥方对TGF-β1诱导A549细胞凋亡的影响及其对半胱天冬氨酸蛋白12(cysteme aspartate specific protease 12,Caspase12)信号通路中关键蛋白表达的影响。方法:通过CCK-8筛选两种浓度的中药冻干粉干预TGF-β1诱导的A549细胞,以TGF-β1抑制剂为阳性对照,流式细胞仪检测细胞凋亡,western-blot检测Caspase12信号通路中相关蛋白的表达情况。结果:模型组细胞凋亡率较正常组显著增高(P<0.01),对照组及中药组细胞凋亡率较模型组显著降低(P<0.01);模型组细胞中Caspase12通路相关蛋白表达较正常组显著增高(P<0.05或P<0.01);对照组及中药组Caspase12通路相关蛋白表达较模型组均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:补肾益肺消癥方可通过缓解Ⅱ型肺泡上皮细胞中持续的内质网应激及其诱导的Caspase12凋亡信号通路中关键蛋白的表达,减少Ⅱ型肺泡上皮细胞的凋亡,延缓肺纤维化的病理进程。