补肺清肝化瘀方对急性放射性肺炎大鼠巨噬细胞自噬活化的影响

目的观察补肺清肝化瘀方对急性放射性肺炎(ARP)大鼠巨噬细胞自噬活化的影响。方法采用X射线照射诱导ARP模型。检测大鼠体质量、肺系数;HE染色观察肺组织病理损伤;Masson染色观察胶原沉积情况;ELISA检测肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子-β(TGF-β)水平及肺组织丙二醛(MDA)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量;流式细胞检测M1(CD68+CD86)和M2(CD68+CD206+)巨噬细胞比值及活性氧(ROS)含量;Western blotting检测肺组织p62、LC3Ⅰ/Ⅱ蛋白表达;免疫荧光双染(标记LC3B和CD68)观察巨噬细胞自噬情况。结果与对照组相比,模型组体质量第9天开始下降(P<0.05),肺系数升高(P<0.001),肺组织病理损伤严重,胶原沉积增加(P<0.001),促炎细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α、ROS、MDA、8-OHdG(P<0.01或P<0.001)和p62水平增加,抗炎细胞因子IL-4、IL-10、TGF-β水平、LC3B/CD68共表达、M2/M1和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值降低(P<0.01或P<0.001)。补肺清肝化瘀方治疗后,大鼠体质量增加(P<0.05),肺系数降低(P<0.05),病理损伤有所改善,胶原沉积降低(P<0.001),促炎细胞因子水平下调,抗炎细胞因子水平上调,M2/M1比值增加(P<0.05),ROS、MDA和8-OHdG水平降低(P<0.05),p62蛋白表达、LC3B/CD68共表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值增加(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。结论补肺清肝化瘀方通过抑制M1极化,缓解氧化应激,激活ARP大鼠自噬。