基于TLR3补肾健脾方水提物抑制乙肝病毒复制机制研究

目的:通过pHBV1.3-pCR2.1质粒转染HepG2细胞探讨补肾健脾方水提物抑制乙肝病毒的免疫机制。方法:250μg/ml、500μg/ml补肾健脾方水提物干预pHBV1.3-pCR2.1质粒转染HepG2细胞,ELISA法检测细胞上清HBsAg、HBeAg含量;500μg/ml补肾健脾方水提物干预pHBV1.3-pCR2.1质粒转染HepG2细胞,Westen blot法检测Toll样受体3(TLR3)、p-IRF3蛋白表达,qRT-PCR法检测细胞内IFN-β mRNA表达;补肾健脾方干预HepG2细胞,pHBV1.3-pCR2.1质粒转染HepG2细胞,TLR13 siRNA下调TLR3表达,Westen blot法检测TLR3、p-IRF3蛋白表达,qRT-PCR法检测细胞内IFN-β mRNA表达。结果:500μg/ml补肾健脾方与空白对照组、250μg/ml补肾健脾方比较,HBsAg均明显下降(P<0.05,P<0.01);500μg/ml补肾健脾方与空白对照组、250μg/ml补肾健脾方比较,HBeAg均明显下降(P<0.05,P<0.01);补肾健脾方(500μg/ml)可以增强TLR3、p-IRF3蛋白表达,促进细胞内IFN-β mRNA表达(P<0.01);补肾健脾方干预pHBV1.3-pCR2.1质粒转染HepG2细胞,TLR3 siRNA抑制细胞TLR3蛋白表达,p-IRF3蛋白表达明显下降,同时细胞内IFN-β mRNA表达也明显下降(P<0.01)。结论:补肾健脾方水提物通过增强pHBV1.3-pCR2.1质粒转染HepG2细胞TLR3作用,促进细胞内IFN-β分泌,从而抑制乙型肝炎病毒的复制。