补肾安胎中药对着床障碍小鼠子宫VEGF和MMP_(-9)mRNA表达的影响

目的:研究补肾安胎中药对着床障碍小鼠子宫组织血管内皮生长因子(VEGF)和金属蛋白酶(MMP-9)mRNA表达的影响。方法:将受孕大鼠随机分为正常对照组、模型组、保胎灵片和坤元汤4组,从妊娠第1d开始,正常对照组和模型组每天灌胃生理盐水0.3mL,给药组用保胎灵和坤元汤灌胃0.3mL,连续灌胃6d,在第3和4天小鼠注射吲哚美辛油剂诱导着床障碍小鼠模型,在第6天末次给药后收集小鼠子宫组织,使用荧光定量RT-PCR技术检测小鼠子宫组织VEGF和MMP-9mRNA的表达。结果坤元汤明显提高了着床障碍小鼠子宫VEGF和MMP-9mRNA的表达。结论补肾安胎中药坤元汤可能通过调节VEGF和MMP-9mRNA的表达来促进胚胎着床。

补肾安胎冲剂含药血清对大鼠骨髓来源内皮祖细胞增殖、迁移能力的影响

目的观察不同浓度补肾安胎冲剂含药血清对大鼠骨髓来源内皮祖细胞(EPCs)增殖及迁移能力的影响。方法选取SPF级3~4周龄雌性SD大鼠,采用密度梯度离心法分离单个骨髓核细胞,收集培养7 d的细胞,分别通过双荧光染色法、免疫荧光法及流式细胞仪动态检测EPCs表面标志物等方法,鉴定分离培养的细胞为大鼠骨髓来源EPCs。制备补肾安胎冲剂含药血清,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度(5%,10%,15%,20%)补肾安胎冲剂含药血清作用不同时间(24,48,72 h)的大鼠骨髓来源EPCs的增殖率;通过Transwell法检测大鼠骨髓来源EPCs的迁移能力。结果经双荧光染色法鉴定,所培养细胞乙酰化低密度脂蛋白(Dil-AC-LDL)和异硫氰酸荧光素荆豆凝集素-1(FITC-UEA-1)双荧光染色呈双阳性;免疫荧光染色后,EPCs特异性表面抗原人白细胞分化抗原CD34、CD133及血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)染色均呈阳性,其阳性细胞率分别为94.7%,93.8%,98.8%,提示培养的细胞为EPCs。MTT比色法检测结果显示,经不同浓度的补肾安胎冲剂含药血清干预培养后,5%,10%,15%浓度含药血清可促进大鼠骨髓源性EPCs增殖,其中10%浓度含药血清作用48 h的细胞增殖率最高(50.34%);Transwell法检测结果显示,每高倍镜视野下对照组及含药血清组(10%)EPCs平均迁移细胞数分别为(51.0±7.94),(105.5±15.22)个,与对照组比较,含药血清组(10%)EPCs的迁移能力明显增强(P<0.01)。结论补肾安胎冲剂含药血清可增强大鼠骨髓源性EPCs的增殖及迁移能力,且10%浓度作用48 h EPCs的增殖率最高。