基于SOX9/NF⁃κB/MMP⁃13信号通路探讨补肾痹通方含药血清对IL⁃1β诱导软骨细胞凋亡的影响

目的:观察补肾痹通方(BSBT)含药血清对IL‐1β诱导软骨细胞凋亡的影响及可能作用机理。方法:第3代大鼠软骨细胞随机分为Control组、IL‐1β组、IL‐1β+BSBT(L)组、IL‐1β+BSBT(M)组、IL‐1β+BSBT(H)组(5%、10%、15%BSBT含药血清),分别干预24 h后采用CCK8法、流式细胞术分别检测细胞增殖情况和凋亡率;Western blot检测软骨细胞中B细胞淋巴瘤‐2(Bcl‐2)、Bcl‐2相关X蛋白(BAX)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase‐3)、性别决定区Y框蛋白9(SOX9)、磷酸化细胞核因子(NF‐κB p65)、基质金属蛋白酶13(MMP‐13)蛋白的表达水平;ELISA法检测软骨细胞培养上清中肿瘤坏死因子‐α(TNF‐α)、白细胞介素6(IL‐6)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)水平。结果:与Control组比较,IL‐1β组细胞增殖活性下降,细胞凋亡率上升,NF‐κB p65、MMP‐13蛋白水平和TNF‐α、IL‐6水平升高,SOX9蛋白水平和bFGF水平降低;与IL‐1β组比较,不同浓度的补肾痹通方含药血清组细胞增殖活性上升,细胞凋亡率降低,NF‐κB p65、MMP‐13蛋白水平和TNF‐α、IL‐6水平降低,SOX9蛋白水平和bFGF水平升高;与IL‐1β+BSBT(L)组比较,IL‐1β+BSBT(M)组和IL‐1β+BSBT(H)组细胞增殖活性上升,细胞凋亡率降低,NF‐κB p65、MMP‐13蛋白水平和TNF‐α、IL‐6水平降低,SOX9蛋白水平和bFGF水平升高。结论:补肾痹通方含药血清可能通过SOX9/NF‐κB/MMP‐13信号通路,促进IL‐1β诱导的软骨细胞增殖,减少细胞凋亡,改善软骨细胞微环境,促进软骨修复。

补肾痹通方联合骨髓间充质干细胞对损伤软骨细胞的保护机制及SOX9、MMP-13表达的影响

目的:探讨补肾痹通方(BSBT)联合骨髓间充质干细胞(BMSCs)对白介素(IL)-1β诱导的损伤软骨细胞的保护机制及性别决定区Y框蛋白9(SOX9)、基质金属蛋白酶13(MMP-13)表达的影响。方法:使用10 ng/ml的IL-1β建立损伤软骨细胞模型,实验分为对照组、模型组(IL-1β)、中药组(IL-1β+BSBT)、干细胞组(IL-1β+BMSCs)和联合组(IL-1β+BSBT+BMSCs);CCK-8法检测各组软骨细胞增殖情况;RT-qPCR法和Western blot法分别检测软骨细胞内SOX9、MMP-13、Ⅱ型胶原α1重组蛋白(COL2A1)、IL-10的基因和蛋白表达;ELISA检测各组细胞培养上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6、胰岛素样生长因子1(IGF-1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的水平。结果:与模型组比较,各组软骨细胞活性显著增强(P<0.01),软骨细胞中的SOX9、COL2A1、IL-10的基因和蛋白水平显著升高(P<0.01),MMP-13的基因和蛋白水平明显降低(P<0.01),软骨细胞培养上清中TNF-α、IL-6的含量显著降低(P<0.01),IGF-1、bFGF的水平升高(P<0.01),其中联合组变化最明显(P<0.05)。结论:BSBT联合BMSCs可有效保护损伤软骨细胞,其机制可能是通过上调SOX9,下调MMP-13,抑制炎症,改善软骨细胞微环境,促进关节软骨的修复与再生。

基于网络药理学和实验验证探讨补肾痹通方治疗膝骨关节炎的作用机制

目的运用网络药理学和实验验证探讨补肾痹通方治疗膝骨关节炎(KOA)的作用机制。方法运用中药系统药理学数据库与分析平台获取补肾痹通方的有效成分与作用靶点,运用GeneCards、OMIM、PharmGkb、TTD、DrugBank数据库检索KOA疾病相关靶点,将药物和疾病靶点取交集,将获得的有效成分及相关靶点导入Cytoscape软件,绘制“补肾痹通方-有效成分-KOA作用靶点”的网络图,筛选关键有效成分,将潜在靶点导入STRING数据库绘制蛋白质-蛋白质相互作用网络图。筛选补肾痹通方治疗KOA的核心靶点,进行GO富集与KEGG注释分析。选取人软骨细胞设置对照组、损伤组、给药组,对照组正常培养,损伤组和给药组在含白细胞介素(IL)-1β(10 ng/ml)DMEM/F12培养基中培养,给药组给予0.4447μg/ml补肾痹通方药液。培养24 h后,观察三组细胞形态,采用酶联免疫吸附试验检测炎症因子水平,qRT-PCR与免疫印迹法检测三组软骨修复因子的表达。结果共筛选出补肾痹通方有效成分186个,主要为槲皮素、木犀草素、山柰酚等,主要通过TNF、MMP1、CXCL2、IL1B等关键靶点和PI3K/Akt、T细胞受体、Toll样受体、低氧诱导因子-1、TNF、IL-17等信号通路发挥作用,涉及氧化应激反应、细胞凋亡、炎症反应等生物过程。显微镜下可见,损伤组细胞数量减少,给药组细胞数量增加。损伤组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、IL-6水平高于对照组,转化生长因子-β(TGF-β)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、碱性成纤维细胞生长因子(BFGF)水平及SOX9、COL2A1基因和蛋白的表达水平均低于对照组(P<0.05)。给药组TNF-α、IL-1β、IL-6水平低于损伤组,TGF-β、IGF-1、BFGF及SOX9、COL2A1基因和蛋白的表达水平均高于损伤组(P<0.05)。结论补肾痹通方可能通过缓解炎症细胞浸润并参与SOX9、COL2A1调控来促进损伤软骨细胞修复。

补肾痹通方治疗膝骨性关节炎患者的临床疗效观察及对血清炎性、生长因子的影响

目的观察补肾痹通方治疗肾虚血瘀型膝骨性关节炎患者的临床疗效及对患者血清中炎性因子TNF-α、IL-6及生长因子IGF-1水平的影响。方法研究选自2021年1月~2021年6月期间,就诊于新疆医科大学附属中医医院关节外科门诊的膝骨性关节炎患者共计120例,依照随机数字表法分成补肾痹通方组(60例)和基础治疗组(60例)。基础治疗组给予依托考昔片口服,补肾痹通方组为补肾痹通方联合依托考昔片口服,4周为1个临床治疗持续周期。评价并分析对比临床治疗前后两组患者的临床实际疗效、HSS评分、Michel Lequesen指数、VAS评分、WOMAC指数以及血清中炎性因子TNF-α、IL-6和生长因子IGF-1的水平差异。结果临床疗效总有效率:补肾痹通方组为91.66%,远远优于基础治疗组的76.67%(P<0.05);HSS评分:补肾痹通方组治疗后高于本组治疗前,且高于基础治疗组治疗后(P<0.05);Michel Lequesen指数、VAS评分、WOMAC指数:补肾痹通方组治疗后较本组治疗前明显下降,且较基础治疗组治疗后下降也为明显(P<0.05);经治疗后,两组患者血清中炎性因子TNF-α、IL-6数值均较治疗前明显降低(P<0.05),且补肾痹通方组降低程度较基础治疗组更为明显(P<0.05),而生长IGF-1方面,两组数值均较治疗前有所升高(P<0.05),且补肾痹通方组升高幅度大于基础治疗组(P<0.05)。结论补肾痹通方对于肾虚血瘀型膝骨性关节炎患者的临床疗效良好,相比单纯使用抗炎镇痛药物,中西药联合治疗的方式,不仅可以有效改善KOA患者的关节疼痛不适症状,提高患者膝关节运动功能,更重要能有效降低关节炎症因子产生水平,促进生长因子代谢,有利于关节软骨的自我修复,从而可以达到大大提高KOA患者日常运动和生活休息质量的治疗目的。

补肾祛瘀通痹方治疗膝关节骨性关节炎临床疗效及与股四头肌电信号的相关性研究

目的:观察补肾祛瘀通痹方治疗膝骨关节炎临床疗效及与股四头肌表面肌电信号相关性。方法:符合纳入标准膝骨关节炎患者80例,随机分为研究组及对照组,研究组给予补肾祛瘀通痹方口服,对照组给予盐酸氨基葡萄糖和双氯酚酸钠缓释片口服,观察4周。治疗结束后对患者进行临床疗效评价,评定治疗前后关节炎指数评分,比较两组患者治疗前后股四头肌积分肌电值与中位频率的变化情况。结果:研究组(92.50%,37/40)与对照组(77.50%,31/40)比较临床疗效显著,有显著性差异(P<0.05);研究组关节炎指数评分明显低于对照组,两者之间比较有显著性差异(P<0.05);研究组患侧股外侧肌、股内侧肌和股直肌的平均肌电值(AEMG)与对照组比较有显著性差异(P<0.05),中位频率(MF)明显高于对照组(P<0.05)。结论:补肾祛瘀通痹方治疗膝关节骨性关节炎临床疗效显著,能明显改善AEMG和MF,值得在临床上进一步推广。

补肾祛瘀通痹方联合盐酸氨基葡萄糖治疗膝关节骨性关节炎疗效观察

目的:观察补肾祛瘀通痹方联合盐酸氨基葡萄糖治疗膝关节骨性关节炎(KOA)的疗效。方法:80例随机分为西药组和中西结合组各40例,两组均给予康复训练联合盐酸氨基葡萄糖治疗,中西结合组加用补肾祛瘀通痹方治疗,观察两组临床疗效。结果:总有效率中西结合组和西药组分别为90.00%和62.50%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。Lequesne评分中西结合组和西药组分别(3.46±0.86)分和(4.72±1.05)分,两组比较差异有统计学意义(P<0.05),VAS评分中西结合组和西药组分别为(1.94±1.05)分和(3.43±0.98)分,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。血清MMP-3中西结合组和西药组分别为(7.32±1.21)μg/m L和(13.54±1.67)μg/m L,两组比较差异有统计学意义(P<0.05),IL-1β中西结合组和西药组分别为(67.48±19.84)pg/m L和(135.45±20.21)pg/m L,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);IL-6中西结合组和西药组分别为(10.64±3.75)pg/m L和(21.58±4.18)pg/m L,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。不良反应中西结合组和西药组分别为5.0%和7.50%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾祛瘀通痹方联合盐酸氨基葡萄糖治疗膝关节骨性关节炎安全有效。

补肾通痹方结合中医骨伤手法治疗腰椎间盘突出症临床观察

目的:观察补肾通痹方结合中医骨伤手法治疗腰椎间盘突出症的临床疗效。方法:74例随机分为对照组和观察组各37例。两组均采取中医骨伤手法治疗,观察组加用补肾通痹方。结果:观察组总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后观察组腰背疼痛、腰膝酸软、神疲乏力证候积分均低于对照组(P<0.05),血清TNF-α、IL-6水平及VAS评分均低于对照组(P<0.05),JOA各项内容评分高于对照组(P<0.05)。结论:补肾通痹方结合中医骨伤手法治疗腰椎间盘突出症效果较好。

补肾祛瘀通痹方治疗膝关节骨性关节炎的研究

目的研究补肾祛瘀通痹方治疗膝关节骨性关节炎的疗效及与股四头肌表面肌电信号的相关性。方法选择我院2015年11月—2017年4月收治的80例膝关节骨性关节炎患者,按照随机数字表法分为对照组(40例)和观察组(40例),对照组给予盐酸氨基葡萄糖片,观察组给予补肾祛瘀通痹方,比较两组患者治疗效果、股四头肌表面肌电(s EMG)信号[骨内斜肌(VMO)与骨外斜肌(VL)的积分肌电值(IEMG)和中位频率(MF)]变化及不良反应。结果观察组患者治疗有效率92.50%高于对照组72.50%(P<0.05);观察组患者治疗后较治疗前VL、VMO的IEMG与MF增强幅度显著大于对照组(P<0.05);两组患者无明显不良反应。结论补肾祛瘀通痹方治疗膝关节骨性关节炎的疗效显著,对股四头肌表面肌电活动有促进作用,能提高VMO与VL的肌力及耐疲劳性,增强信号。

补肾通痹化纤方治疗特发性肺间质纤维化临床研究

目的:观察补肾通痹化纤方治疗特发性肺间质纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)的临床疗效。方法:将90例IPF患者随机分为对照组和试验组各45例,对照组给予乙酰半胱氨酸片治疗,试验组在对照组治疗的基础上加用补肾通痹化纤方治疗,日1剂,水冲服。两组患者均以30 d为1个疗程,共治疗3个疗程。观察两组患者临床疗效、肺功能指标、血液流变学指标、6分钟步行距离、圣乔治呼吸问卷(stgeorge′s respiratory questionnaire,SGRQ)评分变化情况。结果:对照组有效率为53.33%,试验组有效率为68.89%,两组有效率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后一秒用力呼气容积(forced expiratory volume in one second,FEV1)、最大肺活量(maximum vital capacity,FVC)、呼气流量峰值(peak expiratory flow,PEF)水平与治疗前比较,差异无统计学意义(P>0.05),组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。对照组治疗后全血高切黏度、全血低切黏度、血浆黏度与治疗前比较,差异无统计学意义(P>0.05),试验组治疗后与治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.05),组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗后SGRQ评分、6分钟步行距离与治疗前比较均明显改善(P<0.05),且试验组改善程度明显优于对照组,具有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾通痹化纤方可以改善IPF患者临床症状、SGRQ评分、6分钟步行距离及血液流变学指标,但对肺功能改善不明显。

自拟散寒通痹补肾方配合足浴治疗类风湿关节炎的疗效及生存质量的临床研究

目的:研究在类风湿关节炎治疗中应用自拟散寒通痹补肾方配合足浴的临床疗效及生存质量。方法:选取在我院接受治疗的240例类风湿关节炎患者作为研究对象,根据治疗方法的不同分为中药组、西药组和中西结合组,每组80例。中药组采用自拟散寒通痹补肾方配合足浴进行治疗,西药组采用西乐葆+甲氨喋呤进行治疗,中西结合组采用自拟散寒通痹补肾方配合足浴结合西乐葆+甲氨喋呤进行治疗,对三组临床疗效及生存质量进行分析。结果:中西结合组的疗效优于中药组,中药组的疗效优于西药组,且两两相比,组间差异具有统计学意义(P<0.05)。通过对三组生存质量进行分析发现,中西结合组的疗效优于中药组,中药组的疗效优于西药组,且两两相比,组间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:通过研究发现,中药、西药和中西结合这三种疗法对类风湿关节炎均具有一定的疗效,中西结合的临床疗效最优,且有效改善生存质量。

补肾通痹方结合中医骨伤手法治疗腰椎间盘突出症临床观察

关于腰椎间盘突出症的问题分析是否能够在补肾通痹方与中医骨伤手法结合的情况下起到治疗效果。方法:参与本次分析研究的患者一共有74位,这74位患者都是在2020年5月-2021年5月在我院接受治疗腰椎间盘突出症的病人。为了让实验的结果更加的具有可参照性,本次实验决定采取的研究方案为对比性研究,首先将这74名患者分成两组,分组的时候以一般资料为依据,分组数量为均分,其中第一组的治疗方案是单独使用中医骨伤手法,这种唤名为对照组;另外一组则应用的是本次研究的补肾通痹方法通中医骨伤手法结合的观察组。结果 在经过一系列的治疗后,发现观察组的各方面的数值都要比对照组优异,但是两组在病情的改善方面都得到了改变,但是观察组的改善更加的明显。结论:实验证明在治疗腰椎间盘突出症方面只有补肾通痹方结合中医骨伤手法的效果更好。