补肾降浊饮及其拆方改善非酒精性脂肪肝大鼠胰岛素抵抗的机制研究

目的:研究补肾降浊饮及其拆方对非酒精性脂肪性肝炎(Nonalcoholic Steatohepatitis,NASH)大鼠胰岛素抵抗(Insulin Resistance,IR)的影响,探讨补肾降浊饮及其拆方对胰岛素信号通路相关细胞因子及激酶的影响。方法:将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、补肾组、降浊组、补肾降浊饮组及西药组,正常组予普通饲料喂养,其余各组予高脂饲料喂养并分别灌胃生理盐水或相应剂量药物干预。12周后检测对比各组大鼠血清胆固醇(Total Cholesterol,TC)、三酰甘油(Triglyceride,TG)、丙氨酸氨基转移酶(Alanine Aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(Aspartate Aminotransferase,AST)、空腹血糖(Glucose,GLU)、胰岛素(Insulin,INS)水平、胰岛素抵抗指数(Insulin Resistance Index,IRI)、胰岛素敏感指数(Insulin Sensitivity Index,ISI)水平及血清脂联素(Adiponectin,ADP)、瘦素(Leptin,LEP)、肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)-α、白细胞介素(Interleukin,IL)-6水平;油红O染色检测肝组织脂肪变性程度,糖原染色检测肝组织糖原含量;Western-blot法检测肝组织中c-Jun氨基端激酶1(c-Jun N-terminal Kinase 1,JNK1)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(Phospho-c-Jun N-terminal Kinase,p-JNK)及胰岛素受体α(Insulin Receptor alpha,IRα)、磷酸化胰岛素受体底物1(Phospho-insulin Receptor Substrate-1,p-IRS-1)表达水平。结果:中药各组均可不同程度改善大鼠血清中TC、TG、ALT、AST及GLU、INS、IRI、ISI水平(P<0.05,P<0.01),亦能不同程度影响血清ADP、LEP、TNF-α、IL-6含量及肝组织JNK1、p-JNK、IRα及p-IRS-1表达水平(P<0.05,P<0.01)。中药各组在改善GLU、INS、IRI、ISI及p-IRS-1方面均优于西药组(P<0.05,P<0.01);其中补肾组在改善TC、TG、ADP、LEP方面优于西药组(P<0.05,P<0.01);降浊组在改善ALT、AST、TNF-α、IL-6方面优于西药组(P<0.05,P<0.01);补肾降浊饮组在各方面均优于西药组(P<0.01)。结论:补肾降浊饮可明显改善NASH大鼠IR,其中补肾组分别通过调节脂肪细胞因子ADP、LEP水平,降浊组分别通过调整炎性因子TNF-α、IL-6、JNK1、p-JNK水平,共同增强胰岛素受体底物活性,进而改善胰岛素信号转导。

基于肠道菌群及磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶/核因子-κB信号通路探讨补肾降浊饮对非酒精性脂肪性肝炎大鼠的作用机制

目的:研究补肾降浊饮对非酒精性脂肪性肝炎(Non-alcoholic Steatohepatitis,NASH)大鼠肠道菌群及磷脂酰肌醇-3-激酶(Phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(RAC-alpha Serine/Threonine-protein Kinase,Akt)/核因子-κB(Nuclear Factor-κB,NF-κB)信号通路的影响,探讨补肾降浊饮改善NASH的机制。方法:将40只SD大鼠随机分为空白组、模型组、补肾降浊饮组及西药组。空白组予普通饲料喂养,其余各组给予高脂饲料喂养,并分别灌胃生理盐水或相应药物干预。12周后检测各组大鼠血清胆固醇(Total Cholesterol,TC)、三酰甘油(Triglyceride,TG)、谷丙转氨酶(Alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(Aspartate aminotransferase,AST)及肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)水平;油红O染色检测肝组织脂肪变性程度;RT-PCR法检测粪便中大肠杆菌、乳酸杆菌含量;Western-blot法检测肝组织中PI3K、Akt、NF-κB表达水平。结果:各药物组均可不同程度改善大鼠血清中TC、TG、ALT、AST、TNF-α、IL-6含量及肝组织PI3K、Akt、NF-κB表达水平(P<0.05,P<0.01);补肾降浊饮组虽在改善ALT、AST及TNF-α、IL-6含量及Akt蛋白表达方面与西药组无明显差异,但在改善TC、TG、油红O染色、肠道菌群及PI3K、NF-κB方面优于西药组。结论:补肾降浊饮改善NASH机制可能与调节肠道菌群进而影响PI3K/Akt/NF-κB信号通路传导以减少TNF-α、IL-6等炎性因子的产生有关。

补肾降浊饮对非酒精性脂肪肝大鼠胰岛素抵抗的影响

目的：研究补肾降浊饮对非酒精性脂肪肝（NAFLD）大鼠胰岛素抵抗（IR）的干预作用,探讨其对胰岛素信号通路中细胞因子及激酶等的影响。方法：将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、补肾降浊饮低、中、高剂量组（10,15,20 g·kg^-1）及水飞蓟宾葡甲胺组（19 g·kg^-1）,正常组予普通饲料喂养,其余各组予高脂饲料喂养并同时灌胃生理盐水或相应剂量药物干预。12周后检测各组大鼠血清总胆固醇（TC）,甘油三酯（TG）,丙氨酸氨基转移酶（ALT）,天门冬氨酸氨基转氨酶（AST）,空腹血糖（FBG）,胰岛素（INS）水平,胰岛素抵抗指数（IRI）,胰岛素敏感指数（ISI）及肝组织中脂联素（ADP）,游离脂肪酸（FFA）,肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,超氧化物歧化酶（SOD）,丙二醛（MDA）含量;苏木素-伊红（HE）染色、油红O染色检测肝组织脂肪变性程度;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠肝组织中c-Jun氨基端激酶1（JNK1）,磷酸化c-Jun氨基端激酶（p-JNK）及胰岛素受体α（IRα）,磷酸化胰岛素受体底物1丝氨酸307位点（p-IRS-1）表达水平。结果：与正常组比较,模型组大鼠TG,TC,ALT,AST,FBG,INS,IRI,TNF-α,FFA,MDA水平及JNK1,p-JNK及p-IRS-1蛋白表达显著升高,ISI,ADP,SOD水平显著降低（P〈0.01）;与模型组比较,补肾降浊饮低、中、高剂量组可不同程度降低大鼠血清中TG,TC,ALT,AST,FBG,INS,IRI,TNF-α,FFA,MDA水平及JNK1,p-JNK及p-IRS-1蛋白表达（P〈0.05,P〈0.01）,升高ISI,ADP,SOD水平（P〈0.05,P〈0.01）;相较于水飞蓟宾葡甲胺组,补肾降浊饮高剂量组疗效显著（P〈0.01）。结论：补肾降浊饮可改善非酒精性脂肪肝大鼠胰岛素抵抗,其机制可能与提高ADP含量,减轻氧化应激,抑制JNK信号通路进而增强胰岛素受体底物活性有关。