补骨脂素加长波紫外线对人白血病细胞株NB4、HL-60、K562作用的研究

目的探讨补骨脂素(PSO)加长波紫外线(UVA)光化学疗法对人白血病细胞株NB4、HL-60、K562的作用。方法以NB4、HL-60、K562细胞株为研究对象,以细胞抑制率、凋亡率及在电镜下细胞超微结构改变为检测指标,观察PSO加波长360nm的UVA对人白血病细胞株的影响,并分析各因素间的交互作用。结果当PSO浓度均为80μg/ml,UVA照射时间分别为10min、15min和15min时,NB4、HL-60、和K562细胞的抑制率分别达峰值;当PSO浓度分别为40μg/ml、80μg/ml和80μg/ml,UVA照射时间为10min、15min和15min时,NB4、HL-60和K562细胞的凋亡率达峰值。不同PSO浓度、不同UVA照射时间对不同白血病细胞株的抑制率、凋亡率的差异有统计学意义,且各因素之间有交互作用。电镜下观察经PSO和UVA处理后的NB4、HL-60及K562细胞超微结构,均可见明显的凋亡形态学改变。结论PSO加UVA(PUVA)可抑制白血病细胞株NB4、HL-60、K562的生长,并可诱导其凋亡。浓度为40～80μg/mlPSO与波长为360nm的UVA照射10～15min是PUVA抗NB4、HL-60、K562白血病细胞的最佳作用点。

补骨脂素加长波紫外线对NB_4,K_(562)白血病细胞株的作用

目的:探讨补骨脂素(PSO)加长波紫外线(UVA)对NB4,K562白血病细胞株的作用.方法:以NB4,K562细胞株为研究对象,观察中药补骨脂中提取的PSO加波长为360nm的UVA对人白血病细胞株的作用;采用析因设计,观察不同浓度的PSO、不同照射时间的UVA对不同白血病细胞株抑制率、凋亡率的影响以及各因素间的交互作用.结果:①当PSO浓度为80mg/L,UVA照射时间为15min时,NB4细胞的抑制率达峰值;当PSO浓度为80mg/L,UVA照射时间为10min时,K562细胞的抑制率达峰值.②当PSO浓度为40mg/L,UVA照射时间为10min时,NB4细胞的凋亡率达峰值;当PSO浓度为80mg/L,UVA照射时间为15min时,K562细胞的凋亡率达峰值.③不同UVA照射时间、不同PSO浓度对不同白血病细胞株的抑制率、凋亡率的差异有统计学意义,且各因素之间有交互作用.结论:①PSO加UVA(PUVA)可抑制NB4,K562白血病细胞株的生长,并可诱导其凋亡.②40～80mg/LPSO与波长为360nm的UVA照射10～15min是PUVA抗NB4,K562白血病细胞的最佳作用点.

PUVA疗法源植物补骨脂化学成分与药理活性

牛皮癣、白癜风等仍然是困扰人类健康的重大疾病，目前临床上有效的药物并不多见。1974年被美国FDA批注的补骨脂素光化学疗法（PUVA）也逐步在欧洲（如法国、德国、英国）得到注册认可，由于其疗效确切，相对其他治疗皮肤顽症的治疗方法，其毒副作用也相对较小，正逐渐成为治疗皮肤顽症的一线疗法，特别适合于中、重度牛皮癣患者与各种白癜风患者。

一种新型补骨脂素衍生物BSP-1诱导B16细胞中黑色素合成的作用机制

8-甲氧基补骨脂素(8-MOP)和5-甲氧基补骨脂素(5-MOP)等补骨脂素类药物在临床上常用于治疗白癜风,但同时具有诸多副作用。因此,发掘作用更强、毒性更小的补骨脂素类化合物用以治疗白癜风成为研究热点。在我们的前期研究中,本课题组设计合成了一系列结构新颖的补骨脂素席夫碱衍生物,并评价了它们的抗白癜风活性。本论文选取了其中一个补骨脂素席夫碱衍生物(BSP-1),研究了它对小鼠B16细胞中黑色素合成的作用及其信号通路。利用CCK法、L-Dopa氧化法、NaOH溶解法及Western印迹法分别分析BSP-1对细胞增殖、黑色素含量、酪氨酸酶(TYR)活性及相关蛋白表达的影响。结果显示,BSP-1能够促进B16细胞内黑色素生成和TYR活性,上调TYR、TRP-1、TRP-2和MITF的蛋白表达,并呈浓度依赖性。机制研究发现,BSP-1通过提高Akt和GSK-3β的磷酸化水平,上调细胞核中β-联蛋白的含量,最终使得小眼相关转录因子(MITF)的蛋白表达增加。综上所述,本研究提示BSP-1可通过调节Wnt/β-联蛋白信号通路来促进B16细胞内的黑色素合成。

花椒毒素在人体皮肤及角质层中的渗透动力学探讨

目的探讨花椒毒素在人体完整皮肤及其角质层中的渗透动力学特性。方法采用人体离体皮肤及从完整皮肤中分离出的角质层,在Franz-cell扩散池中进行不同浓度的花椒毒素乙醇溶液(0.1,0.5,2.5和5.0 mg.mL-1)的渗透实验,均采用1.4%的人血清溶液作为接收液,用HPLC法测定各接收液的药物量和皮肤中的贮存药物量。结果花椒毒素乙醇溶液单位面积透过完整人皮肤速率随着浓度增加而增加,2.5 mg.mL-1以上的浓度对其速率几乎无影响。在角质层中也存在同样的现象,但其单位面积透皮速率最大值提前了约6 h。而且随着给药浓度的增加,24 h后完整皮肤和角质层的药物贮存量也相应增加,但达到一定浓度后存在饱和现象。且花椒毒素乙醇溶液在完整皮肤中的透皮时滞(0.82 h)明显大于在角质层中的透皮时滞(0.47 h)。结论该结果对开发花椒毒素外用制剂时浓度的选择提供了依据,并对其外用药物后照射长波段紫外光(UVA)的时间提供了参考。