食物过敏原表位定位技术的研究进展

表位是过敏原的物质基础,表位定位技术是过敏原表位研究的工具,包括表位定位和表位预测两种。新的表位定位技术主要包括噬菌体展示技术、质谱技术、表面等离子共振技术、蛋白芯片技术、核磁共振技术。相比于传统的过敏原表位定位技术,新的表位定位技术在灵敏度、准确性和快速等方面具有优势。表位预测是运用生物信息学方法对过敏原表位进行预测。本文将对新的表位定位技术在表位定位中的应用、表位预测以及相关应用进展进行阐述。

水牛奶中β-乳球蛋白过敏原表位定位的初步研究

为绘制水牛奶中β-乳球蛋白的过敏原表位,本实验以兔抗水牛乳β-乳球蛋白的抗体IgG为固相筛选分子,免疫筛选噬菌体随机七肽库,采用间接ELISA和竞争抑制ELISA鉴定阳性克隆。经四轮富集后,得到16个阳性克隆子,进行测序,得到5个不同的肽段。与已知的表位比对,初步确定了六个IgG识别表位,分别为:第41～51位(VYVEELKPIPE)、第51～64位(EGDLEILLQKWENDE)、第81～96位(VFKIDALNE NKVLVLD)、第141～56位(KALPMHIRLSFNPTQL)、第127～136位(LNENKVLVLD)和第145～159位(MHIRLSFNPTQLEEQ)。

食物致敏原表位定位技术的研究进展

食物致敏原是引起食物过敏的元凶,多为蛋白质。抗原表位是在抗原分子中与抗体反应或被抗原受体识别,并引发机体免疫应答的特殊化学基团。从表位水平认识食物致敏原,能揭示食物过敏的物质基础,为解决食物过敏问题提供精准的靶标。本文基于表位结构和定位方法的不同,介绍了食物致敏原表位定位技术的发展,并进一步展望了致敏原表位信息对于改进食物过敏鉴定技术和低致敏食物加工方法的应用前景。

小麦非麸质致敏原α-淀粉酶抑制剂的表位定位及消减技术

为研究小麦非麸质致敏原α-淀粉酶抑制剂的表位定位及消减技术,通过生物信息学预测工具DNAstar、IMED、IEDB对其线性表位进行预测,综合分析得出6条候选表位,利用间接竞争酶联免疫吸附实验对表位进行验证,得到4条线性表位。利用多酚与致敏原互作消减致敏,采用非共价方法制得α-淀粉酶抑制剂-表没子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)/表没食子酸儿茶素复合物,通过荧光光谱、圆二色谱、紫外光谱进行表征,利用间接竞争酶联免疫吸附实验对消减效果进行研究,结果表明α-淀粉酶抑制剂与EGCG物质的量比为1∶30时,复合物的IgE结合水平达到最低,结合能力下降22.7%。通过Autodock软件进行分子对接模拟,经与表位进行比对,发现EGCG可与α-淀粉酶抑制剂线性表位及其附近残基相互作用从而达到致敏性消减的效果。研究结果可为小麦非麸质致敏原表位定位及低敏互作物的制备提供参考。

T细胞抗原表位定位分析与疫苗研发——美国德州大学钱建飞博士在江苏介绍免疫学前沿技术

2011年4月16～17日，应中国农业科学院家禽研究所、江苏省农业科学院兽医研究所等单位邀请，美国德州大学癌症研究中心实验室主任钱建飞博士就“T细胞抗原表位定位分析与疫苗研发（T—cell EpitopeMapping and Vaccine Development）”为主题，与江苏省内畜牧兽医界的部分科研人员进行了交流。

编码口蹄疫病毒B和T细胞表位定位到猪白细胞抗原经典Ⅱ类分子的DNA疫苗在攻毒后对猪只起到保护作用

研发有效安全的口蹄疫病毒疫苗是非常重要的。以前我们实验室的研究证实DNA疫苗编码C型口蹄疫病毒（FMDV）的B和T细胞表位，能有效控制病毒在小鼠中复制，然而在猪身上却没有保护作用。

B细胞表位定位的研究进展

B细胞抗原表位的研究对免疫原性多肽和新型疫苗分子的设计都起着指导作用,同时也有利于诊断试剂的开发以及临床疾病的诊断。本文综述了近年来实验确定和理论预测B细胞蛋白质抗原表位的常用方法,以及B细胞抗原表位分析的研究方法。

应用噬菌体肽库技术定位沙门氏菌鞭毛蛋白上属特异性共同抗原表位

用生物素标记的沙门氏菌属特异性单克隆抗体de7作为分子探针 ,应用亲和筛选法从噬菌体肽库中筛选该单抗所针对的表位克隆 ,最终进行定位。经三轮筛选后 ,用斑点印迹法检测 ,得到良好的富集效果。通过免疫筛选法从第三轮筛选物中挑取了 2 4个阳性克隆 ,再以斑点印迹、竞争ELISA进一步鉴定阳性克隆 ,证实已获得了沙门氏菌鞭毛属特异性共同抗原的模拟表位。测得的序列为SRRSFTTTE ,将其与沙门氏菌鞭毛蛋白氨基酸序列相比较 ,同源性较小 ,但在不同血清型沙门氏菌鞭毛蛋白氨基酸序列的Ⅰ区高度保守序列中 ,发现 6 1 6 5位氨基酸的RSXXT序列与所得的线性表位有相同的排列 ,而大肠杆菌鞭毛蛋白氨基酸在此段的序列为RAXXT ,且这种序列排列的几率为 1/2 0 5,因此推断该单抗所针对的表位在该区段上。此外 ,以阳性克隆免疫Balb/c小鼠 ,并制备高免血清进行间接荧光检测和竞争ELISA鉴定 ,结果表明其具有优良的免疫原性和高度的特异性 ,这亦为模拟表位疫苗的研究提供了新思路。

牛奶过敏原表位研究进展

详细地综述了牛乳酪蛋白、α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、牛血清白蛋白的过敏原B细胞表位以及T细胞表位的研究进展,介绍了牛乳过敏原之间构象性表位的相似形以及线性表位序列位置的特异性,同时也简述了牛乳过敏原表位定位的方法及表位定位的应用。

肾上腺疾病

0036295 Addison 病及其它内分泌系统自身免疫病中一种构型依赖表位定位于人类固醇21-羟化酶的羧基端功能结构域/Nikoshkov A//J Immunol.-1999,162(4).-2422～2426 四军大0036296 库兴氏病中垂体外蝶鞍旁的微小腺瘤/Pluta R M//J Clin Endoc Metab.-1999,84(8).-2912～2923