浅谈人脂蛋白相关磷脂酶A2(LP-PLA2)表位肽的设计与鉴定

目的 :探讨人脂蛋白相关磷脂酶A2(LP-PLA2)表位肽的设计与鉴定方法。方法 :采用多参数生物信息学共同分析的方法对人LPPLA2进行表位设计,通过直接化学合成表位标签蛋白获得表位肽,用亲和纯级抗LP-PLA2重组蛋白多克隆抗体对合成的表位标签蛋白进行鉴定。结果:采用多参数生物信息学共同分析的方法成功设计并合成了人LP-PLA2的6段线性表位肽(P1～P6)。对这6段线性表位肽采用亲和纯级抗重组LPPLA2多克隆抗体进行鉴定的结果显示,其均能与多克隆抗体发生反应。在这6段线性表位肽中,有3段表位肽的效价具有较高的滴度。结论 :采用多参数生物信息学的方法能成功地分析出LP-PLA2潜在的线性表位,通过直接化学合成可快速地得到相应的表位标签蛋白,从而为LP-PLA2单克隆抗体的制备提供更多的免疫原选择,并为LP-PLA2检测试剂盒的研发提供更为快捷的筛选途径。

含preS2免疫表位的HBsAg基因质粒的构建及表达

目的 :应用表位设计构建高效表达乙型肝炎表面抗原含preS2免疫表位基因的真核表达质粒。方法 :PCR法从慢性乙型肝炎患者血清中扩增和分离preS2 12 0 - 146表位和S基因片段 ,将两者融合并置于载体pcDNA3 1的巨细胞病 (CMV)启动子作用之下 ,构建真核表达质粒pcDNA -S2S。序列分析和脂质体转染COS - 7细胞瞬时表达鉴定。结果 :序列测定结果表明插入序列与乙型肝炎病毒中国株全基因参照序列 (adr亚型 )一致。COS - 7细胞瞬时表达鉴定实验中 ,ELISA检测到preS2 -Ag和HBsAg的OD450 分别为 0 4 6 9和 0 4 2 6。结论 :应用表位设计成功地构建了含preS2免疫表位基因的重组质粒pcDNA -S2S所构建质粒能高效表达和分泌目的的蛋白。

PEDV S1蛋白多表位单克隆抗体制备及结果比对

猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)是由PED病毒(PEDV)引起猪的一种急性高度接触性传染病,其中S糖蛋白携带主要的B淋巴细胞抗原决定簇,能够诱导产生中和抗体和提供免疫保护作用的重要结构蛋白。主要针对PEDV S1蛋白选择九条不同的多肽片段,并利用BALB/C小鼠单克隆抗体制备技术得到识别相应多肽片段的单克隆抗体,针对九条不同多肽表位获得的单克隆抗体与重组原核表达的PEDV S1蛋白识别效果进行对比,最后证实在所选的九条多肽表位片段中,以序列90至102、621至637、718至731这三条多肽的抗原性最好。

一种治疗性的乙肝DNA疫苗的构建与表达

目的构建一种治疗性的乙肝DNA疫苗并测定它的表达。方法采用基于表位的疫苗设计方法,用化学合成的方法制备该种分子。用适当的载体与目的分子连接后,转入大肠肝菌宿主细胞扩增。纯化后的疫苗成品转入HEK293细胞中观察它的表达。结果通过酶切反应,凝胶电泳实验及测序反应证明该质粒构建成功。转入HEK293真核细胞,能够表达。结论成功构建了一种多价抗原决定簇的治疗性乙肝DNA疫苗,且其能高效表达。

电能采控终端软件自动检测系统的设计及应用

该文为提高电能采控终端软件检测的深度及检测效率,设计并开发了电能采控终端软件自动检测系统。系统通过改进装置端子结构及利用继电器的开关控制功能实现检测流程的自动化和智能化。通过分析软件深度测试用例及自动化脚本设计,实现软件检测的深度可靠性测试。该系统的推出,提高了电能采控终端的检测效率,促进了检测技术的升级,具有良好的推广前景和应用价值。

寄生虫病表位疫苗研究进展

寄生虫病不仅严重威胁人类健康,而且也给畜牧业造成巨大经济损失。目前研制安全有效的疫苗是寄生虫病预防控制的策略之一。表位疫苗具有特异性高、安全性好、设计灵活、易于生产和储存等优点,可同时诱导机体体液免疫和细胞免疫。近年来寄生虫病表位疫苗研究取得了较大进展,本文对寄生虫病表位设计及相关疫苗研究进展进行综述,旨在为高效疫苗的研制提供参考。