表没食子儿茶酚没食子酸酯对紫外线辐射诱导角质形成细胞产生IL-6和NF-κB的影响

目的研究绿茶中的主要活性成分表没食子儿茶酚没食子酸酯(EGCG)对中、长波紫外线辐射诱导角质形成细胞产生IL-6和NF-κB的影响。方法用ELISA法测定角质形成细胞培养上清液中IL-6水平,免疫组化和WesternBlot法检测细胞中NF-κBp65的变化。结果UVB20、30mJ/cm2和UVA10、20J/cm2可以显著促进角质形成细胞分泌IL-6(P<0.05),且细胞内NF-κB的产生明显增加(P<0.05)。0.15mmol/L和0.3mmol/L的EGCG对紫外线诱导的IL-6分泌起到了抑制作用(P<0.05),其中0.3mmol/L的EGCG作用更为明显,对紫外线辐射诱导的角质形成细胞NF-κB产生有着显著的抑制作用(P<0.05)。结论中、长波紫外线辐射可以促进IL-6的分泌。EGCG能够抑制NF-κB易位入核,从而抑制IL-6的分泌。

表没食子儿茶酚没食子酸酯对UVA抑制真皮成纤维细胞胶原合成影响的研究

目的:探讨不同剂量长波紫外线(UVA)对体外培养的人真皮成纤维细胞胶原合成的影响,观察表没食子儿茶酚没食子酸酯(EGCG)对此影响的防护作用。方法:应用逆转录(RT)-PCR和光度检测法测定不同剂量UVA辐照及EGCG处理后,成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达水平及培养液中可溶性胶原羟脯氨酸含量的变化;并检测了UVA(10J/cm2)辐照后6、24、48h羟脯氨酸含量的变化。结果:不同剂量UVA(1、5、10J/cm2)辐照降低成纤维细胞的Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达及培养液中羟脯氨酸的含量;UVA(10J/cm2)辐照后6h羟脯氨酸量最低,而后逐渐增高,于48h恢复至正常水平。EGCG以剂量依赖方式提高UVA(10J/cm2)辐照后成纤维细胞的Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达及培养液中羟脯氨酸的含量,EGCG浓度为0.100g/L时差异均有显著性(P<0.05)。结论:UVA辐照可抑制体外培养真皮成纤维细胞的胶原合成,而EGCG可减轻这种抑制作用。

紫外线诱导角质形成细胞凋亡和表没食子儿茶酚没食子酸酯保护机理的探讨

目的探讨不同剂量的中波紫外线(UVB)辐射对体外培养的人角质形成细胞(HaCaT细胞株)凋亡和死亡的影响,探讨表没食子儿茶酚没食子酸酯(EGCG)对此影响的保护作用,以及与凋亡相关的bcl-2和Fas基因之间的关系。方法流式细胞仪检测不同剂量UVB辐照及EGCG处理后角质形成细胞凋亡和死亡数量以及bcl-2蛋白水平的变化,RT-PCR检测FasmRNA的表达水平。结果UVB辐照组凋亡细胞数和死亡细胞数显著高于对照组(P<0.01),bcl-2和FasmRNA量与对照组差异也有显著性(P<0.01)。UVB辐照126mJ/cm2组凋亡细胞数低于辐照42mJ/cm2组(t=2.39,P<0.05),但死亡细胞比例显著增加(t=4.82,P<0.01),两组bcl-2和FasmRNA表达量差异均无显著性(t=1.30,P>0.25;t=0.32,P>0.25)。UVB辐照42mJ/cm2立即加入EGCG组较辐照42mJ/cm2未加EGCG组凋亡和死亡细胞数降低(t=7.64,P<0.01;t=3.49,P<0.05),bcl-2增加(t=3.62,P<0.05),FasmRNA表达量减少(t=6.83,P<0.01)。结论小剂量UVB辐照可以诱导体外培养的角质形成细胞凋亡,大剂量UVB辐照则导致细胞死亡,EGCG通过与凋亡相关的bcl-2和Fas减少紫外线诱导的角质形成细胞凋亡。

EGCG对体外培养的胚鼠皮层神经细胞的保护作用

目的研究表没食子儿茶酚没食子酸酯(EGCG)对FeSO4和H2O2诱导神经细胞损伤的保护作用。方法采用FeSO4和H2O2作用产生自由基的方法诱导离体培养的小鼠胚鼠大脑皮层神经细胞损伤建立模型。倒置相差显微镜进行神经元形态学观察,中性红比色法和MTT法测定神经细胞的存活数量和活性,TBARS法和BCA法分别测定神经细胞中丙二醛(MDA)的水平和总蛋白合成的能力。结果与FeSO4和H2O2损伤组进行比较,EGCG增加了神经细胞的存活数量和活性,降低MDA的含量和提高了总蛋白的合成能力。EGCG显示出较强的抗氧化能力。结论EGCG对FeSO4和H2O2诱导神经细胞损伤有明显的保护作用,其作用机制可能源于EGCG清除自由基和抑制脂质过氧化过程。

EGCG对羟自由基损伤小鼠胚胎海马神经元的保护作用

为了探讨表没食子儿茶素没食子酸酚(tea polyphenol(-)-epigallocatechin gal-late,EGCG)对羟自由基损伤小鼠海马神经元的保护作用,采用原代细胞培养技术,分离培养18 d小鼠胚胎海马神经元,培养4 d后,加入FeSO4和H2O2进行处理,随后加入不同浓度的EGCG培养24 h,通过观察细胞的形态学变化,四甲基偶氮唑盐(methylthiazolydi-phenyl-tetrazolium bromide,MTT)比色法分析细胞活性,检测神经元中丙二醛(malondi-aldehyde,MDA)以及培养液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)含量的变化,以探讨EGCG对羟自由基损伤神经元的保护作用。结果显示,EGCG能够抑制神经元MDA的产生,降低神经元细胞外液中LDH的含量,增加细胞的活性,从而进一步证明EGCG能够清除羟自由基产生,减轻羟自由基对神经元损伤,对神经元的存活有一定的保护作用,为其用于治疗中枢神经系统病理性损伤的打下实验基础。

紫外线对皮肤角质形成细胞和成纤维细胞产生MMP-1和MMP-3的影响

目的:研究中波紫外线辐射对体外培养的表皮角质形成细胞和真皮成纤维细胞产生基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和MMP-3的直接和间接影响,研究绿茶中的主要活性成分表没食子儿茶酚没食子酸酯(EGCG)对此影响的保护作用。方法:体外培养角质形成细胞株HaCaT和真皮成纤维细胞,中波紫外线辐射、不同浓度IL-6刺激及EGCG处理后,ELISA方法测定上清液中Pro-MMP-1和MMP-3蛋白含量,半定量RT-PCR方法测细胞中mRNA含量。结果:UVB30mJ/cm2辐射后角质形成细胞分泌的pro-MMP-1和MMP-3并未增加(P>0.05),真皮成纤维细胞合成和分泌MMP-1和MMP-3mRNA含量和蛋白水平均显著增加(P<0.05),IL-6(8、16、24pg/mL)可显著增加成纤维细胞产生MMP-1和MMP-3(P<0.05)。EGCG(0.15、0.3mM)能够显著抑制紫外线诱导成纤维细胞产生MMP含量的增加(P<0.05),但IL-6刺激成纤维细胞所产生的MMP-1和MMP-3的增加不受EGCG的影响(P>0.05)。结论:中波紫外线辐射并不能直接导致角质形成细胞分泌MMP-1和MMP-3增加,但紫外线辐射后角质形成细胞分泌的IL-6可促进成纤维细胞产生MMP。EGCG对IL-6刺激成纤维细胞产生MMP增加没有影响,但它可以显著抑制紫外线辐射直接导致的成纤维细胞产生MMP-1和MMP-3的增加,对防治皮肤光老化可能有一定作用。

EGCG对体外培养胚鼠皮层神经细胞的保护作用

目的观察表没食子儿茶酚没食子酸酯(EGCG)对体外培养的胚鼠皮层神经细胞生长的影响。方法离体培养昆明种小鼠胚鼠大脑皮层神经细胞,至第5天加入不同浓度的EGCG(1、5、10、20、40、60、80和100μmol/L),通过倒置相差显微镜和NSE免疫细胞化学染色法进行神经元形态观察,应用中性红比色法和MTT法测定神经细胞的存活数和细胞活性。结果EGCG实验组培养48h后,与对照组比较,能明显促进神经细胞存活及突起生长,可增加神经细胞的存活数,提高神经细胞内酶的活性,尤其在10～40μmol/L的浓度范围内差异较显著(P<0.01)。结论在5～100μmol/L的浓度范围内,EGCG均有一定的促细胞生长作用,可增加神经细胞的存活数,提高神经细胞内酶的活性。

篱蓼地下部分的化学成分研究

目的 研究篱蓼Fallopia dumetorum地下部分的化学成分。方法 利用硅胶、Sephadex LH-20、C18-ODS等柱色谱,以及半制备高效液相色谱(HPLC)技术进行系统分离纯化,结合质谱(MS)、核磁共振谱(NMR)等波谱数据和文献对照等手段鉴定化合物结构;对部分化合物进行体外抗氧化活性测试。结果 从篱蓼地下部分醋酸乙酯提取物中分离得到27个化合物,分别鉴定为对羟基肉桂酸甲酯(1)、反式-4-甲氧基肉桂酸(2)、methyl gallate 3-O-β-D-glucopyranoside(3)、smilaside J(4)、lapathoside A(5)、vanicoside B(6)、hedyotisol A(7)、表儿茶酚(8)、红花素(9)、木犀草素(10)、槲皮素(11)、异槲皮苷(quercetin 3-O-β-D-glucopyranoside,12)、槲皮素-3-O-β-D-木糖苷(quercetin 3-O-β-D-xylopyranoside,13)、2,3,5,4’-tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-glucopyranoside(14)、1,3,6-trihydroxy-8-methylxanthone(15)、大黄素(16)、大黄素-8-β-D-葡萄糖苷(17)、polygonumnolide B2(18)、决明酮8-O-β-D-葡萄糖苷(19)、altenuene(20)、isoaltenuene(21)、(2R,4a R,8a R)-3,4,4a,8a-tetrahydro-4a-hydroxy-2,6,7,8a-tetramethyl-2-(4,8,12-trimethyltridecyl)-2H-chromene-5,8-dione(22)、豆甾-4-烯-3-酮(23)、stigmast-4-ene-3,6-dione(24)、β-谷甾醇(25)、schleicheol 2(26)和α-amyrenol(27)。其中化合物1、8、9、11、13、14、18和27在100μmol/L浓度下对ABTS自由基有显著的抑制活性,同时化合物8和11在100μmol/L浓度下对DPPH自由基也具有明显的抑制活性。结论 化合物2~4、7、9、13、15、20~22、24和26为首次从蓼科植物中分离得到,化合物1、5、8和27为首次从该属植物中报道,化合物6、14、16~19和23为首次从篱蓼中分离得分到。化合物1、8、9、11、13、14、18和27具有体外抗氧化活性。

茶叶组分抗菌、抗病毒和免疫增强作用的研究进展

饮茶对人身体健康有许多益处,如抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、降低某些疾病的发病率等。近年来,越来越多的文献报道了茶叶组分具有抗菌、抗病毒和增强人体免疫力的作用。本文对茶叶中的主要组分茶多酚、茶色素、茶多糖和茶氨酸的抗菌、抗病毒和免疫增强作用的研究进展作一综述。