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细胞内趋化因子重组突变体SDF-1α/54/KDEL的构建及其对CXCR4受体在细胞膜表面表达的抑制作用
1
作者
陈宏远
谭毅
+6 位作者
郭芝刚
马伟峰
蔡绍皙
杜军
黄俊
胡厚稳
蔡绍晖
《生物医学工程学杂志》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期647-651,677,共6页
构建人基质细胞衍生因子(SDF-1)突变体SDF-1α/54/KDEL重组真核表达质粒,并考察其对T细胞性白血病细胞株Molt-4细胞表面受体CXCR4表达的影响,为尝试表型敲除肿瘤细胞CXCR4以抑制肿瘤的转移提供理论和实验依据。以SDF-WT-Gly×4-Dec/...
构建人基质细胞衍生因子(SDF-1)突变体SDF-1α/54/KDEL重组真核表达质粒,并考察其对T细胞性白血病细胞株Molt-4细胞表面受体CXCR4表达的影响,为尝试表型敲除肿瘤细胞CXCR4以抑制肿瘤的转移提供理论和实验依据。以SDF-WT-Gly×4-Dec/PET30a(+)质粒为模板,用PCR法扩增出SDF-1α/54并将其亚克隆至真核表达质粒pEGFP-C3构建成真核表达载体pEGFP-C3/SDF-1α/54/KDEL。经酶切及测序验证后,脂质体介导转染入COS-7细胞,通过Western blot检测SDF-1α/54/KDEL的表达。电穿孔法将重组载体瞬时转染CXCR4高表达的Molt-4,并用流式细胞仪检测CXCR4含量的变化。DNA测序证明:读码框完全正确,重组真核表达载体含有SDF-1α/54基因和编码4肽KDEL的基因,Western blot证明融合蛋白能在COS-7细胞表达。电穿孔转染Molt-4细胞后发现,SDF-1α/54/KDEL可以显著降低胞膜表面CXCR4表达量。由此提示:KDEL介导的SDF-1α/54对Molt-4细胞CXCR4具有表型敲除作用,且此效应不受SDF-1αC端α螺旋缺失的影响。
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关键词
人基质细胞衍生因子(SDF-1)
SDF-1α/54
CXCR4
表型敲除
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职称材料
题名
细胞内趋化因子重组突变体SDF-1α/54/KDEL的构建及其对CXCR4受体在细胞膜表面表达的抑制作用
1
作者
陈宏远
谭毅
郭芝刚
马伟峰
蔡绍皙
杜军
黄俊
胡厚稳
蔡绍晖
机构
广东药学院微生物学与免疫学教研室
中山大学药学院
中山大学免疫学教研室
暨南大学药学院临床药理教研室
出处
《生物医学工程学杂志》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期647-651,677,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(30572209)
文摘
构建人基质细胞衍生因子(SDF-1)突变体SDF-1α/54/KDEL重组真核表达质粒,并考察其对T细胞性白血病细胞株Molt-4细胞表面受体CXCR4表达的影响,为尝试表型敲除肿瘤细胞CXCR4以抑制肿瘤的转移提供理论和实验依据。以SDF-WT-Gly×4-Dec/PET30a(+)质粒为模板,用PCR法扩增出SDF-1α/54并将其亚克隆至真核表达质粒pEGFP-C3构建成真核表达载体pEGFP-C3/SDF-1α/54/KDEL。经酶切及测序验证后,脂质体介导转染入COS-7细胞,通过Western blot检测SDF-1α/54/KDEL的表达。电穿孔法将重组载体瞬时转染CXCR4高表达的Molt-4,并用流式细胞仪检测CXCR4含量的变化。DNA测序证明:读码框完全正确,重组真核表达载体含有SDF-1α/54基因和编码4肽KDEL的基因,Western blot证明融合蛋白能在COS-7细胞表达。电穿孔转染Molt-4细胞后发现,SDF-1α/54/KDEL可以显著降低胞膜表面CXCR4表达量。由此提示:KDEL介导的SDF-1α/54对Molt-4细胞CXCR4具有表型敲除作用,且此效应不受SDF-1αC端α螺旋缺失的影响。
关键词
人基质细胞衍生因子(SDF-1)
SDF-1α/54
CXCR4
表型敲除
Keywords
Stromal cell-derived Faceor-1(SDF-1) SDF-1α/54 CXCR4 Phenotypic knockout
分类号
R392.1 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
细胞内趋化因子重组突变体SDF-1α/54/KDEL的构建及其对CXCR4受体在细胞膜表面表达的抑制作用
陈宏远
谭毅
郭芝刚
马伟峰
蔡绍皙
杜军
黄俊
胡厚稳
蔡绍晖
《生物医学工程学杂志》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2008
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