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TZM-b1细胞系检测我国HIV-1病毒表型耐药性 被引量:9
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作者 孙坚萍 马丽英 +5 位作者 黄江虹 余小玲 徐维泗 纪燕 黄洋 邵一鸣 《中国艾滋病性病》 CAS 2008年第5期439-441,449,共4页
目的利用TZM-b1细胞系检测艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)对逆转录酶抑制剂(AZT、d4T、ddI、NVP)的药物敏感性,并用该方法检测中国抗病毒治疗失败者的表型耐药。方法用两种实验室适应毒株SF33和ⅢB来评价TZM-bl细胞方法的敏感性;用外周血单个核... 目的利用TZM-b1细胞系检测艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)对逆转录酶抑制剂(AZT、d4T、ddI、NVP)的药物敏感性,并用该方法检测中国抗病毒治疗失败者的表型耐药。方法用两种实验室适应毒株SF33和ⅢB来评价TZM-bl细胞方法的敏感性;用外周血单个核细胞(PBMC)共培养法分离扩增抗病毒治疗失败者的临床毒株;用TZM-b1法检测16例临床毒株对逆转录酶抑制剂的表型耐药。结果AZT、d4T、ddI、NVP对SF33/ⅢB毒株的抑制50%病毒复制的药物浓度(IC_(50))分别为0.009/0.005μumol/L、0.125/0.113μmol/L、0.495/1.905μmol/L、0.093/ 0.045μmol/L。16例临床分离毒株中分别有13(81.396)株、13(81.396)株对AZT和NVP耐药。其中7株(53.8%)显示对AZT高度耐药;对NVP耐药的均为高度耐药,其中8株IC_(50)升高1000倍以上。结论TZM-b1细胞系可用来快速检测HIV-1病毒表型耐药。我国抗病毒治疗失败者的表型耐药主要表现为对AZT和NVP耐药。 展开更多
关键词 艾滋病病毒Ⅰ型 表型耐药 TZM-b1细胞
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HIV的表型耐药及检测方法的研究进展 被引量:4
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作者 鲁俊锋 李珏 +1 位作者 李敬云 吴昊 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2008年第1期65-68,共4页
随着抗病毒治疗的广泛开展,耐药程度的增加,耐药突变之间相互作用越来越复杂,直接评估HIV-1病毒药物易感性的表型耐药检测逐渐受到人们的重视。本文就HIV-1表型耐药定义、检测方法、存在优缺点及其与基因型耐药检测结果一致性等进行综述。
关键词 HIV-1 表型耐药 检测方法 综述
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结核分枝杆菌异质性所致的基因耐药与表型耐药不一致的研究进展 被引量:4
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作者 张丽霞 邵世峰 《医学综述》 2015年第14期2526-2528,共3页
结核病治疗和防治是全球性公共卫生问题,治疗中抗结核药物的不规范使用,加上患者的依从性差,造成了结核菌耐药率不断增高,成为目前治疗上的难题之一。结核菌耐药有多种原因,其中异质性是结核菌耐药的一个微小变化过程。临床检验中由于... 结核病治疗和防治是全球性公共卫生问题,治疗中抗结核药物的不规范使用,加上患者的依从性差,造成了结核菌耐药率不断增高,成为目前治疗上的难题之一。结核菌耐药有多种原因,其中异质性是结核菌耐药的一个微小变化过程。临床检验中由于常规方法的局限性无法检测频率过低的菌株而造成耐药结果的偏差,出现了同一标本不同方法药敏试验结果不一致的现象,提示结核分枝杆菌的异质性对药敏结果有影响。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 异质性 表型耐药 基因
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一种新的HBV表型耐药研究方法的建立
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作者 朱华 苏何玲 +5 位作者 刘永明 刘青波 马义丽 许智慧 钟彦伟 徐东平 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第7期1037-1040,共4页
目的:探索建立一种快速、简便、经济的HBV表型耐药分析方法。方法:将野生型pTriEx-HBV1.1表达载体转染HepG2细胞,5h后给予不同浓度的LAM、ADV及ETV处理,隔天换药1次,换药2d后收集培养上清及细胞,用Dnase处理后,real-timePCR检测HBVDNA... 目的:探索建立一种快速、简便、经济的HBV表型耐药分析方法。方法:将野生型pTriEx-HBV1.1表达载体转染HepG2细胞,5h后给予不同浓度的LAM、ADV及ETV处理,隔天换药1次,换药2d后收集培养上清及细胞,用Dnase处理后,real-timePCR检测HBVDNA的水平。结果:上清及细胞内核心颗粒HBVDNA的水平下降2~3个数量级,最大抑制率达98%,EC50值接近。结论:以上清病毒定量代替核心颗粒,建立了基于real-timePCR的HBV表型耐药分析方法,有利于HBV临床治疗的耐药监测。 展开更多
关键词 肝炎病毒 乙型 表型耐药分析 REAL-TIME PCR
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糖尿病对肺结核菌株表型耐药及基因突变影响的前瞻性研究 被引量:6
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作者 张瑛梅 王飞 +5 位作者 任小兵 王玥莲 陈俊 胡莹 胡晓勤 徐文革 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2022年第29期3616-3620,共5页
背景耐药结核病是当前结核防控难点,临床上肺结核合并糖尿病会增加结核病的控制难度,糖尿病是否会影响肺结核菌株表型耐药,国内外研究并无统一定论。目的探索糖尿病是否影响肺结核菌株表型耐药以及对结核分枝杆菌耐药基因位点突变的影... 背景耐药结核病是当前结核防控难点,临床上肺结核合并糖尿病会增加结核病的控制难度,糖尿病是否会影响肺结核菌株表型耐药,国内外研究并无统一定论。目的探索糖尿病是否影响肺结核菌株表型耐药以及对结核分枝杆菌耐药基因位点突变的影响。方法选取2018—2020年在简阳市人民医院就诊的结核分枝杆菌培养阳性肺结核患者357例,根据是否合并糖尿病,将其分为单纯肺结核组(PTB组)216例和合并糖尿病的肺结核组(DM-PTB组)141例。两组患者的晨痰标本进行表型药物敏感试验。PTB组选择62例、DM-PTB组选择61例进行结核分枝杆菌耐药基因位点突变检测。结果两组患者利福平、乙胺丁醇、链霉素耐药率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);DM-PTB组异烟肼耐药率高于PTB组(P<0.05)。两组患者异烟肼、利福平、链霉素单耐药率以及多耐药率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);DM-PTB组耐多药率高于PTB组(P<0.05)。两组患者检测基因位点突变率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论糖尿病会加重肺结核患者异烟肼耐药及耐多药情况,临床应该重视肺结核与糖尿病的双向筛查。 展开更多
关键词 结核 糖尿病 结核 抗多种物性 基因突变 表型耐药
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K-B法和VITEK2法检测108株大肠埃希氏菌18种抗生素耐药表型的一致性研究
6
作者 梁其冰 冯春艳 +5 位作者 谢作蓉 冯晨韵 袁维道 陈彩霞 王雪吟 罗小菊 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第10期31-38,共8页
目的运用K-B法和VITEK2法检测大肠埃希氏菌对氨苄西林等18种抗生素的药敏情况,对比研究二者结果的一致性。方法收集食源性大肠埃希氏菌108株(32株产β-内酰胺酶的大肠埃希氏菌Escherichia coli producingβ-lactamase,ESBLs+E.coli;76... 目的运用K-B法和VITEK2法检测大肠埃希氏菌对氨苄西林等18种抗生素的药敏情况,对比研究二者结果的一致性。方法收集食源性大肠埃希氏菌108株(32株产β-内酰胺酶的大肠埃希氏菌Escherichia coli producingβ-lactamase,ESBLs+E.coli;76株不产β-内酰胺酶的大肠埃希氏菌Escherichia coli non-producingβ-lactamase,ESBLs-E.coli),通过K-B法和VITEK2法检测大肠埃希氏菌对18种抗生素的敏感性。结果除了复方新诺明,两种方法检测其他17种抗生素的敏感率、中介率和耐药率均无统计学上的差异;18种抗生素的一致率(catagorical agreement,CA)在85.18%~100.00%之间,非常重大误差(very major error,VME)在0%~26.41%之间,重大误差(major error,ME)在0%~1.78%之间,次要误差(minor error,MIE)在0%~12.04%之间。其中氨苄西林/舒巴坦的CA(87.96%)、复方新诺明的CA(85.18%)、氨曲南的VME(7.14%)、复方新诺明的VME(26.41%)和氨苄西林/舒巴坦的MIE(12.04%)不符合标准要求。结论K-B法与VITEK2法在耐药表型测定方面不具有完全等同性,K-B法对异质性耐药菌识别能力优于VITEK2法,但是在检测复方新诺明耐药表型时,可采用其他方法进行验证,综合判断后确定结果。 展开更多
关键词 大肠埃希氏菌 表型 K-B法 VITEK2法
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甘肃省食源性单核细胞增生李斯特菌耐药性和基因组特征研究
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作者 张璟 兰光 +4 位作者 申艳琴 闫静 刘小菊 肖晶 王伟 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期705-713,共9页
目的分析甘肃省市售食品中分离的25株单核细胞增生李斯特菌耐药性和基因组特征,为单核细胞增生李斯特菌引起的食源性疾病的防控提供依据。方法以2021—2022年甘肃省市售食品中分离的25株单核细胞增生李斯特菌为研究对象,采用肉汤微量稀... 目的分析甘肃省市售食品中分离的25株单核细胞增生李斯特菌耐药性和基因组特征,为单核细胞增生李斯特菌引起的食源性疾病的防控提供依据。方法以2021—2022年甘肃省市售食品中分离的25株单核细胞增生李斯特菌为研究对象,采用肉汤微量稀释法检测菌株对8种抗菌药物的敏感性,并对菌株进行血清分型和全基因组测序,分析其系统发育谱系、CC型、ST型、血清型、耐药表型及基因、毒力基因、抗性基因、系统发生关系。结果25株单核细胞增生李斯特菌分属谱系Ⅰ、谱系Ⅱ,以谱系Ⅱ为主,共21株(84.0%)。血清型以1/2a为主,共14株(56.0%),分属10个CC型,其中CC9、CC8和CC121为优势CC型,共占56.0%(14株),发现一个新的ST型,即ST3142。仅1株单核细胞增生李斯特菌耐药(4.0%,1/25),为复方磺胺甲恶唑、红霉素、四环素和环丙沙星多重耐药株,本研究菌株耐药表型与耐药基因的携带情况基本一致。25株单核细胞增生李斯特菌均携带LIPI-1和内化素基因,未发现携带LIPI-3的菌株,仅2株ST87型菌株携带LIPI-4。16株菌(64.0%)携带SSI-1,5株ST121携带SSI-2。68.0%(17/25)的菌株inlA基因发生了提前终止(PMSC)。核心基因组多位点序列分型分析能将不同谱系、血清群和CC型的菌株明显分开,25株菌共分为10个亚群,与CC型保持一致。结论甘肃省市售食品中25株单核细胞增生李斯特菌呈现遗传进化多样性,耐药基因及表型均表现出低耐药率,且携带的毒力基因丰富。 展开更多
关键词 单核细胞增生李斯特菌 全基因组测序 表型 基因 毒力基因
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浙江省温州地区老年住院患者耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌药敏、耐药表型及毒力因子研究 被引量:1
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作者 金晓立 赖冬红 +5 位作者 胡杨妃 丁思思 沈丽珍 陈杨芳 毛晓晔 曾云祥 《现代实用医学》 2023年第1期57-60,74,共5页
目的 探讨浙江省温州地区老年住院患者临床分离耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CR KP)药敏、耐药表型及毒力因子特点。方法 选取2018年3月至2022年3月在浙江省温州市地区各医院的老年住院患者中分离的CR KP菌株112株,进行药敏试验,拉丝试验... 目的 探讨浙江省温州地区老年住院患者临床分离耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CR KP)药敏、耐药表型及毒力因子特点。方法 选取2018年3月至2022年3月在浙江省温州市地区各医院的老年住院患者中分离的CR KP菌株112株,进行药敏试验,拉丝试验测试高黏表型菌株,荧光定量(PCR)检测耐药基因、血清荚膜分型及毒力因子基因。结果 112株CR KP分别来源于6种不同的标本类型,其中以尿液(47.32%)和痰液(42.86%)为主;112株CR KP对亚胺培南、厄他培南耐药率均达98.21%。共检出18株高黏表型CR KP菌株,检出率为16.07%,来自3种不同的标本类型,以痰液为主(61.11%)。CR-HvKP对甲氧苄啶/磺胺甲恶唑、阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素具有较好的药物敏感性,分别为72.22%、61.11%、55.56%、55.56%。18株高黏表型CR KP菌株均携带KPC,其中有3株共同携带GES(16.67%),1株共同携带NDM(5.56%);血清荚膜型以K1型(11.11%)、K2型(2株,11.11%)为主,有13株未分型,未见K20、K54、K57型;共有12株高黏表型CR KP菌株携带毒力基因,其中有1株携带Iron基因(5.56%),2株共同携带rmp A、Iron、aerobactin、magA 4种基因(11.11%),1株共同携带rmpA、Iron、aerobactin 3种基因(5.56%),7株共同携带rmpA、Iron 2种基因(38.89%),1株共同携带rmp A、aerobactin 2种基因(5.56%);rmpA携带率为61.11%,Iron携带率为61.11%,携带aerobactin携带率为22.22%,magA携带率为11.11%。结论 高黏表型CRKP菌株在温州地区老年住院患者的检出率较高,标本主要来源于痰液,耐药基因机制可能为产KPC型碳青霉烯酶,血清荚膜型以K1和K2为主,毒力基因以rmpA、Iron基因携带率最高。 展开更多
关键词 老年人 住院患者 碳青霉烯类 肺炎克雷伯菌 表型 毒力因子
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Vitek2 Compact AST-P639中国定制药敏卡对金黄色葡萄球菌体外药敏、耐药表型及AES修正能力评估
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作者 梁美春 王萍 +6 位作者 张小姣 何秋丽 吕黎 周宜庆 张海旺 茅国峰 王朵 《浙江医学》 CAS 2023年第13期1354-1358,1370,共6页
目的评估Vitek2 Compact AST-P639中国定制药敏卡(简称中国定制卡)测定金黄色葡萄球菌体外药敏、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、红霉素诱导克林霉素耐药试验及高级专家系统(AES)的修正能力。方法选取2020年5月至2021年9月绍兴市人民... 目的评估Vitek2 Compact AST-P639中国定制药敏卡(简称中国定制卡)测定金黄色葡萄球菌体外药敏、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、红霉素诱导克林霉素耐药试验及高级专家系统(AES)的修正能力。方法选取2020年5月至2021年9月绍兴市人民医院临床分离的非重复金黄色葡萄球菌100株,分别采用中国定制卡及微量肉汤稀释法测定万古霉素、替考拉宁、替加环素、利奈唑胺、达托霉素、苯唑西林、红霉素、克林霉素、左氧氟沙星、复方新诺明和利福平的敏感性。分别以微量肉汤稀释法、PCR和D试验为参考方法,评估中国定制卡的可靠性,并对AES修正能力进行评估。结果中国定制卡对金黄色葡萄球菌体外药敏分类一致性(CA)为95.38%,极大错误(VME)、大错误(ME)、小错误(MIE)分别为0.31%、3.77%、0.54%,其中万古霉素、替考拉宁、替加环素、利奈唑烷、达托霉素CA均为100.00%,苯唑西林、红霉素、克林霉素、左氧氟沙星、复方新诺明、利福平、MRSA、红霉素诱导克林霉素耐药试验的CA分别为95.00%、95.00%、66.00%、94.00%、98.00%、97.00%、98.00%、97.00%。左氧氟沙星、复方新诺明和利福平均出现了2.00%的ME,红霉素、MRSA、红霉素诱导克林霉素耐药试验出现了1.00%、2.00%、1.00%的VME。AES将4株苯唑西林敏感菌株和28株克林霉素敏感菌株修正为耐药,虽然均消除了1.00%的VME,但均增加了ME(分别为5.00%、34.00%)。PCR和D试验证实,被修正的4株苯唑西林敏感菌株均携带mecA基因,即与AES修正相符;被修正的28株克林霉素敏感菌株中26株D试验阳性,即AES存在7.14%(2/28)的错误修正率。结论中国定制卡对金黄色葡萄球菌体外药敏、MRSA表型、红霉素诱导克林霉素耐药试验的筛选有较高的准确性,AES对苯唑西林、克林霉素的修正结果可以有效的避免抗菌药物的错误选择,可靠性好,但也存在一定的错误率和局限性,应予以关注。 展开更多
关键词 AST-P639中国定制敏卡 金黄色葡萄球菌 表型 高级专家系统
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河南地区兔源克雷伯氏菌耐药性及耐药基因的分析 被引量:1
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作者 牛冰玉 刘玉梅 +4 位作者 崔晶晶 王晴晴 王佳宁 刘世洋 张自强 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期492-498,共7页
为了解河南地区兔源克雷伯氏菌的生物学特性、携带的耐药基因及耐药基因与耐药表型之间的相关性,本研究于2022年3月~2023年4月从河南省7个不同地区规模化养兔场共采集74份具有典型克雷伯氏菌病临床症状兔的病料样品,分别划线接种于LB固... 为了解河南地区兔源克雷伯氏菌的生物学特性、携带的耐药基因及耐药基因与耐药表型之间的相关性,本研究于2022年3月~2023年4月从河南省7个不同地区规模化养兔场共采集74份具有典型克雷伯氏菌病临床症状兔的病料样品,分别划线接种于LB固体培养板和血琼脂培养板进行病原菌的分离培养。通过菌落形态观察、革兰染色镜检、生化试验、PCR扩增克雷伯氏菌Khe基因并经BLAST比对和构建Khe基因的进化树确定细菌的种类。结果显示,从74份兔病料样品中共分离到10株克雷伯氏菌,且该10株菌主要集中在洛阳(3/10)和周口(2/10),开封、郑州、漯河、济源及新乡各分离到1株。分别通过K-B法和PCR对不同地区来源的菌株进行3类共8种药物的药敏试验和上述药物的相关耐药基因检测,采用SPSS 26软件分析耐药表型与耐药基因之间的相关性。结果显示,对新霉素、庆大霉素、卡那霉素(氨基糖苷类),环丙沙星、诺氟沙星(喹诺酮类),四环素(四环素类)6种药物耐药的菌株占80%~100%,对氧氟沙星(喹诺酮类)和多西环素(四环素类)耐药的菌株占60%~70%,且多重耐药菌株占90%,并以耐庆大霉素和环丙沙星药物为主。对上述3类药物平均耐药菌株的占比分别为90%、80%和80%。从洛阳、开封和郑州地区分离的菌株耐药严重,对8种药物均耐药,呈严重的多重耐药性;周口和新乡地区分离的菌株耐药性虽相对较弱,但也呈多重耐药性。耐药基因的PCR结果显示,aac(6')-Ib、ant(3'')-I和aph(3'')-I(氨基糖苷类)、Aac6和q Ep A(喹诺酮类)、tetQ(四环素类)的检测率均高达60%以上,qnrs(喹诺酮类)的检测率为30%,未检出tetO(四环素类)。从洛阳分离的菌株携带耐药基因的数量和种类最多,从周口和郑州分离的菌株携带耐药基因的数量和种类较少,从开封、漯河、济源和新乡分离的菌株携带耐药基因的数量相同,但携带耐药基因的种类不同。经计算分析,10株菌对氨基糖苷类和喹诺酮类药物的耐药表型及其耐药基因之间基本呈正相关(符合率分别为81.4%和70.9%),四环素类耐药表型和耐药基因的符合率较低仅为37.5%,但分离菌对四环素类药物呈一定的耐药性。综上表明,河南地区兔源克雷伯氏菌的耐药性严重,且多呈多重耐药性,耐药基因较复杂多样。本研究首次检测了河南地区兔源克雷伯氏菌的耐药表型与耐药基因并分析它们之间的相关性,为河南地区兔场克雷伯氏菌病的防治提供参考依据。 展开更多
关键词 克雷伯氏菌 表型 基因
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一株分离于生鲜乳的金黄色葡萄球菌毒力与耐药性分析
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作者 王巧梅 王子杰 +6 位作者 操义恒 周霞 吴洁 王晓兰 孙志华 王震 张辉 《中国奶牛》 2024年第6期32-36,共5页
为了解生鲜乳中金黄色葡萄球菌的特性,试验通过无菌采集新疆某规模化牛场混合新鲜乳样,采用常规分离方法结合PCR方法检测特异性nuc基因分离鉴定金黄色葡萄球菌,分析分离菌株对7类11种抗生素的耐药表型,采用PCR方法对金黄色葡萄球菌常见... 为了解生鲜乳中金黄色葡萄球菌的特性,试验通过无菌采集新疆某规模化牛场混合新鲜乳样,采用常规分离方法结合PCR方法检测特异性nuc基因分离鉴定金黄色葡萄球菌,分析分离菌株对7类11种抗生素的耐药表型,采用PCR方法对金黄色葡萄球菌常见重要的8种毒力基因和6种耐药基因进行检测并分析其致病性。结果表明新鲜乳样中分离到一株金黄色葡萄球菌;该菌对青霉素、氨苄西林耐药,对卡那霉素、四环素4种抗生素处于中介,对庆大霉素、红霉素、头孢唑林等5种抗生素敏感;携带sec、sea、hla、tsst-1、pvl、clf A 6种毒力基因和qac A、msr A、erm C、mec A 4种耐药基因;能引起感染小鼠明显的组织病理变化并导致死亡。说明分离于生鲜乳中的金黄色葡萄球菌携带众多毒力基因和耐药基因,具有广泛的多重耐药性。 展开更多
关键词 生鲜乳 金黄色葡萄球菌 毒力基因 表型 基因
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新疆喀什地区某牛场大肠杆菌的耐药性分析
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作者 陈月月 王鹏 +4 位作者 兰佩聪 杨梦琪 田芮 张晨晖 夏利宁 《新疆畜牧业》 2024年第5期30-33,共4页
【方法】:本试验在新疆喀什地区某牛场中采集牛的直肠样211份、鼻腔样62份、眼周样50份和环境样38份,共361份。分别用麦康凯平板和伊红美蓝平板划线初筛大肠杆菌后,通过PCR扩增大肠杆菌管家基因,根据测序结果判定是否为大肠杆菌。采用... 【方法】:本试验在新疆喀什地区某牛场中采集牛的直肠样211份、鼻腔样62份、眼周样50份和环境样38份,共361份。分别用麦康凯平板和伊红美蓝平板划线初筛大肠杆菌后,通过PCR扩增大肠杆菌管家基因,根据测序结果判定是否为大肠杆菌。采用美国临床实验室标准委员会和欧盟药敏试验标准委员会推荐的琼脂稀释法测定大肠杆菌分离株对临床常用的五大类7种抗菌药物的最小抑菌浓度。【结果】:(1)大肠杆菌分离结果为:361份样品中分离出大肠杆菌173株,分离率为47.92%。牛直肠、牛鼻腔、牛眼周和环境源样品中大肠杆菌分离率分别为55.45%、32.26%、52.00%和26.32%。(2)药敏试验结果:4种来源的大肠杆菌均对氟苯尼考100%耐药,对庆大霉素、头孢噻呋、环丙沙星、氨苄西林、四环素和阿米卡星的耐药率均在30.0%以上。环境源大肠杆菌耐药最为严重,其余三种来源的大肠杆菌耐药情况相近。(3)多药耐药结果:除部分直肠样品存在对本试验使用的抗菌药物出现1~3耐外,其余来源大肠杆菌多为3耐及以上的多药耐药菌株。【结论】:该牛场不同来源大肠杆菌耐药性存在差异,耐药性呈上升趋势。因此,该牛场应规范消杀流程,合理使用抗菌药物。 展开更多
关键词 牛场 大肠杆菌 表型 最小抑菌浓度
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ICU多重耐药肺炎克雷伯菌易感因素分析及耐药表型与基因关系研究 被引量:1
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作者 舒美林 杨梅 +2 位作者 饶成龙 戴红英 邓琳琳 《传染病信息》 2023年第6期539-546,共8页
目的 分析重症监护室(intensive care unit, ICU)多重耐药肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae, KP)的易感因素及耐药表型与基因关系,为临床制定综合防治措施提供依据。方法 选取2021年1月—2023年1月收治于岳池县人民医院ICU病房的180... 目的 分析重症监护室(intensive care unit, ICU)多重耐药肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae, KP)的易感因素及耐药表型与基因关系,为临床制定综合防治措施提供依据。方法 选取2021年1月—2023年1月收治于岳池县人民医院ICU病房的180例KP感染患者作为研究对象,根据药物敏感性试验结果分为多重耐药组(n=80)和非多重耐药组(n=100),比较2组耐药表型及易感因素。用多因素Logistic回归分析影响ICU多重耐药KP易感因素,并建立列线图模型,分析KP基因组特征及相关的毒力因子。结果 多重耐药组中鉴定出的显著高表达的基因是决定O-抗原脂多糖血清型的血清抗性因子基因,决定多糖胶囊(K抗原)类型的是免疫逃避因子、胶囊合成调节、外排泵表达和肠杆菌素,这些基因与KP的感染方式及院内感染密切相关。多重耐药组的ICU住院时间、机械通气方式、机械通气时间、使用碳青霉烯类史、碳青霉烯类使用时间、输血史、使用肠外营养史、吸痰史、使用血管导管史均高于非多重耐药组(P均<0.05)。ICU住院时间≥19 d、机械通气≥7 d、使用有创机械通气、使用碳青霉烯类史、碳青霉烯类使用时间≥7 d、吸痰史是影响患者ICU多重耐药KP易感的独立危险因素。基于危险因素建立的列线图模型结果提示存在上述危险因素的患者ICU多重耐药KP易感的风险较高。模型内部验证结果显示,验证前后的校正曲线与理想曲线拟合良好。多重耐药组的KP基因测序结果显示,最丰富的质粒复制子类型是Col和Inc家族。结论 ICU中多重耐药KP感染与长时间住院、机械通气、使用碳青霉烯类史、吸痰史、特定基因表达和质粒复制子类型等因素密切相关,这些因素共同增加了患者感染风险。 展开更多
关键词 重症监护室 肺炎克雷伯菌 多重 易感因素 抗生素敏感性试验 表型 基因学 毒力因子
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某院耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的表型检测与其院内感染的危险因素分析
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作者 丁超 郑玉 +2 位作者 季崇裕 徐国新 陈龙 《抗感染药学》 2024年第8期833-837,共5页
目的:分析医院耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)的表型类型和其院内感染的影响因素,为临床CPKP的预防和治疗提供参考。方法:选取2017年11月1日—2021年5月31日张家港市第一人民医院不同住院患... 目的:分析医院耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)的表型类型和其院内感染的影响因素,为临床CPKP的预防和治疗提供参考。方法:选取2017年11月1日—2021年5月31日张家港市第一人民医院不同住院患者分离出的98株CRKP作为研究资料,采用改良碳青霉烯灭活试验(modified carbapenem inactivation method,mCIM)、乙二胺四乙酸碳青霉烯灭活试验(ethylenediaminetetraacetic acid-carbapenem inactivation method,eCIM)和聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增仪检测CRKP的耐药表型和耐药基因,并通过纳入同时期碳青霉烯类敏感的肺炎克雷伯菌感染患者,分析发生CRKP院内感染的危险因素。结果:PCR检测结果显示,98株CRKP中检出89株产KPC酶菌株,其中blaKPC阳性菌株87株、blaNDM阳性菌株2株,未检出blaVIM和blaOXA-48阳性菌株;mCIM与eCIM联合检测结果显示,98株CRKP中,产KPC型丝氨酸酶的有86株,产金属β-内酰胺酶的有4株;与PCR法相比,单用mCIM检测产KPC酶CRKP的敏感性为98.88%,特异性为77.78%,Kappa值为0.807(P<0.05);mCIM和eCIM联合检测产KPC型丝氨酸酶CRKP的敏感性为97.70%,特异性为90.91%,Kappa值为0.852(P<0.05);mCIM和eCIM联合检测产金属β-内酰胺酶CRKP的敏感性为100.00%,特异性为97.92%,Kappa值为0.657(P<0.05);Logistic回归分析结果显示,行机械通气和使用碳青霉烯类药物是发生CRKP院内感染的独立危险因素(P<0.05)。结论:产KPC酶型是医院住院患者所检出的CRKP的主要耐药表型,mCIM与eCIM联合检测可以检测出CRKP的耐药表型;此外,行机械通气和使用碳青霉烯类药物是发生CRKP院内感染的重要危险因素,对此临床应加强监护和管理,以减少感染的发生。 展开更多
关键词 碳青霉烯肺炎克雷伯菌 表型 院内感染 危险因素 聚合酶链反应 改良碳青霉烯灭活试验 乙二胺四乙酸碳青霉烯灭活试验
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鱼类产品中嗜水气单胞菌重组酶聚合酶扩增结合CRISPR/Cas12a快速检测及耐药性分析
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作者 高子惠 曲心平 +7 位作者 凌莉 于海洋 张蕾 胡蝶 吴笛 何雨霏 郑秋月 曹际娟 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第11期90-97,共8页
目的建立重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)结合簇状规则间隔短链重复序列及其相关蛋白(clustered regularly interspaced short palindromic repeats-associated protein,CRISPR-Cas)新方法,检测鱼类产品中... 目的建立重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)结合簇状规则间隔短链重复序列及其相关蛋白(clustered regularly interspaced short palindromic repeats-associated protein,CRISPR-Cas)新方法,检测鱼类产品中嗜水气单胞菌,并分析其耐药性。方法采用基于最新的CRISPR基因编辑技术建立RPA结合CRISPR/Cas12a新方法,快速检测嗜水气单胞菌,同时采用环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法比对两种方法的检出率。筛查嗜水气单胞菌分离株的耐药性,采用纸片扩散法测定耐药表型,采用荧光染料(SYBR green,SYBG)实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qPCR)测定耐药基因,分析耐药表型与耐药基因结果的一致性。结果在74例鱼类样品中,基于RPA-CRISPR/Cas12a和LAMP同时检测出6例嗜水气单胞菌。分析耐药性测试结果发现,分离株对5大类10种抗生素的耐药情况差异较大,耐药表型与耐药基因结果一致性较高。结论所建立的RPA-CRISPR/Cas12a方法适用于嗜水气单胞菌快速检测。而细菌耐药性的产生机制比较复杂,耐药表型的产生在一定程度上受耐药基因调控。研究结果为水产品中嗜水气单胞菌快速检测和耐药性筛查提供新思路和方法。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 重组酶聚合酶扩增 簇状规则间隔短链重复序列及其相关蛋白 环介导等温扩增 实时荧光定量聚合酶链式反应 表型 基因
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云南昭通某屠宰场猪源沙门氏菌的分离鉴定及耐药表型分析
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作者 解水梅 宋春莲 +8 位作者 武鑫 张莹 林钧艺 张王芝 耿志诚 袁红 李永荟 潘琼 舒相华 《畜牧兽医科技信息》 2023年第7期61-64,共4页
为了解昭通一屠宰场屠宰胴体沙门氏菌带菌情况,随机对58头屠宰后猪胴体进行无菌采样,通过细菌分离培养、生理生化鉴定、染色镜检、16S rRNA基因鉴定及药敏试验分析对屠宰场屠宰胴体沙门氏菌带菌情况进行分析。结果显示:58份样品中共分离... 为了解昭通一屠宰场屠宰胴体沙门氏菌带菌情况,随机对58头屠宰后猪胴体进行无菌采样,通过细菌分离培养、生理生化鉴定、染色镜检、16S rRNA基因鉴定及药敏试验分析对屠宰场屠宰胴体沙门氏菌带菌情况进行分析。结果显示:58份样品中共分离出13株沙门氏菌(22.41%),药敏试验显示,6株沙门氏菌对多粘菌素B敏感,4株对头孢曲松敏感,3株对氨苄西林、环丙沙星和复方新诺明敏感,其余均为中度敏感和耐药。多重耐药情况严重,有12株沙门氏菌呈现多重耐药(3重~6重),4和6重耐药最多,占比高达30.77%,其次是3重和5重分别占比15.38%。实验结果表明,该批屠宰的猪存在沙门氏菌污染,且多重耐药情况严重。 展开更多
关键词 屠宰场 沙门氏菌 分离鉴定 表型 16s rRNA
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艾滋病毒1型表型耐药检测研究进展
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作者 乔录新 陈德喜 《国际流行病学传染病学杂志》 CAS 2012年第2期121-124,共4页
目前,HIV-1抗逆转录病毒治疗药物的治疗目标是降低病毒载量,提高患者免疫系统功能,但是抗逆转录病毒药物耐药性的出现似乎已经是HIV-1感染者治疗的主要障碍,因此HIV-1耐药检测就成为感染者治疗方案中的重要项目之一。迄今,已有众... 目前,HIV-1抗逆转录病毒治疗药物的治疗目标是降低病毒载量,提高患者免疫系统功能,但是抗逆转录病毒药物耐药性的出现似乎已经是HIV-1感染者治疗的主要障碍,因此HIV-1耐药检测就成为感染者治疗方案中的重要项目之一。迄今,已有众多研究证明了表型耐药检测对于临床治疗的可靠性与实用性。此文将对目前表型耐药检测研究进展作了综述。 展开更多
关键词 HIV-1 表型耐药 检测
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结核分枝杆菌耐药表型与耐药基因型相关性研究进展 被引量:8
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作者 陈珊 刘厚明 单万水 《中国感染控制杂志》 CAS 北大核心 2016年第11期883-886,共4页
20世纪80年代以来,结核病(tuberculosis, TB)疫情呈全球性回升趋势,我国作为全球最大的发展中国家,同时也是全球 TB 疫情最严重的国家之一[1]。随着全球耐药结核病(drug-resistant tu-berculosis,DR-TB)的出现和传播,特别... 20世纪80年代以来,结核病(tuberculosis, TB)疫情呈全球性回升趋势,我国作为全球最大的发展中国家,同时也是全球 TB 疫情最严重的国家之一[1]。随着全球耐药结核病(drug-resistant tu-berculosis,DR-TB)的出现和传播,特别是耐多药结核病(multidrug-resistant TB,MDR-TB)、广泛耐药结核病(extensively drug-resistant TB,XDR-TB),以及全耐药结核病(totally drug-resistant TB, TDR-TB)发生率的增高,全球 TB 的有效治疗和控制受到严重威胁。深入研究结核分枝杆菌(Myco-bacterium tuberculosis ,MTB)的耐药分子机制,发现基因突变是 MTB 产生耐药的重要原因。现就各抗结核药物的耐药表型与耐药基因型的相关性研究进行综述。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 分子机制 表型耐药 基因
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食源性沙门氏菌耐药表型与耐药基因的研究 被引量:24
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作者 侯雪娇 吴科敏 +4 位作者 莫国东 刘书宏 言天久 焦鹏涛 韦平 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第19期166-170,共5页
为了解食源性沙门氏菌(Salmonella)的耐药状况以及耐药基因与耐药表型的关系,从基因水平上探究Salmonella的耐药机制。本研究对215株分离自1 093份市售新鲜肉类中的Salmonella进行了耐药状况检测,设计了16种引物对耐药基因进行聚合酶链... 为了解食源性沙门氏菌(Salmonella)的耐药状况以及耐药基因与耐药表型的关系,从基因水平上探究Salmonella的耐药机制。本研究对215株分离自1 093份市售新鲜肉类中的Salmonella进行了耐药状况检测,设计了16种引物对耐药基因进行聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增,并对扩增产物进行克隆测序。结果显示,分离株对磺胺异恶唑耐药率最高(71.7%),其次为四环素(69.8%)、甲氧嘧啶(67.9%)和复方新诺明(52.8%),分离株对环丙沙星、呋喃妥因和头孢类比较敏感。三重及以上耐药的菌株占60.5%,最多可以耐受13种抗生素;PCR共扩增到10种耐药基因,测序结果表明扩增到的序列与Gen Bank上相应参考序列的相似性均在99%以上;β-酰胺类以及四环素类的耐药基因检出情况与耐药表型具有很高的一致性,符合率均在90%以上,其次为磺胺类(81.6%)。说明本研究中的食源性Salmonella分离株的耐药率高,多重耐药情况较为严重,耐药表型与耐药基因检测结果基本一致。 展开更多
关键词 食品安全 沙门氏菌 抗生素 表型/基因
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95个猪场大肠杆菌耐药表型及氨基糖苷类药物耐药基因型调查 被引量:65
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作者 汤景元 王红宁 +2 位作者 张鹏举 冮婷婷 曾博 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期472-477,共6页
为调查我国规模化猪场大肠杆菌细菌耐药性及其氨基糖苷类药物耐药基因的流行状况,采用K-B(Kir-by-Bauer)法检测2006-2007年从四川、重庆、湖北等19个省95个规模化猪场分离的480株大肠杆菌对19种抗生素的耐药性。结果表明:仅有多黏菌素B(... 为调查我国规模化猪场大肠杆菌细菌耐药性及其氨基糖苷类药物耐药基因的流行状况,采用K-B(Kir-by-Bauer)法检测2006-2007年从四川、重庆、湖北等19个省95个规模化猪场分离的480株大肠杆菌对19种抗生素的耐药性。结果表明:仅有多黏菌素B(85.6%)、头孢噻肟(85.3%)、阿米卡星(84.8%)和大观霉素(65.0%)相对敏感。480株大肠杆菌以多重耐药菌株为主,其中13、14、15、16和17重耐药较多,并且有26株18重耐药,14株19重耐药。采用WHONET5.4软件分析大肠杆菌耐药性,对阿米卡星、头孢噻肟和多黏菌素B耐药的猪场相对较少,分别是29、26和24个。采用PCR方法检测氨基糖苷类相关耐药基因,耐药基因检出率分别是aadA1(65.89%)、aaC2(52.35%)、aaC4(12.91%)和aphA3(10.95%)。耐药基因型检出率较高的是aadA1/aaC2(29.61%)、aadA1(18.04%)。Excel软件统计相关耐药基因的猪场分布,表明耐药基因型aadA1/aaC2(43)、aa-dA1/aaC2/aaC4(20)和aadA1/aaC2/aaC4/aphA3(20)在猪场分布较普遍。耐药基因和耐药性比较表明大肠杆菌对氨基糖苷类药物耐药表型与耐药基因型符合率较高的是阿米卡星(68.39%)。本研究表明猪肠道内常在大肠杆菌菌群不仅产生较高的多重耐药性,也成为耐药基因的储存库,对猪场环境中耐药基因在致病菌和非致病菌间传播发挥重要作用,能够作为检测细菌耐药性的指示菌。 展开更多
关键词 大肠杆菌 表型 基因型 符合率
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