昆虫抗白僵菌免疫应答及其在害虫防治中的应用潜力

昆虫病原真菌白僵菌能成功侵染多种昆虫寄主并致其死亡,是农业生产中有效的生物杀虫剂。相应地,昆虫依赖多种策略抵御真菌感染,其中先天免疫防御是对抗真菌感染的重要手段。昆虫表皮是抵御真菌入侵的第一道屏障,表皮和外分泌腺可分泌多种抑菌化合物降低真菌毒力,当真菌孢子进入血淋巴后,细胞免疫和体液免疫共同作用产生系统性免疫应答,表达的多种防御效应因子在细胞包囊、细胞凋亡、黑化反应中发挥功能。然而昆虫强烈的免疫反应影响田间施用白僵菌的效果,导致该真菌制剂应用的局限性。文章详细阐述昆虫感染白僵菌后的免疫应答机制,参与抗真菌免疫的基因与作用手段。该研究为了解昆虫抗真菌免疫机制提供了详实的基础,为合理改造白僵菌、有效提高白僵菌毒力水平提供坚实基础,为农业虫害治理提供新的策略。

胎肺发育分化中表皮生长因子受体的表达和作用

目的 观察表皮生长因子受体 (EGFR)在小鼠胎肺发育过程的表达特征 ,研究表皮生长因子 (EGF)和转化生长因子 α(TGF α)通过与EGFR的作用 ,对胎肺形态发生和肺泡上皮成熟分化的作用。方法 昆明小鼠 ,13- 19天胎肺组织、生后1、7、14、30天及成鼠肺组织共 12组 ,常规石蜡切片 ,采用免疫组化SP两步法检测EGFR的表达。结果 胎肺假腺期 ,EGFR的表达主要定位于支气管呼吸道上皮 ,小管期EGFR阳性反应达到最高峰。在原始肺泡期 ,阳性反应主要在肺泡上皮细胞。出生后 ,支气管上皮细胞EGFR表达重新呈阳性表达。结论 在胎肺发育的不同时期 ,EGFR在上皮细胞的定位有迁移 ,免疫组化反应强弱也有差异 ,说明EGFR在胎肺不同发育阶段发挥不同的功能 ,它不仅参与支气管树的形成 ,还对呼吸道上皮细胞和肺泡上皮细胞的成熟分化有重要调节作用。

肝素结合表皮生长因子在乳腺癌中表达的意义

目的:探讨肝素结合表皮生长因子(HB-EGF)在乳腺癌发病早期表达的作用机制。方法:用免疫组织化学的方法检测乳腺癌周围组织、乳腺癌中HB-EGF的表达。结果:乳腺癌周围组织组织中几乎不表达HB-EGF,Ⅰ、Ⅱ期乳腺癌中HB-EGF的表达升高,Ⅲ、Ⅳ期乳腺癌中HB-EGF的表达降低,但表达高于乳腺癌周围组织且与后者有显著性差异。HB-EGF的表达与肿瘤大小、淋巴结是否转移有明显的关系。结论:HB-EGF可能在乳腺癌发病的早期阶段起关键作用。

涎腺黏液表皮样癌中p16、p15的表达及相关性研究

[目的]研究p16、p15在正常涎腺组织和黏液表皮样癌中的表达,探讨其在黏液表皮样癌发生、发展中的作用及临床意义。[方法]应用免疫组化S-P法检测10例正常涎腺组织、45例黏液表皮样癌中p16、p15蛋白的表达。[结果]黏液表皮样癌中p16、p15的阳性表达率分别为62.2%、73.3%,显著低于其在正常涎腺组织中的表达(100%)(P<0.05),且随肿瘤分化程度的降低而递减并具有显著性差异,其中p16的阳性率与淋巴结转移有关。p16、p15两基因在黏液表皮样癌的表达中呈显著相关性(P<0.05)。[结论]p16、p15的失表达与黏液表皮样癌的发生和发展关系密切,p16基因的异常可能是更为直接的因素。

表皮生长因子受体单抗对胰腺癌化疗的增敏作用

【目的】用胰腺癌细胞株，建立胰腺癌荷瘤裸鼠模型，探讨表皮生长N子受体（EGFR）单抗联合吉西他滨、奥沙利铂对胰腺癌化疗的增敏作用。【方法】将胰腺癌细胞株细胞悬液注射于裸鼠背部皮下，建立肿瘤模型。每周观察肿瘤生长情况，并记录；当肿瘤生长到0．15cm^3左右时，将裸鼠随机分组，称量每只荷瘤裸鼠的体重，并记录；干预组腹腔分别注射EGFR抗体（MMAb-2）、吉西他滨、奥沙利铂及其联合用药；对照组注射生理盐水。每周测量肿瘤大小。干预4周称量荷瘤裸鼠体重后处死裸鼠。切取肿瘤，测量瘤体积、称瘤重。肿瘤组织送病理学检查，评价干预效果。【结果】肿瘤细胞移植成功率近90％（62／70），瘤体生长迅速，其他组织和器官内未见转移癌灶。组织学检查符合胰腺低分化腺癌；MMAb-2、吉西他滨、奥沙利铂干预肿瘤有效，瘤体缩小。MMAb-2组裸鼠白细胞计数明显高于其他实验组。【结论】EGFR抗体可有效抑制肿瘤细胞的生长，其效果优于吉西他滨、奥沙利铂，并且联合应用效果更好。

间接抗原递呈途径在表皮细胞免疫原性中作用的实验研究

目的 探讨间接抗原递呈途径在体外培养的同种异体表皮细胞免疫原性中的作用。 方法 体外分离、培养人表皮细胞 (HEC)、异体人外周血淋巴细胞 (PBL)和单个核细胞 (PBM ,含单核细胞 )。采用人源毒性T淋巴细胞相关抗原 4(CTLA4Ig)腺病毒表达载体转染HEC ,观察CTLA4Ig的表达情况。未转染及已转染的HEC中 ,均加入异体PBL或PBM共培养 ,并以单独培养的PBL或PBM为对照。应用氚标记胸腺嘧啶脱氧核苷 ( 3H TdR)掺入法 ,测定各培养体系中PBL、PBM增殖情况。 结果 CTLA4Ig腺病毒表达载体能成功转染HEC并使其表达相应蛋白。未转染的HEC能刺激异体PBL轻度增殖 (P <0 .0 5 ) ,以及含单核细胞的异体PBM明显增殖 (P <0 .0 1) ;经CTLA4Ig基因修饰的HEC刺激PBL、PBM后 ,两者的增殖反应明显减弱 (P <0 .0 5 )。 结论 间接抗原递呈途径在HEC免疫原性中发挥了重要作用 ,CTLA4Ig能明显抑制该作用。

创面愈合过程中创缘表皮干细胞的再分布

目的:研究皮肤干细胞在全层皮肤创面愈合过程中的分布与增殖分化特征,以及该特征在创面愈合过程中的作用。方法:10只Wistar大鼠背部各制备4个面积为2.54cm^2的全层皮肤创面,将创面随机分为2组,即银锌霜治疗组(20个创面),空白对照组(20个创面)。分别于伤后3d、1周、2周和3周以组织学检查动态观察各组治疗效果,并以β_1整合素、角蛋白19(K19)免疫组化法检测表皮干细胞在创面愈合过程中的表达情况。结果:两面创面愈合率为银锌霜组80%(16/20)。两组创面肉芽组织于各时相点均未见β_1整合素、K19阳性细胞出现,但于创缘表皮的层或颗粒层出现了散在的β_1整合和K19同时染色阳性细胞。且越接近创面这些阳性细胞越密集,组织学上与基底层的阳性细胞无直接联系,其数量随着创面的缩小渐渐增加,直到创面愈合。上皮化后,这些阳性细胞逐渐减少,并随着愈合创面表皮脚的出现而消失,而感染创面的阳性细胞数量明显少于未感染创面的阳性细胞数。结论:表皮干细胞能动地与创面的修复,创缘表皮干细胞再分布的主要功能可能促进创面再上皮化。

IgA天疱疮

IgA天疱疮是一种新型自身免疫性表皮内水疱性疾病,其临床表现、组织病理和免疫病理与IgG天疱疮不同,皮质类固醇治疗常常不能控制病情,首选药物是砜类药物如氨苯砜,维甲酸类药物如阿维A酯是极好的二线治疗用药。

原发性膀胱移行细胞癌Pgp与突变p53蛋白、EGFR的相互关系

目的 :探讨mdr1基因表达产物Pgp与突变 p5 3蛋白、EGFR是否存在相关性及其临床意义。方法 :采用免疫组化SP法 ,检测 10 7例原发性膀胱移行细胞癌中Pgp、突变 p5 3蛋白、EGFR表达情况。结果 :Pgp、突变p5 3蛋白、EGFR的阳性表达率分别为 6 3 .6 % ,72 .9%和 6 6 .4% ,三者的过表达均与膀胱癌的病理分级、分期和术后的复发有关 ;相关性研究显示Pgp表达与突变 p5 3蛋白和EGFR的表达密切相关 (P <0 .0 1)。结论 :Pgp、突变 p5 3蛋白和EGFR过表达不仅是判定原发性膀胱移行细胞癌恶性程度和预后的重要指标 ,而且提示原发性膀胱移行细胞癌中Pgp的表达可能与其他肿瘤一样 ,受到 p5 3和EGFR等的调控。

免疫印迹法检测表皮下大疱病患者基底膜带自身抗体

目的 探讨免疫印迹法在不同自身免疫性表皮下大疱病 (SABD)患者基底膜带自身抗体 (BMZ抗体 )分布情况及其在SABD诊断和鉴别诊断中的应用价值。方法 以热分离法制备的人真皮、表皮提取物作为抗原 ,免疫印迹法检测 97例SABD患者血清中BMZ抗体与基底膜抗原结合情况。结果 不同SABD患者血清中存在结合不同真皮、表皮抗原的IgG型和 (或 )IgA型BMZ抗体。大疱性类天疱疮患者血清中IgG和 (或 )IgA型BMZ抗体主要与相对分子质量为 2 30 0 0 0、180 0 0 0、16 5 0 0 0、130 0 0 0、115 0 0 0、970 0 0的表皮多肽结合 ;线性IgA大疱病患者血清中以结合 180 0 0 0、115 0 0 0、970 0 0表皮多肽的IgA型BMZ抗体为主 ;获得性大疱性表皮松解症患者血清中IgG型和IgA型BMZ抗体特异性结合真皮提取物中 2 90 0 0 0多肽 ;大疱性系统性红斑狼疮患者血清中以结合 2 90 0 0 0真皮多肽和16 5 0 0 0、130 0 0 0、970 0 0表皮多肽的IgG型BMZ抗体为主。结论 不同SABD患者血清中BMZ抗体存在异质性 ,免疫印迹法检测表皮下大疱病BMZ抗体阳性率较高 ,可用于该类疾病的辅助诊断和鉴别诊断。

天疱疮的临床观察与护理

天疱疮是累及皮肤和粘膜的自身免疫性表皮内水疱性疾病，年发病率0．5／10万～32／10万，是皮肤科的危重疾病之一；病死率较高，多因继发感染（皮肤感染、肺部感染、败血症或中毒性休克等）而死亡。合理治疗、精心护理及健康教育对本病的预后及转归有着重要的意义。1999年1月至2003年12月我科共收治了各类天疱疮病人48例，现将其临床观察与护理体会报告如下。

大鼠急性肺损伤时Ang-2/Tie-2的表达及意义

目的:探讨血管生成素-2(Ang-2)及其受体具有免疫球蛋白和表皮生长因子同源性结构域的酪氨酸蛋白激酶-2(Tie-2)在大鼠急性肺损伤(ALI)时的表达及意义。方法:42只Wistar大鼠随机分为对照组12只,采用假手术处理;CLP组30只,采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制作ALI模型,于假手术及CLP术后12h每组各处死6只大鼠,进行动脉血气分析,取左肺计算肺系数,采用免疫组织化学法检测Tie-2及Ang-2在鼠肺组织中的表达,酶联免疫吸附试验检测血清Ang-2的水平,观察36h内2组鼠死亡率。结果:光镜下对照组鼠肺组织结构清楚;CLP组肺泡间隔增厚,毛细血管充血水肿,有中性粒细胞及巨噬细胞浸润。对照组在支气管上皮细胞、平滑肌细胞及内皮细胞表达Tie-2;CLP组Tie-2表达与对照组相似外,中性粒细胞及巨噬细胞有强阳性表达,在Tie-2阳性的炎症细胞附壁区域,内皮细胞Tie-2表达亦增强。对照组Ang-2主要表达于平滑肌细胞、支气管上皮细胞及内皮细胞,CLP组Ang-2在炎症渗出区的巨噬细胞表达增强,其它与对照组相似。CLP组血清Ang-2水平(8.14±1.74)μg/L明显高于对照组(4.63±0.49)μg/L(P<0.01),且CLP组36h内死亡鼠Ang-2血清水平(8.95±1.61)μg/L显著高于存活鼠(6.80±0.96)μg/L(P<0.01);CLP组动脉血氧分压低于对照组(P<0.01),肺系数则高于对照组(P<0.01)。结论:Ang-2与Tie-2可能参与ALI的发病过程,Ang-2血清水平增高与预后有关。

天疱疮患者的护理体会

2011年3月～2012年9月对1例天疱疮患者实施的护理及健康教育，临床观察发现，天疱疮的复发率高，治疗效果与各项护理及健康教育有直接关系。天疱疮是累及皮肤和黏膜的自身免疫性表皮内水疱性疾病，