异钩藤碱调节EGFR/FAK信号通路对肝癌细胞增殖、迁移和5-FU耐药性的影响

目的探讨异钩藤碱调节表皮生长因子受体(EGFR)/局部黏着斑激酶(FAK)信号通路对肝癌细胞增殖、迁移和5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药性的影响。方法取对数生长期的HepG2细胞,分为对照组,异钩藤碱低、中、高浓度(32.5、65.0、130.0μmol·L^(-1))组,异钩藤碱(130μmol·L^(-1))+EGFR激活剂NSC228155(2μmol·L^(-1))组;对数生长期的5-FU耐药肝癌细胞系HepG2/5-FU分为对照组、异钩藤碱(130μmol·L^(-1))组、5-FU(60μmol·L^(-1))组、异钩藤碱(130μmol·L^(-1))+5-FU(60μmol·L^(-1))组、异钩藤碱(130μmol·L^(-1))+5-FU(60μmol·L^(-1))+NSC228155(2μmol·L^(-1))组。给药处理24 h,对照组不给药。EdU染色、CCK-8检测HepG2或HepG2/5-FU细胞增殖;划痕实验检测HepG2或HepG2/5-FU细胞迁移;Western blotting检测细胞中细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、迁移侵袭增强子因子1(MIEN1)、P-糖蛋白(P-gp)、p-EGFR、p-FAK蛋白表达。结果与对照组相比,异钩藤碱低、中、高浓度组EdU阳性率、吸光度(A450)值、划痕愈合率、CyclinD1、MIEN1、p-EGFR、p-FAK蛋白表达显著降低,且呈浓度相关性(P<0.05);与异钩藤碱130.0μmol·L^(-1)组相比,异钩藤碱+NSC228155组HepG2细胞EdU阳性率、A450值、划痕愈合率、CyclinD1、MIEN1、p-EGFR、p-FAK蛋白表达显著升高(P<0.05)。与对照组相比,5-FU组HepG2/5-FU细胞EdU阳性率、A450值、划痕愈合率、P-gp、p-EGFR、p-FAK蛋白表达显著降低(P<0.05);与异钩藤碱组、5-FU组相比,异钩藤碱+5-FU组HepG2/5-FU细胞EdU阳性率、A450值、划痕愈合率、P-gp、p-EGFR、p-FAK蛋白表达降低(P<0.05);与异钩藤碱+5-FU组相比,异钩藤碱+5-FU+NSC228155组HepG2/5-FU细胞EdU阳性率、A450值、划痕愈合率、P-gp、p-EGFR、p-FAK蛋白显著上调(P<0.05)。结论异钩藤碱抑制HepG2细胞增殖、迁移及降低5-FU耐药性的机制可能与阻断EGFR/FAK通路有关。