表皮生长因子受体单克隆抗体对辐射诱导肺腺癌细胞SPC-A-1的增敏作用

目的:探讨表皮生长因子受体单克隆抗体(C225)作为靶向治疗药物联合放射治疗对肺腺癌细胞系(SPC-A-1)的增敏作用,为临床综合治疗非小细胞肺癌提供理论依据。方法:SPC-A-1细胞体外传代培养6代以上,取对数生长期细胞进行实验。SPC-A-1细胞分为对照组(PBS)、照射组(4 Gy)、C225组(100 nmol.L-1)和照射+C225组(4Gy+100 nmol.L-1),Hoechst 33258染色后采用荧光显微镜观察细胞凋亡情况。SPC-A-1细胞分别给予0、2、4和8 Gy 6-MV X射线照射后继续培养72 h,收集细胞,分为照射组和实验组(照射+C225组),用流式细胞仪检测细胞凋亡率。SPC-A-1细胞分为对照组(PBS)、C225组(100 nmol.L-1)、照射组(8 Gy)和照射+C225组(8 Gy+100 nmol.L-1),作用48 h后,采用流式细胞仪检测细胞周期。结果:Hoechst33258染色后,照射+C225组凋亡细胞数明显高于照射组和C225组;细胞凋亡实验,实验组细胞凋亡率明显高于相应剂量照射组(P<0.05)。细胞周期检测,与对照组比较,C225组G0+G1期细胞增加(P<0.05),照射组G2+M期细胞增加(P<0.05),而照射+C225组G0+G1和G2+M期细胞均增加(P<0.05);与对照组比较,C225组、照射组及照射+C225组S期细胞均下降(P<0.05)。结论:C225对SPC-A-1细胞系有放射增敏作用,其机制可能与诱导细胞凋亡和细胞周期G0+G1期阻滞有关。

表皮生长因子受体单克隆抗体抗肺癌作用的研究

目的 实验观察表皮生长因子受体单克隆抗体(EGFR McAb)egf/r3对肺癌的治疗作用。方法 体外细胞增殖抑制实验采用MTT法,裸鼠体内移植瘤采用同时治疗(T1组)与延后治疗(T2组)两种方案。结果 egf/r3 McAb对高表达EGFR的SPC-A1 和A549 肺癌细胞体外均具有增殖抑制作用,并呈剂量依赖性;以SPC-A1 进行裸鼠皮下移植做体内实验,至治疗结束,T1 组50 % 成瘤(3/6),对照组100 % 成瘤(6/6);至实验结束,T1组与T2 组瘤体抑制率分别为75 % 与67 % ,瘤重抑制率分别为65 % 与47 % 。病理切片显示治疗组肿瘤组织局部坏死,电镜示线粒体凝缩、嵴断裂、溶解。结论 egf/r3 McAb 部分抑制肺癌细胞成瘤,明显延缓已成瘤肺癌生长,具有一定的抗肺癌作用。其体内抗瘤效果强于体外。

抗表皮生长因子受体单克隆抗体引起离子紊乱的研究进展

抗表皮生长因子受体(EGFR)单克隆抗体对多种实体肿瘤的治疗具有重要意义,但这类药物可引起离子紊乱如低镁血症、低钙血症和低钾血症,早期症状因不够典型而容易被忽视。EGFR较多的表达于肾远曲小管和集合管,而抗EGFR单克隆抗体抑制了离子在肾髓袢升支粗段的重吸收,从而使镁离子在尿中的排泄增多,低镁血症继而引起低钙血症和低钾血症。不同的靶向药物以及不同肿瘤发生部位所出现的离子紊乱情形各有不同。低镁血症发生的风险与治疗时间、患者年龄及基础血清镁值相关。低镁血症倾向于可作为预后较佳的预测因素。3级或4级低镁血症需要延长靶向治疗间隔时间,同时静脉补充离子治疗,通常低镁血症是可逆的。该文参考既往的临床试验和研究,讨论离子紊乱的发生率、机制、危险因素、治疗以及疗效预测。

表皮生长因子受体单克隆抗体在结直肠癌治疗中作用的系统评价

背景:研究表明表皮生长因子受体(EGFR)信号通路可调节细胞的分化、增殖、迁移、凋亡以及血管发生。近年来,靶向EGFR的单克隆抗体拓宽了结直肠癌治疗的选择范围。目的:系统评价EGFR单抗联合结直肠癌治疗方案在结直肠癌治疗中的疗效和安全性。方法:从常用电子数据库中检索结直肠癌治疗方案联合与未联合EGFR单抗治疗结直肠癌的随机对照试验,分析反应率和不良反应发生率的合并比值比(OR),行亚组分析和敏感性分析,以漏斗图检测出版偏倚。结果:共7项随机对照试验(n=4186)纳入分析。联合与未联合EGFR单抗(治疗组和对照组)的反应率按意向治疗(ITT)分析分别为25.4%和17.6%(OR 3.36,95%CI:1.42～7.95),按方案(PP)分析分别为25.6%和18.0%(0R 3.32,95%CI:1.40～7.88),治疗组反应率明显优于对照组;两组3级以上不良反应总体发生率按ITT分析分别为71.2%和54.3%(0R 2.23,95%CI:1.74～2.86),治疗组3级以上不良反应总体发生率和皮肤损害、腹泻、低镁血症发生率均高于对照组。结论:EGFR单抗可明显提高结直肠癌,尤其是转移性或进展期结直肠癌患者对治疗的反应率,伴3级以上不良反应发生率增高。

奥曲肽和表皮生长因子受体单克隆抗体诱导人胃癌细胞凋亡

目的：定量检测奥曲肽（ＳＭＳ）和表皮生长因子受体单克隆抗体（ＥＧＦＲＭＣＡｂ）对人胃癌细胞系 ＳＧＣ－７９０１的诱 导凋亡作用。方法：将不同浓度的ＳＭＳ和ＥＧＦＲＭｃＡｂ与胃癌细胞共同孵育，用流式细胞术分析其细胞凋亡情况。 结果：ＳＭＳ ５ × １０－５和ＥＧＦＲＭｃＡｂ１：１００与胃癌细胞共同孵育７２ ｈ，胃癌细胞凋亡率分别为７．９６％和７．４９％，与对 照组（１．１９％湘比，有显著差异ｐ＜０．０５）。结论：诱导细胞凋亡是胃肠肽类激素发挥其抗肿瘤作用的重要途径之一。

抗人表皮生长因子受体单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用

用人上皮癌细胞系A 431细胞作为抗原免疫BalB/c小鼠,制备七株抗人表皮生长因子受体的单克隆抗体的杂交瘤,这些杂交瘤经三次亚克隆后仍能稳定地分泌单克隆抗体。对其中四株杂交瘤分泌的单克隆抗体进行了鉴定。免疫沉淀放射自显影结果示单克隆抗体3、101和176均可识别A 431细胞膜抗原MW为170000的蛋白质即EGF受体。单克隆抗体59可以识别低分化鼻咽癌细胞膜上EGF受体。单抗3、176和59等可抑制EGF与受体的特异结合,而101和94则不能抑制EGF与受体的结合。 用Protein-A Sepharose CL4B纯化了单抗,纯化的单抗主要为IgG_1亚类。用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳对纯化的单抗进行了纯度测定。

抗体药物偶联物在人表皮生长因子受体2低表达胃癌中的应用研究进展

胃癌(GC)是极具异质性和侵袭性的消化系统恶性肿瘤之一,传统化疗药物及曲妥珠单抗等人表皮生长因子受体2(HER2)靶向药物在GC的治疗过程中仍然存在耐药性发生率高、毒副作用大、患者耐受差等缺点。因此,研发更为有效的抗GC药物势在必行。目前针对HER2的新型靶向药层出不穷,但在某些情况下无效或产生耐药,这与HER2在某些GC细胞中低表达有关,HER2低表达(HER2 IHC1+或IHC2+/ISH-)约占全部类型的40%~60%,但在临床实践中,这类患者仍被报告为HER2阴性GC。因此准确检测HER2表达状态对于确定可能受益于曲妥珠单抗治疗的患者至关重要。抗体药物偶联物(ADC)的出现为HER2阳性GC提供了新的治疗选择,凭借其精准高效的抗肿瘤作用,有望在未来替代传统GC化学疗法。近期有研究发现ADC可能在HER2低表达GC中具有潜在抗肿瘤活性,相关临床研究正在评估其在HER2低表达GC治疗中的有效性和安全性。本文就靶向治疗时代ADC在HER2低表达GC患者中的应用和最新研究进展作一综述,并讨论HER2靶向ADC在应用和研发过程中面临的挑战。

表皮生长因子受体单克隆抗体C225对肺鳞癌细胞系放射增敏作用研究

目的观察表皮生长因子受体单克隆抗体C225与^60Coγ线对人肺鳞癌细胞系（H-520）的杀伤作用，探讨C225联合照射治疗非小细胞肺癌的可行性。方法细胞成克隆实验中单纯照射（对照组）和照射＋100nmol／L C225组（实验组）给予0、1、2、4、6、8、10Gy照射，培养10d后计数〉／50个细胞克隆。采用多靶单击模型进行数据处理，拟合细胞存活曲线，计算增敏比（D0值比）。细胞凋亡实验均照射0、2、4、8Gy后继续培养72h，收集细胞，流式细胞仪检测细胞凋亡。细胞周期检测设对照组（不处理）、C225组（100nmol／L）、照射组（8Gy照射）和C225联合照射组（100nmol／L C225＋8Gy），照后48h收集细胞，流式细胞仪检测周期分布。结果细胞克隆存活实验结果表明，扣除C225毒性影响后实验组存活分数比对照组低（F=6．36，P〈0．05），增敏比为1．35。细胞凋亡实验结果显示，C225组4个剂量点凋亡百分率分别为13．75％±0．83％、25．12％±1．60％、46．12％±2．60％、50．51％±4．06％，对照组的分别为5．56％±0．62％、13．86％±0．80％、25．36％±1．02％、29．89％±2．09％（F=4．72，P〈0．05）。细胞周期分布显示100nmol／L C225可使细胞阻滞于G0＋G1期，单纯照射阻滞于G2＋M期，两者联合后同时出现G0＋G1、G2＋M期阻滞，三者均使S期细胞比例下降。结论C225对H-520细胞具有放射增敏作用，其机制可能与细胞G0＋G1期阻滞和诱发凋亡有关；结果为临床上二者联合治疗非小细胞肺癌提供了理论基础。

以人类表皮生长因子受体为靶点的乳腺癌抗体偶联药物研究进展

近年来,乳腺癌分子靶向药物研发取得了飞速发展,其中乳腺癌抗体偶联药物(ADC)是非常有前途的新型靶向治疗药物,以人类表皮生长因子受体为靶点的多种ADC(恩美曲妥珠单抗、曲妥珠单抗-德卢替康)已经获批上市,还有些处于临床试验后期(Trastuzumab Duocarmazine、维迪西妥单抗等)。另外,也有一些新型的ADC仍处于研究初级阶段,甚至因为严重的副作用终止了研究。由于细胞内作用机制和乳腺肿瘤细胞抗原表达量限制,ADC脱靶引起的副作用以及耐药性的存在阻碍了其进一步发展。为了增强细胞毒性药物疗效,新型ADC应在提高细胞毒性药物递送效率、减少脱靶效应等方面进行改良。

人源化抗表皮生长因子受体单克隆抗体质控方法的建立

目的建立人源化抗表皮生长因子受体(Epithelial growth factor receptor,EGFR)单克隆抗体的质控方法。方法采用体外细胞生长抑制试验测定人源化抗EGFR单抗的生物学活性;质谱法和还原型SDS-PAGE法测定其准确相对分子质量;去封闭后用Edman降解法测定其N-末端氨基酸序列;SDS-PAGE和分子排阻高效液相色谱(SEC-HPLC)法测定其纯度;反向液相色谱(RP-HPLC)法测定其肽图;定量PCR法和狭缝杂交法测定其外源性DNA残留量;其余项目按《中国药典》三部(2010版)要求进行。结果人源化抗EGFR单抗原液和成品的相对生物学活性分别为(100±20)%和(94±14)%;质谱法测得该单抗参考品轻、重链的相对分子质量分别为23 370.75和50 341.00,相对误差分别为0.005%和0.006%;还原型SDS-PAGE测得该单抗轻、重链的相对分子质量为27 000和53 400;轻、重链N-末端氨基酸序列均与理论一致;单抗原液的还原型SDS-PAGE纯度为98.5%;SEC-HPLC原液纯度为(98.39±0.05)%和成品SEC-HPLC纯度为(98.17±0.04)%;肽图图谱与理化参考品一致;定量PCR测得其外源DNA残留量小于100 pg/剂量;其他各项指标均符合《中国药典》三部(2010版)要求及其他相关要求。结论初步建立了人源化抗表皮生长因子受体单克隆抗体的质控方法,可用于该制品的常规质量控制。

抗表皮生长因子受体单克隆抗体对人胰腺癌裸鼠模型的化疗增敏作用

目的 观察鼠抗人EGFR单克隆抗体联合5-氟尿嘧啶（5-Fu）、健择对裸鼠胰腺癌化疗效果的影响.方法 将人胰腺癌肿瘤细胞悬液注射于裸鼠背部皮下,建立肿瘤模型.干预组腹腔分别注射鼠抗人EGFR单克隆抗体（MMAb-2）、5-Fu、健择及其配伍联合用药 对照组腹腔注射生理盐水.干预4周后处死裸鼠,切取肿瘤,测量瘤体积,取肿瘤组织送病理学检查 免疫组化法检测肿瘤组织中bax、bcl-2的表达 免疫荧光法检测肿瘤组织中细胞凋亡指数,评价干预效果.结果 5-Fu、健择联合应用MMAb-2对裸鼠胰腺癌细胞增殖的抑制作用明显增强（P＜0.05）,且能提高裸鼠胰腺癌细胞凋亡率（P＜0.05）.结论 抗EGFR单克隆抗体能有效提高化疗药物5-Fu、健择对裸鼠胰腺癌细胞抑制作用的敏感性,可明显提高胰腺癌的化疗效果.

表皮生长因子受体-TKI和表皮生长因子受体单克隆抗体联合应用治疗表皮生长因子受体T790M突变的继发耐药非小细胞肺癌的疗效

表皮生长因子受体（EGFR）在肺癌中过表达。在调节肿瘤细胞的生长、修复和生存、新生血管生成、侵袭和转移中具有重要的作用，已经成为治疗肺癌的重要靶点之一…。我们考虑由于EGFR·TKI和EGFR单克隆抗体这两类药物作用靶点的不同，而且有研究认为这两种药物联合应用可以提高疗效，因此我们提出了这两类药物联合应用可能会增强T790M突变的耐药非小细胞肺癌的疗效的假设。

抗表皮生长因子受体单克隆抗体联合5-氟尿嘧啶、健择对胰腺癌的作用

目的观察抗表皮生长因子受体（EGFR）单克隆抗体联合5-氟尿嘧啶（5-Fu）、健择对胰腺癌的作用。方法将人胰腺癌肿瘤细胞悬液注射于裸鼠背部皮下，建立肿瘤模型。干预组腹腔注射鼠抗人EGFR单克隆抗体（MMAb-2）、5-Fu、健择及其配伍联合用药；对照组注射生理盐水。干预4周后处死裸鼠，评价干预效果。结果MMAb-2单独应用对胰腺癌细胞增殖有抑制作用（P〈0．05），MMAb-2联合应用5-Fu、健择对胰腺癌细胞增殖的抑制作用明显增强（P〈0．05），MMAb-2组裸鼠体质量及其白细胞计数明显高于化疗组（P〈0．05）。结论抗EGFR抗体单独应用有确切的抗肿瘤疗效；与化疗联合应用可以增效；对裸鼠机体免疫功能无明显毒性。

表皮生长因子受体家族单克隆抗体耐药机制的研究进展

表皮生长因子受体(EGFR)家族广泛存在于体内各种细胞中,其异常活化与多种人类上皮组织肿瘤的发生、发展密切相关,因此已成为肿瘤治疗的重要靶点之一。目前靶向EGFR家族的药物包括小分子酪氨酸激酶抑制剂和单克隆抗体(简称单抗)类药物,特别是单抗类药物近年来在临床上获得了广泛的应用。但是,越来越多的临床资料表明,大量患者对这类药物表现出原发性耐药或获得性耐药。目前靶向EGFR家族单抗类药物产生耐药的原因主要包括:受体结构改变、血管生成、多种受体酪氨酸激酶的活化、EGFR的亚细胞定位、EGFR下游效应分子的持续激活和EGFR家族生长因子表达的上调等。本文就靶向EGFR家族单抗类药物耐药机制的研究进展进行综述。

表皮生长因子受体及其单克隆抗体与口腔癌

表皮生长因子受体对于多种上皮源性肿瘤的发生、侵袭、转移有促进作用。通过实验已证明它的单克隆抗体对非小细胞肺癌等肿瘤细胞在体内外均有较好的抑制作用。口腔癌目前的发病趋势逐渐增高．本文对口腔癌和表皮生长因子受体及其单克隆抗体的关系进行综述。

表皮生长因子受体单克隆抗体疗效预测因素的研究进展

近年来随着对肿瘤细胞信号转导研究的不断深入，针对细胞受体、信号转导、细胞周期和血管生成的分子靶向治疗，已成为肿瘤内科治疗的新亮点。以表皮生长因子受体（epidermalgrowthfactorreceptor，EGFR）为靶点的单克隆抗体治疗即为其中之一。

抗表皮生长因子受体单克隆抗体部分质量控制项目的趋势分析

在过去的30年,单克隆抗体已从科学工具转变为应用广泛的临床疗法[1],现广泛应用于恶性肿瘤、移植排斥、自身免疫性和传染性疾病等一系列疾病的治疗[2]。新单克隆抗体药物以每年近40种的速度进入临床研究[3],已成为近年来复合增长率较快的一类生物技术药物,约占现有生物制药研发35%[4],截至2017年初,全球有52种单克隆抗体进入Ⅲ期临床研究,超过230种单克隆抗体在Ⅱ期临床研究中[5]用于癌症治疗取得了相当大的成功[6]。基于分子水平的肿瘤靶向疗法为癌症患者提供了新的治疗机会[7],生长因子受体系统和血管生成已成为重要的治疗靶点,其中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)一直是人们关注的焦点[8-11]。

犬表皮生长因子受体2胞外Ⅳ区(her-2-ECD-4)抗原表位分析及单克隆抗体制备

为了制备犬her-2-ECD-4单克隆抗体并验证其识别的抗原序列,本研究利用TMHMM server2. 0、SWISS-MODLE、Prot Param及Sopma等分析软件,对该区域蛋白序列进行了理化性质分析、一级结构分析、二级结构分析以及三级结构建模。综合以上各数据得出犬her-2-ECD-4可能的抗原表位为ecq(56-58)、ykd(80-82)、fade(106-109)、aeqras(134-139),在此基础上针对该区域制备了单克隆抗体,获得了3株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别为3-1B10、4-1B2、6-1C7,通过对杂交瘤细胞株的鉴定发现,3-1B10和4-1B2识别同一段抗原多肽,其中包括预测出的抗原表位ykd(80-82),它们的亚类鉴定结果也相同,均为Ig G1。6-1C7识别的抗原多肽含有ecq(56-58)这个预测表位,其亚类鉴定结果为Ig M。另外,通过Western Blot分析,发现本实验制备的单克隆抗体与犬乳腺肿瘤细胞系CHmm中提取的蛋白具有良好的反应性。本研究为下一步开展犬乳腺肿瘤的肿瘤标志物筛查诊断试剂盒研制及靶向治疗提供了基础。

抗表皮生长因子受体单克隆抗体与肺癌

肺癌表皮生长因子受体表达增强,能自分泌表皮生长因子和(或)转化生长因子-α,形成自分泌环,在肺癌的发生、转移中可能起重要作用。抗表皮生长因子受体单抗能竞争性地抑制受体与配体的结合,抑制受体酪氨酸蛋白激酶活性,体内外实验表明对肺癌有抑制作用。抗表皮生长因子受体单抗可能成为一种安全,有效的肺癌治疗新方法。

^(125)I标记重组全人源抗表皮生长因子受体单克隆抗体的制备及其在荷瘤裸鼠体内的分布

目的研究;^(125)I标记重组全人源抗表皮生长因子受体(EGFR)单克隆抗体在荷瘤裸鼠体内的生物分布。方法以Iodogen法进行重组全人源抗EGFR单克隆抗体的;^(125)I标记,分离纯化。组织分布实验:荷瘤裸鼠静脉注射^(125)I-重组全人源抗EGFR单克隆抗体24 mg·kg^(-1),分别在药后4,24,72,168 h(每个时间点各5只鼠)于股动脉放血活杀,取主要脏器及体液称重并测量其放射性计数。粪尿排泄实验:6只荷瘤裸鼠静脉注射^(125)I-重组全人源抗EGFR单克隆抗体24 mg·kg^(-1),在给药后0~24,24~48……264~312 h时间段分别收集尿和粪,并测量其放射性计数。胆汁排泄实验:6只SD大鼠给予^(125)I-重组全人源抗EGFR单克隆抗体12 mg·kg^(-1),给药后于1,3,5,8,12 h收集一次胆汁测量其放射性计数。放射免疫显像实验:2只荷瘤裸鼠静脉注射^(125)I-重组全人源抗EGFR单克隆抗体0.5 mci,分别在4,24,72,168 h用单光子发射计算机断层成像术(SPECT)进行放射免疫显像。结果血中暴露水平为3681μg·h·mL^(-1)(最高),血流灌注丰富的组织器官的放射性较高,并且药物在肿瘤部位有明显蓄积,达到了2168μg·h·g^(-1)。312 h尿、粪分别排出注入放射性量的(70.08±6.15)%和(6.03±0.54)%,药物主要经尿排泄。注射后12 h的累积排泄率为(0.34±0.07)%。胆汁中未发现药物原形和放射性小分子代谢产物。各组织放射性浓度逐渐下降,而肿瘤部位的放射性浓度则逐渐增加。结论^(125)I-重组全人源抗EGFR单克隆抗体在荷瘤裸鼠体内具有肿瘤靶向定位能力,主要通过肾代谢。