表皮生长因子蛛毒素受体7次跨膜结构域1通过血管内皮生长因子信号通路调控胃癌迁移的机制研究

目的探究表皮生长因子蛛毒素受体7次跨膜结构域1(ADGRL4)通过血管内皮生长因子(VEGF)信号通路调控胃癌迁移的机制。方法将正常胃黏膜上皮细胞GES⁃1、胃癌细胞SGC⁃7901、HGC⁃27、Hs⁃746T传代培养后,检测ADGRL4表达量。将胃癌SGC⁃7901细胞分为对照组、过表达组、沉默组。对照组转染空载体,过表达组转染ADGRL4上调质粒,沉默组转染ADGRL4沉默质粒。分析并比较3组胃癌细胞侵袭、迁移数及VEGF信号通路蛋白表达量。结果与正常胃黏膜上皮细胞GES⁃1比较,胃癌细胞SGC⁃7901、HGC⁃27、Hs⁃746T中ADGRL4表达量均上升(P<0.05);与胃癌细胞HGC⁃27、Hs⁃746T比较,胃癌细胞SGC⁃7901中ADGRL4表达量较高(P<0.05),故选择SGC⁃7901进行后续实验。与对照组比较,过表达组ADGRL4表达量上升,沉默组ADGRL4表达量下降(P<0.05);与过表达组比较,沉默组ADGRL4表达量下降(P<0.05),说明ADGRL4转染成功。与对照组比较,过表达组细胞侵袭数、迁移数、基质金属蛋白酶(MMP)⁃2、MMP⁃9、VEGF、血管内皮生长因子受体⁃2(VEGFR⁃2)表达量上升,E⁃钙黏蛋白(E⁃cadherin)表达量下降,沉默组细胞侵袭数、迁移数、MMP⁃2、MMP⁃9、VEGF、VEGFR⁃2表达量下降,E⁃cadherin表达量上升(P<0.05);与过表达组比较,沉默组细胞侵袭数、迁移数、MMP⁃2、MMP⁃9、VEGF、VEGFR⁃2表达量下降,E⁃cadherin表达量上升(P<0.05)。结论胃癌细胞经下调ADGRL4干预后,侵袭、迁移数减少,迁移、侵袭相关蛋白表达量得到调节,其机制可能与VEGF通路受到抑制有关。

肾组织血小板反应蛋白1型结构7A域及神经表皮生长因子样蛋白-1 检测在M型磷脂酶A2受体阴性膜性肾病中的临床意义

目的探讨肾组织血小板反应蛋白1型结构7A域(THSD7A)及神经表皮生长因子样蛋白-1(NELL1)检测在M型磷脂酶A2受体(PLA2R)阴性膜性肾病中的诊断及治疗指导意义。方法选取浙江中医药大学附属杭州市中医院2014至2021年肾穿刺活检确诊为PLA2R阴性膜性肾病共116例,通过免疫组织化学方法检测肾组织THSD7A及NELL1的阳性表达情况,比较各组间临床病理特征及治疗与预后。结果116例PLA2R阴性膜性肾病中THSD7A阳性23例,NELL1阳性9例,其中两者双阳性1例。THSD7A阳性较阴性者IgG4阳性率更高(P=0.010);膜性肾病Ⅰ期占比更少,Ⅱ期占比更多(P=0.002);基底膜增厚更明显(P=0.034)。NELL1阳性较阴性者C1q及IgG2的阳性率更低(P=0.029,P=0.001);炎细胞浸润更多(P=0.033);多部位沉积物更少(P=0.001);基底膜增厚更不明显(P<0.001);不典型膜性肾病比例更低(P=0.010)。继发因素分析显示THSD7A阳性者有1例确诊为乙状结肠癌,NELL1阳性者均未发现恶性肿瘤。生存分析提示THSD7A阳性组肾病复合缓解率(完全缓解或部分缓解)显著低于阴性组(P=0.016),而NELL1阳性组肾病复合缓解率显著优于阴性组(P=0.015),两指标单一阳性组间比较显示NELL1单一阳性组肾病复合缓解率显著优于THSD7A单一阳性组(P<0.001)。结论THSD7A及NELL1阳性膜性肾病更倾向于原发性膜性肾病,且无恶性肿瘤提示价值,但对膜性肾病患者的预后具有一定的预测价值。

表皮生长因子样结构域-7在宫颈癌组织中的表达及其与临床病理特征和预后的关系

目的探究表皮生长因子样结构域-7(EGFL7)在宫颈癌组织中的表达及其与临床病理特征和预后的关系。方法选取2015年2月至2016年3月于大连市第五人民医院妇科住院治疗的宫颈癌患者(n=40)及非宫颈癌患者(n=20)作为研究对象。采集宫颈癌患者宫颈癌组织及非宫颈癌患者正常宫颈组织,采用免疫组化法检测EGFL7在宫颈癌组织及正常宫颈组织中的表达水平,并分析EGFL7表达水平与宫颈癌患者临床病理特征和预后的关系。结果宫颈癌组织中EGFL7阳性表达率为70.00%,高于正常宫颈组织的10.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。EGFL7表达水平与宫颈癌患者脉管浸润相关(P<0.05);与患者年龄、分化程度、组织类型、浸润深度、国际妇产科联盟(FIGO)分期及淋巴结转移无关。EGFL7阳性表达患者中位生存期为15.97个月,短于EGFL7阴性表达患者的26.70个月,差异有统计学意义(P<0.05)。经COX比例风险回归模型分析,脉管浸润及EGFL7高表达均为影响宫颈癌患者预后的独立风险因素(P<0.05)。结论EGFL7高表达于宫颈癌组织,其表达水平与宫颈癌患者FIGO分期及脉管浸润相关,且脉管浸润及EGFL7表达水平均为影响宫颈癌患者预后的独立风险因素,EGFL7有望成为肿瘤治疗的新靶点,可为探究宫颈癌预后分子标志物提供新的参考。

表皮生长因子样结构域7(EGFL7)在侵袭性垂体腺瘤中的表达及临床意义

目的探讨表皮生长因子样结构7(EGFL7)蛋白在侵袭性垂体腺瘤中的表达及与侵袭性关系。方法应用免疫组化(S-P)方法检测32例侵袭性垂体腺瘤和10例正常脑组织中EGFL7蛋白的表达情况。结果 EGFL7蛋白在侵袭性垂体腺瘤组织和正常脑组织中的阳性表达率差异有显著统计学意义(P<0.05)。结论 EGFL7蛋白在侵袭性垂体腺瘤中的表达率明显高于正常脑组织,表明其可能直接参与了侵袭性垂体腺瘤的发生及侵袭过程;在肿瘤的生长、侵袭过程中表现了较强的作用,针对肿瘤EGFL7蛋白的表达可以有效进行阻断,从而针对肿瘤的生长与侵袭能够有效起到抑制作用,为肿瘤患者的临床治疗铺开了新的道路。

子痫前期孕妇外周血、胎盘组织中信号肽⁃CUB⁃表皮生长因子样结构域蛋白2的表达及意义

目的探讨信号肽⁃CUB⁃表皮生长因子样结构域蛋白2(Signal peptide⁃CUB⁃EGF⁃like domain⁃containing protein,SCUBE2)在子痫前期孕妇外周血及胎盘组织中的表达及临床意义。方法选取2021年6月至2022年6月住院分娩的子痫前期患者58例,其中早发型子痫前期30例(发病妊娠周数<34周),晚发型子痫前期组28例(发病妊娠周数≥34周);另选取30例足月正常分娩孕妇作为对照组。收集入院治疗前孕妇的血清样本以及分娩时新鲜胎盘组织标本。ELISA检测三组孕妇血清SCUBE2、VEGFR2表达水平,免疫组化检测三组胎盘组织中SCUBE2的定位及表达,Western blot实验及实时荧光定量PCR(RT⁃qPCR)实验检测三组胎盘组织中SCUBE2、VEGFR2的表达水平。结果免疫组化法检测显示,SCUBE2主要表达于胎盘合体滋养细胞及胎盘血管内皮细胞中,子痫前期组表达水平低于对照组,早发型子痫前期组表达低于晚发型子痫前期组;Western blot及RT⁃qPCR实验检测结果显示,三组孕妇胎盘中SCUBE2和VEGFR2蛋白及mRNA相对表达量比较,差异有统计学意义(P<0.05),子痫前期组表达量低于对照组,其中早发型子痫前期组表达量低于晚发型子痫前期组(P<0.05);ELISA法检测显示,三组孕妇血清中SCUBE2及VEGFR2表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),子痫前期组低于对照组,其中早发型子痫前期组表达量低于晚发型子痫前期组(P<0.05),子痫前期组孕妇血清SCUBE2与VEGFR2表达量呈正相关(r=0.6022,P<0.0001)。结论SCUBE2在孕妇血清中及胎盘组织表达量降低可能参与子痫前期的发生发展。

普萘洛尔治疗增殖期血管瘤患者血管内皮生长因子-A及表皮生长因子样结构域7的表达分析

目的对普萘洛尔治疗增殖期婴幼儿血管瘤的临床疗效和治疗过程中血清及尿液血管内皮生长因子-A（VEGF-A）和表皮生长因子样结构域7（EGFL7）表达水平进行检测分析。方法选择30例婴幼儿增殖期血管瘤患者为研究对象,口服普萘洛尔治疗4-8个月,口服剂量为每天0.5-2 mg·kg^-1。采用B超测量治疗前后瘤体的半径,采用Achauer疗效评定法进行临床疗效评估。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测治疗前、治疗后4周、治疗后12周血清及尿液中VEGF-A和EGFL7水平。结果治疗效果评价：2例优,11例好,14例中等,3例差。治疗前血清VEGF-A水平最高（335.692 pg·mL^-1±136.146 pg·mL^-1）,治疗后4周（264.853 pg·mL^-1±122.120 pg·mL^-1）和治疗后12周（211.345 pg·mL^-1±104.035 pg·mL^-1）呈逐渐下降趋势,治疗后4、12周血清VEGF-A水平低于治疗前（P〈0.05）。治疗前尿液VEGF-A水平最高（76.234 pg·mL^-1±24.169 pg·mL^-1）,治疗后4周（56.454 pg·mL^-1±16.111 pg·mL^-1）和治疗后12周（34.728 pg·mL^-1±12.656 pg·mL^-1）呈逐渐下降趋势,治疗后4、12周尿液VEGF-A水平低于治疗前（P〈0.05）。血清和尿液中EGFL7的表达趋势与VEGF-A一致。结论普萘洛尔能够安全有效地治疗增殖期婴幼儿血管瘤。普萘洛尔能降低增殖期婴幼儿血管瘤患者外周血清和尿液中VEGF-A和EGFL7水平。

细胞角蛋白18片段M65和表皮生长因子样结构域蛋白7在结直肠癌患者中的表达及临床价值

目的探讨细胞角蛋白18片段M65和表皮生长因子样结构域蛋白7(EGFL7)在结直肠癌(CRC)患者血清中的表达情况及意义,并分析其与患者病理参数的相关性。方法收集初诊确诊的CRC患者46例、非肠道肿瘤对照患者43例,并收集其基本病理资料包括性别、年龄、瘤体大小、TNM分期以及是否淋巴结转移等。ELISA测定血清中M65、EGFL7的浓度;用Mann-Whitney U检验分析M65、EGFL7在不同患者之间的表达差异以及在不同病理参数的患者间的表达情况差异,受试者工作特征(ROC)曲线用于评价M65、EGFL7以及二者联合检测对CRC的诊断效能。免疫组化法检测CRC肿瘤细胞Ki67表达情况,并将血清M65、EGFL7水平与肿瘤细胞增殖能力进行Pearson相关性分析。结果CRC患者血清M65与EGFL7水平较对照组均显著升高,差异有统计学意义(U=290.5,P<0.0001;U=599,P=0.0012);ROC曲线分析显示M65与EGFL7联合检测筛查CRC的敏感性和特异性分别为86.96%和81.84%,曲线下面积(AUC)为0.9090(95%CI:0.8456~0.9724);不同瘤体大小的CRC患者M65表达水平差异有统计学意义(U=150,P=0.0380),而不同瘤体大小、不同TNM分期以及有无淋巴结转移的CRC患者间EGFL7差异均有统计学意义(U=128,P=0.0091;U=129,P=0.0050以及U=156,P=0.0208);M65、EGFL7表达水平与CRC患者肿瘤细胞增殖能力均未见相关性。结论M65、EGFL7水平在CRC中表达升高,二者联合可有效诊断CRC。EGFL7与患者的临床病理特征的相关性更强,且与患者淋巴结转移与否具有显著的相关性,是CRC疾病预后判断及转移评估的优良标志物。

胰岛素样生长因子1对成骨细胞中BMP-2、BMP-7基因表达的影响

目的 研究胰岛素样生长因子1(IGF-1)对成骨细胞中BMP-2、BMP-7基因表达的影响,探讨IGF-1促进成骨细胞增殖、分化的分子机理。方法 以不同浓度的IGF-1刺激分离培养的大鼠成骨细胞,提取细胞总RNA,RT-PCR扩增BMP-2及BMP-7基因cDNA,同时扩增管家基因β-actin作为内对照。扫描PCR产物电泳照片,计算BMP-2/β-actin及BMP-7/β-actin的积分光密度比值,推算BMP-2及BMP-7基因的相对表达水平。结果 IGF-1可以在转录水平增加大鼠成骨细胞中BMP-2及BMP-7基因的表达,并呈明显的剂量依赖关系。结论IGF-1促进成骨细胞增殖、分化的作用可能是通过增加BMP-2及BMP-7基因的表达来实现的。

胰岛素样生长因子结合蛋白7基因在胃癌细胞中的表达及甲基化调控

目的研究胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7)mRNA在胃癌细胞中的表达及其甲基化调控。方法分别培养胃癌细胞株高分化MKN-28、中分化SGC-7901和AGS、低分化MKN-45以及胃黏膜正常上皮细胞(GES-1)。提取细胞RNA,采用RT-PCR法检测IGFBP7mRNA在各细胞株中的表达。提取细胞基因组DNA,甲基化修饰后采用甲基特异性PCR(MSP)分析其CpG岛甲基化状态。采用不同浓度去甲基化药物5’-杂氮-2’-脱氧胞嘧啶(5-aza-dc)处理细胞株后,经Real-timePCR定量药物处理前后各细胞株IGFBP7mRNA的相对表达量。结果各肿瘤细胞株中IGFBP7mRNA表达较GES-1降低或消失。MSP检测IGFBP7mRNA表达降低和消失的细胞株均有CpG岛不同程度的甲基化。不同浓度5-aza-dc处理细胞后,IGFBP7mRNA的表达量呈剂量依赖性增高。结论IGFBP7mRNA在胃癌细胞株中低表达或不表达,其表达下调与其CpG岛甲基化有关。5-aza-dc可使IGFBP7mRNA表达降低的胃癌细胞株重新表达IGFBP7mRNA,提示IGFBP7基因CpG岛甲基化可能是IGFBP7在胃癌细胞系中表达缺失的分子机制。

以肺黏液表皮样癌为主的多原发肺癌合并表皮生长因子受体突变1例并文献复习

肺黏液表皮样癌(pulmonary mucoepidermoid carcinoma,PMEC)是一种少见的肺恶性肿瘤,约占肺部原发肿瘤的0.2%^([1-5])。PMEC临床特点不典型,病理组织成分比较复杂,术前诊断困难,最好的治疗方法是手术切除,放化疗效果不理想^([6-11])。分子靶向治疗使肺癌进入精准分子治疗时代,免疫治疗开创了人类肿瘤治疗的新篇章,但PMEC的靶向治疗、免疫治疗等经验较少。由于PMEC发病率低,国内外文献较少,多为个案报道,所以其临床表现、病理学特征、组织学特征、影像学特征、临床诊断与治疗、术后辅助治疗、预后等缺乏总结。

CD326分子胞外区表皮生长因子样结构域融合蛋白的表达与纯化

目的:构建含有CD326分子胞膜外区EGF-like 1、EGF-like 2以及EGF-like1+2结构域的真核表达载体,在COS7细胞中表达相应蛋白并纯化。方法:用PCR扩增编码EGF-like 1、EGF-like 2以及EGF-like 1+2结构域的cDNA,插入真核表达载体pSecTag2B,脂质体法转染COS-7细胞,利用重组蛋白C端的组氨酸标签(6×His-tag)进行金属螯合亲和层析纯化,最后用SDS-PAGE和Western blot法检测纯化的包含EGF-like 1、EGF-like 2以及EGF-like 1+2结构域融合蛋白的纯度。结果:序列测定的结果显示含有CD326分子胞膜外区EGF-like 1、EGF-like 2以及EGF-like 1+2结构域序列的载体构建正确。经Ni2+-NTA树脂柱亲和层析纯化得到3种融合蛋白,相对分子质量(Mr)分别约为3 600,7 700和12 000。纯度均约为95%。Western blot检测结果显示3种融合蛋白都具有下游的c-myc表位。结论:成功构建了含有CD326分子胞外区EGF-like 1、EGF-like 2以及EGF-like 1+2结构域的真核表达载体,并在COS-7细胞中表达。为制备抗CD326分子不同结构域的单克隆抗体提供了免疫原。

胰岛素样生长因子结合蛋白-7基因的克隆和表达

IGFBP-7是胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)家族中的一员,具有一些抑癌基因的特征。利用重组PCR技术获得了IGFBP-7基因的全长编码区序列,并将其克隆到pcDNA3.1/His-Myc真核表达载体中,得到重组质粒pcDNA3.1/His-Myc-IGFBP-7。将该重组质粒瞬时转染人胚胎肾293T细胞,Western-blot分析表明,IGFBP-7在293T细胞中获得了表达,为进一步研究IGFBP-7的功能奠定了基础。

胰岛素样生长因子结合蛋白7早期识别急性心力衰竭患者心脏结构和功能异常的价值

目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白-7(IGFBP 7)水平早期识别急性心力衰竭患者心脏结构和功能异常的价值。方法前瞻性选取2018年3月至2020年5月于内江市第二人民医院就诊治疗的156例急性心力衰竭患者为研究对象,入院时测量患者IGFBP 7水平,根据IGFBP 7水平的中位数102.5 nmL分为高水平组和低水平组,每组78例。另纳入同期健康体检者70例为对照组。使用Spearman线性方程分析IGFBP 7水平与急性心力衰竭患者心脏结构和功能指标的相关性;使用ROC评估高IGFBP 7独立诊断的价值。结果两组患者心功能及结构指标比较差异均有统计学意义(P<0.01),Spearman相关分析显示IGFBP 7水平与急性心力衰竭患者心功能及结构指标均具相关性,其中与左心室质量指数(LVMI)、左心室收缩末期容积指数(LVESVi)、右心室收缩末期面积(RVESA)、左心房容积指数(LAVi)、E峰速度(E)、S峰速度(S)、S/D峰速度(D)、E/二尖瓣e峰(e′)具显著相关性(r=0.501、0.765、0.519、0.547、0.616、-0.579、-0.651、0.572,P<0.01);ROC显示高IGFBP 7水平诊断急性心力衰竭的AUC为0.860(95%CI=0.750~0.869),敏感度为72.06%,特异度为79.32%。结论IGFBP 7水平与急性心力衰竭患者结构和功能指标具显著相关性,可作为急性心力衰竭患者的诊断生物标志物。

Toll样受体4和类表皮生长因子域7在肾上腺皮质癌中的表达及其意义

目的探讨Toll样受体4(TLR4)和类表皮生长因子域7(EGFL7)在肾上腺皮质癌(ACC)中的表达及其临床意义。方法选取手术切除且具有完整临床资料的肾上腺皮质肿瘤石蜡封片标本48例,其中良性组20例,恶性组(ACC组)28例。采用免疫组化技术,检测并分析良、恶性肾上腺皮质肿瘤中TLR4和EGFL7的表达情况。结果 TLR4在ACC组中呈高表达状态(20/28,71.43%),在良性组中阳性表达率较低(5/20,25.00%),ACC组与良性组之间TLR4的表达有显著统计学差异(P<0.01);EGFL7在ACC组中的阳性表达率为64.29%(18/28),良性组中为20.00%(4/20),两者之间有显著性差异(P<0.05)。结论 TLR4和EGFL7在ACC中阳性表达率较高,可作为鉴別良、恶性肾上腺皮质肿瘤的分子标记物,有望为抗肿瘤靶向治疗在ACC中的应用提供相应的理论依据。

胰岛素样生长因子结合蛋白-4的基因结构及表达调控研究

IGFBP-4是分子最小的IGFBP,它以糖基化和非糖基化两种形式存在于所有的生物流体中。表达IGFBP-4的细胞和组织极其广泛,并且其表达调控机制也因细胞类型不同而有所差异。本文主要是对IGFBP-4的基因组成、基因表达与调控、IGF-BP-4蛋白结构与功能的关系进行了综述。

信号肽-CUB-表皮生长因子样结构域蛋白家族作为辅助受体/配体参与胚胎发育和疾病发生

背景:信号肽-CUB-表皮生长因子样结构域蛋白(signal peptide-CUB-EGF-like domain-containing protein,SCUBE)可作为辅助受体和/或配体激活骨形态发生蛋白、血管内皮生长因子、转化生长因子β和刺猬因子等信号通路,在多种生理和病理过程中扮演着重要的角色。目的:综述国内外相关文献,总结SCUBE家族成员的结构与功能,以及在胚胎发育和疾病发生方面作用的研究进展。方法:第一作者应用计算机检索2000-2021年期间收录在PubMed和CNKI数据库的相关文章,英文检索词为“SCUBE,EGF family,structure and function,co-receptor,signaling pathways,embryonic development,disease,mechanism,tumor,protein,gene”,中文检索词为“SCUBE,表皮生长因子家族,结构功能,辅助受体,信号通路,胚胎发育,疾病,机制,肿瘤,蛋白,基因”。最终选择68篇文献进行综述。结果与结论:①SCUBE家族包括SCUBE1,SCUBE2,SCUBE3,家族成员共同拥有5个相似的结构域,包括1个氨基端的信号肽序列,9个串联排列的表皮生长因子样重复序列,1个氨基糖基化间隔区,3个富含半胱氨酸的结构域和1个羧基端的CUB样结构域;②SCUBE家族成员可作为辅助受体和/或配体,通过其特殊的CUB样结构域结合激活包括骨形态发生蛋白、转化生长因子β和血管内皮细胞生长因子在内的多条信号通路并产生相应的生物学效应;③SCUBE家族成员广泛表达于多种组织和器官,在脊椎动物胚胎发育过程中有着动态的表达模式;④SCUBE家族与疾病发生密切相关,可作为骨和牙齿发育异常、血管异常增生、自身免疫疾病和肿瘤等疾病的关键治疗靶点;⑤SCUBE家族成员在胚胎发育和疾病发生方面扮演着重要的角色,不仅可以作为疾病的治疗靶点,未来在组织工程领域再生也有着广泛的应用前景,但其具体功能和机制仍有待研究者们进一步深入研究。

胰岛素样生长因子结合蛋白7的研究进展

胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7)是胰岛素样生长因子结合蛋白超家族(IGFBPs)中一名新成员。与其他结合蛋白一样,它能与胰岛素样生长因子(IGFs)相结合,携带、转运IGF,延长IGF的半衰期,调控IGF的生物活性;更为重要的是,IGFBP7具有许多不依赖于IGF的生物作用,可参与多种类型的组织细胞的生长、发育、分化衰老与癌变等病理生理学过程。

人胰岛素样生长因子1受体β结构域蛋白的原核表达及活性检测

目的构建人胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)β亚基胞外结构域(ED)和胞内激酶(PKD)结构域的原核表达载体,获得纯化的GST-IGF1Rβ-ED和GST-IGF1Rβ-PKD融合蛋白,并检测其活性。方法用PCR方法从乳腺cDNA文库中扩增IGF1Rβ-ED和GST-IGF1Rβ-PKD基因编码序列,将其正确插入pGEX-KG载体。重组质粒转化大肠杆菌Rossate表达后,用GST-Sepharose 4B珠子纯化融合蛋白,并用Western blot法检测融合蛋白表达,最后用GST pull-down技术检测纯化蛋白与已知蛋白表皮生长因子受体2驱动的细胞运动调节蛋白(MEMO)的相互作用。结果构建得到GST-IGF1Rβ-ED和GST-IGF1Rβ-PKD基因的原核表达载体,双酶切鉴定得到与预期片段大小相符的外源基因插入片段,测序后与目的序列一致;在Rossate菌中诱导表达出与预期位置相符的目的蛋白,并经过Western blot检测,融合蛋白成功表达;纯化得到GST-IGF1Rβ-ED和GST-IGF1Rβ-PKD两个融合蛋白,GST pull-down证明蛋白GST-IGF1Rβ-PKD可以和MEMO相互作用。结论成功克隆GST-IGF1Rβ-ED和GST-IGF1Rβ-PKD基因,并获得活性良好的GST-IGF1Rβ-ED和GST-IGF1Rβ-PKD蛋白。

在Prrx1^+骨髓间充质干细胞中过表达肝素结合表皮生长因子样生长因子抑制小鼠骨发育

背景:肝素结合表皮生长因子样生长因子对骨骼的发育十分重要,但目前尚未报道过体内骨髓间充质干细胞来源的肝素结合表皮生长因子样生长因子对骨发育的影响。目的:探究在骨髓间充质干细胞中过表达肝素结合表皮生长因子样生长因子对骨发育的影响并初步分析相关机制。方法:利用Cre-LoxP系统构建在Prrx1^+骨髓间充质干细胞中过表达肝素结合表皮生长因子样生长因子(ROSA26^tm1(HB-EGF);Prrx1-Cre)的小鼠模型,取骨组织切片染色进行组织学分析。取小鼠骨髓间充质干细胞进行体外培养,进行分化能力检测和分子机制研究。实验于2015年经上海交通大学实验动物管理、学术、伦理与使用委员会批准,批准号为A2015027。结果和结论:①Prrx1在成年小鼠股骨关节头、生长板、骨小梁表面和骨膜上均有表达;②ROSA26^tm1(HB-EGF);Prrx1-Cre小鼠股骨变短,骨量明显减少,软骨形态和结构异常,出现骨关节炎样表型;③ROSA26^tm1(HB-EGF);Prrx1-Cre小鼠骨髓间充质干细胞体外成骨、软骨分化减弱。结果提示在骨髓间充质干细胞中过表达HB-EGF可能通过削弱骨髓间充质干细胞成骨、软骨分化抑制小鼠骨发育。

人表皮生长因子及其在化妆品中的应用

通过文献调研 ,综述了新型生物功能性化妆品添加剂———人表皮生长因子 (humanEpidermalGrowthFactor,简称 :hEGF)的发现史、来源、结构与生物活性 ,以及hEGF与EGFR的作用机理 ;还综述了hEGF的 3种生产方法 ,重点介绍了物美价廉的基因重组hEGF的生产和表达特点。同时 ,引入从细胞层次营养肌肤的生物美容理念 ,展望了hEGF在化妆品中的广阔应用前景和含hEGF化妆品独特的生物美肤功能。旨在进一步指导实践 ,开发系列hEGF功能性化妆品。