表皮细胞培养条件的优化

目的探讨生长因子（EGF）在人表皮细胞无血清培养中的作用，寻找较好组合．以期加快表皮细胞成皮。方法选择EGF、胰岛素、霍乱毒素、氢化考的松4个实验因素，每个因素设立4个浓度水平。利用L16（4X4）正交表设计试验，考察不同培养条件对表皮细胞生长情况、克隆形成率的影响。结果EGF在无血清培养中对培养人表皮细胞的生长及增殖有明显促进作用（P〈0．01），在一定范围内（5～20ng／m1）随EGF浓度提高，效应加强；胰岛素浓度在5g／ml时对培养细胞的生长及增殖影响最大；霍乱毒素浓度在4．2ng／ml时作用最好；氢化考的松作用不明显。EGF、胰岛素、霍乱毒素、氢化考的松分别取20ng／ml、5μg／ml、8．4ng／ml、0．2μg／ml浓度时细胞生长及增殖效果最好。结论采用此优化的培养方法，表皮细胞的生长比较迅速，分化不太明显，可保持较旺盛的增殖力。

CHIMEHERB中的有效成分对表皮细胞培养生长的影响

为观实CHIMEHERB有效成分,对新生小白鼠和人包皮外板的表皮细胞的生长影响,本文对7个实验浓度13次实验,112组592个组织块进行了组织培养的资料分析和机理的初步探讨,结果说明CHIMEHERB对表皮细胞无任何毒副作用,能100％的促进表皮细胞的生长.其相对生长率:小白鼠组为142.73％,人包皮外板组为440.58％,实验结果与临床应用效果一致.

人表皮细胞培养及初步用于异体创面的覆盖

大面积深度烧伤病人如何获得足够的皮源,是当今烧伤治疗中仍未解决的难题,我科在体外表皮细胞培养成功的基础上,进行了以人工皮(BloFill)为底物的空气-液体界面培养,培养BioFill上的单层表皮细胞膜片,并初步应用于6例烧伤患者,获得成功,结果报告如下。

以Ⅰ型胶原为基底的表皮细胞培养法

目的 :介绍以Ⅰ型胶原为基底的表皮细胞培养法的优点。方法 :从鼠尾中提取Ⅰ型胶原蛋白 ,制备胶原膜作培养皿基底 ,进行表皮细胞培养 ,并比较 4种不同基底的培养方法。结果 :以胶原膜作基底培养的表皮细胞无论是单细胞或组织块都生长最好 ,在第 14天均能开始汇合成片 ,且无毒副作用。结论 :该培养法改进了过去培养表皮细胞膜片过薄、韧性欠佳、刮取皮片时造成皮片回缩等缺点 ,方便了创面移植 ,且胶原膜本身也能促进创面愈合 。

表皮细胞培养膜片的冷冻保存研究

目的研究表皮细胞培养膜片的冷冻保存。方法实验比较两种不同的冷冻保存方法和三种不同的冷冻保护液的效果。冷冻保存方法是：将表皮细胞培养膜片固定在含硅油纱布上进行冷冻保存（方法A）和将在培养瓶中的表皮细胞培养膜片直接冷冻保存（方法B）。冷冻保护液为：A．70mlRPMI＋10mlDMSO＋4％人体白蛋白20ml；B．40mlRPMI＋43ml甘油＋4％人体白蛋白17ml；C．87．5mlB21＋12．5mlDMSO＋3gPEG。结果采用方法B和B种冷冻保护液对表皮细胞培养膜片进行冷冻保存效果较好。结论对表皮细胞培养膜片进行冷冻保存是可行的。

大鼠舌表皮细胞培养及其在表皮细胞抑素测活中的应用

利用成年大鼠舌腹膜表皮细胞 (RTE cell)体外培养 ,以及 MTT快速比色分析法建立了表皮细胞抑素的体外测活模型 ,不仅为抑素的分离纯化及性质研究打好基础 ,也可广泛用于研究其它各种物质对表皮细胞生长的影响。本文探讨了 RTE细胞原代培养及传代培养的方法和条件 ,以 MTT法替代传统的 3 H掺入法 ,建立了一个方便、快捷、直观的表皮细胞测活体系 ,并初步测定了抑素对表皮细胞生长的影响。

人表皮细胞培养与移植的研究

创伤、烧伤、整形等创面有皮肤缺损时,植皮封闭创面是关键措施之一。尤其是大面积烧伤创面的覆盖常感自体皮源不足,而异体皮不仅存活期短暂且来源也很困难。为解决这一难题,表皮细胞的体外培养、扩增。

人表皮细胞培养方法的改进

表皮细胞体外培养技术的建立和发展,为烧伤治疗和皮肤病学研究等方面开拓了新的途径。目前国内外对表皮细胞培养技术仍处在不断探索和研究阶段。为进一步寻求更佳的表皮细胞培养方法,笔者在前人工作的基础上对表皮细胞的分离和培养过程进行了改进并获得成功。

上皮生长因子加低剂量辐照对人表皮细胞培养影响的研究

以上皮生长因子（rhEGF）结合低剂量辐照人上皮培养细胞，结果说明，rhEGF结合低剂量辐照对促上皮细胞培养起协同作用，为加速培养上皮细胞的增殖提供一方法。

人体皮肤表皮细胞培养和移植

作者采用三种方法,进行了皮肤表皮细胞培养共120例。并初步应用于临床。表皮细胞接种于胶原者,7~10天呈片,形成2~4层细胞,培养结果稳定。但细胞和胶原紧贴,不能单独分离。培养在3T3细胞滋养层者,于2~3周内形成3~8层复层细胞片,生长稳定。传代最多至第六代。由于3T3细胞是异种细胞,故未用于临床。表皮细胞接种于玻璃瓶进行无基底物培养,1~2天就有新细胞增殖,6~10天已形成整张复层细胞片,最多达15层以上,相似于人体皮肤表皮层结构。生长稳定,能进行多次传代,容易从瓶中分脱,适合于移植。作者将培养的细胞膜片移植于削痂创面及供皮区共20例,23例次。移植细胞膜片能加速创面愈合,移植后存活情况满意。

人体表皮细胞培养的研究进展及应用前景

在综述有关两种表皮细胞分离技术——Tr法和Th-Tr法有关文献的基础上,着重比较三种表皮细胞培养方法(滋养层法、无滋养层法与气液界面法)的优缺点及最新进展;并分析了EGF、Ca^(++)、CT等因素的影响以及表皮培养技术在临床的应用前景。

人表皮细胞培养及同种移植方法的研究

目的：为解决大面积烧伤及其它创伤性皮肤缺损创面覆盖问题，我们对人表皮细胞培养法及同种移植进行了研究。方法：采用细胞悬液培养及组织块培养方法对人表皮细胞进行了培养并对其临床同种移植进行了探讨。结果：组织块培养法皮片形成率为５４．１７％，细胞悬液培养法皮片成活率为４９．０５％，皮片形成率虽然不够理想，但我们的细胞悬液培养法皮片成活率比以前的方法大大提高。临床同种移植皮片共５２片，成活２３片。随访最长者达１５个月，皮片仍存活且无排异现象。结论：两种表皮细胞培养法简便、可行，提高了皮片形成率。

自体表皮细胞培养与异体真皮组合应用研究

自体表皮细胞培养与异体真皮组合应用研究［苏波等．中华创伤杂志，１９９５；１１（３）：１４０］严重烧伤皮肤修复中主要未解决的问题是真皮的替代。动物实验结果表明，异体皮移植后５ｄ，用自体培养表皮细胞膜片覆盖真皮床，１４ｄ后复合皮成活率是（８４．６±２．４...

MTT法快速测定人表皮细胞的生长增殖

目的 建立一种快速测定体外培养表皮细胞生长增殖的方法.方法 利用MTT只被活细胞还原成紫色颗粒的特性,通过比色分析测定吸光度值,用于检测细胞的数量与活性；并与3H－TdR掺入法进行比较.结果 表皮细胞量在0．125～2．0×105细胞／孔时与所测定的吸光度值呈一良好线性关系(r＝0．9689).用MTT法测定人表皮细胞在二种不同培养基中生长增殖与3H－TdR掺入法所测结果意义一致.结论 MTT法用于测定表皮细胞的生长增殖简便、迅速。

无细胞真皮复合皮制备及移植的实验研究

体外构建表皮细胞 无细胞真皮活性复合皮 ,移植于裸鼠背部创面 ,并与单纯移植表皮细胞膜片相对照。术后观察创面愈合情况 ,行光镜、电镜及免疫组化检测。结果示复合皮移植后创面覆盖率高 ,外观情况良好 ,收缩程度低。组织学检测提示复合皮移植后上皮分化充分 ,胶原增生有序 ,表皮 真皮连接结构重建明显 ,提示无细胞真皮复合皮移植可改善创面愈合质量。

大量培养表皮细胞方法的研究

利用小鼠3T3成纤维细胞具有促进人表皮细胞生长的特点,观察了无血清培养时3T3细胞对低密度接种的传代表皮细胞生长的影响。结果表明表皮细胞具有较高的生长能力,细胞融合时间明显缩短,传代比例和培养面积明显扩大,这对临床大面积烧伤病人的救治具有重要意义。

无血清培养人表皮细胞的研究

作者用无血清培养基培养人的表皮细胞获得成功。实验结果证明无血清培养基比含血清培养基更有利于表皮细胞生长增殖，为解决大面积烧伤救治中皮源不足的问题提供了新的途径。

培养人表皮细胞及其异体移植后血型ABH抗原变化的观察

我们采用间接酶标葡萄球菌A蛋白(SPA)法对体外培养的人表皮细胞及其异体移植后血型ABH抗原的表达情况进行了观察。发现所有被检培养表皮(n=55)均可查到较弱的与供皮者相一致的血型抗原;培养表皮异体移植后35天内不同时间的活检标本中,可查到供者及受者血型抗原。