人IL-31的克隆表达及对表皮角化细胞的影响

目的克隆人IL-31基因,构建真核表达载体,研究人IL-31对表皮角化细胞HaCaT的影响及其作用机制。方法PMA、PHA刺激正常人外周血单个核细胞,提取细胞总RNA,采用RT-PCR克隆人IL-31基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)A,进行PCR和双酶切鉴定,并进行序列测定。将重组质粒转染CHO细胞,用RT-PCR和Western blot分析rhIL-31在CHO细胞中的表达。用Ni2+树脂纯化his融合蛋白,用不同剂量rhIL-31刺激HaCaT细胞,利用Transwell穿孔板检测HaCaT细胞培养上清对外周血单个核细胞的趋化作用,荧光定量PCR检测rhIL-31对HaCaT表达趋化因子的影响,Western blot检测STAT3磷酸化。结果成功获得全长人IL-31基因,测序正确,经双酶切、PCR和序列测定鉴定,真核表达质粒构建正确,可在CHO细胞中表达;该目的蛋白刺激人表皮角化细胞HaCaT,细胞培养上清对外周血单个核细胞有趋化作用,HaCaT细胞表达趋化因子MDC、TARC、I-309;细胞STAT3磷酸化增加。结论IL-31作用于正常人表皮角化细胞,细胞培养上清对外周血单个核细胞有趋化作用,HaCaT细胞趋化因子表达增加,细胞STAT3磷酸化增加,提示IL-31可通过STAT3发挥作用。

大鼠表皮角化细胞Cx43表达和细胞增殖活性的关系

目的 :研究大鼠前肢表皮角化细胞Cx43的表达和细胞增殖活性的拓扑学分布特点及二者间的关系。方法 :常规石蜡切片 ,利用Cx43和增殖细胞核抗原 (proliferatingcellnuclearantigen ,PCNA)免疫组化法 ,分析单位面积表皮细胞中Cx43表达的长度 (LA)和PCNA阳性细胞核的百分率。结果 :在水平方向上 5mm范围内 ,表皮细胞Cx43的表达随部位而异 ,且在距离始端大约 3.0～ 4.5mm处Cx43表达丰富。同时 ,在水平方向上 10mm范围内 ,角化细胞的增殖活性随部位而异 ,且增殖活性类似的角化细胞各自聚集成群 ,其直径大小约为 10 -3 m数量级 ;并在距离始端约 3.0～ 4.0mm处是角化细胞增殖活性低的位置。结论

中药治银片对表皮角化及细胞有丝分裂的影响

采用小鼠尾鳞片表皮—小鼠阴道上皮实验模型系统,观察治银片对表皮角化和细胞有丝分裂的影响,探讨治银片治疗银屑病的作用机理。结果证明,治银片具有显著抑制阴道上皮细胞有丝分裂(P<0.01),和促进表皮颗粒层形成(P<0.05)的作用。

表皮角化细胞培养的研究进展

表皮角化细胞体外培养已有近30年的历史,随着研究手段和实验条件的进一步改善,表皮角化细胞培养方法在理论和技术上都有了不断的发展和完善。从滋养层细胞培养、无滋养层细胞培养到与生物支架材料的复合培养,有望通过少量表皮角化细胞经体外扩增来构建具有生命力的皮片用于临床。本文就表皮细胞体外培养的最佳方法和条件作一简要综述。

皮肤燒伤癒合过程中的組織学及組織化学的研究 Ⅱ.SH基的分布及表皮角化时的形态改变

用65—67℃热水燙器在工5只豚鼠背部同一有限部位造成烧伤。不同期間分別取材,按Barrnett及Seligman氏法显示硫氫基;按Danielli氏偶氮偶联反应显示蛋白貭。蛋白貭結合的硫氫基在健存的表皮生发层呈中等度反应;漸近烧伤边緣处增厚的表皮,至迁移的表皮薄片,反应逐漸減弱。表皮内硫氫基的分布和张力原紆維符合。张力原纤維在表皮生发层和新生表皮細胞内均勻分布;在粒层大部分原纤維聚集在細胞周緣形成Weidenreich氏膜。表层細胞只有細胞膜呈阳性反应。渗出液呈中等度反应而透明角貭顆粒为阴性。偶氮偶联反应显示张力原纤維在各层表皮細胞内的分布和排列。各层細胞内张力原紆維的色調不同可能說明在角化过程中其蛋白貭的氨基酸有某些改变。最后对以上結果和表皮角化过程的关系进行了討論。

β—榄香烯对表皮角化及细胞有丝分裂的影响

莪术为治疗银屑病常用中药之一，其有效成份β-榄香烯对实验性肿瘤具抑制作用。作者通过鼠尾鳞片表皮－小鼠阴道上皮实验模型系统研究该药与银屑病治疗有关的药理作用。结果见到该药腹腔注射具有抑制上皮细胞有丝分裂和促进表皮颗粒层生成两种作用，而以后者更为突出。提示β-榄香烯促进角朊细胞分化的作用较抑制细胞增殖的作用显著而有别于一般细胞毒药物。

以严重掌跖角化过度为主要表现的表皮松解性角化过度症一家系报告及基因突变分析

目的:报告一个以严重掌跖角化过度为主要表现的表皮松解性角化过度症(epidermolytic hyperkeratosis,EHK)家系,并检测其基因突变情况。方法:收集1个EHK家系的临床资料,取先证者皮损行组织病理检查。提取先证者及其亲属外周血DNA,应用PCR扩增角蛋白1(KRT1)、角蛋白10(KRT10)和角蛋白9(KRT9)基因编码区的全部外显子及其侧翼序列并行双向DNA测序,以100名健康志愿者外周血DNA作正常对照。结果:先证者皮损组织病理符合表皮松解性角化过度,所有患者的KRT1基因第1436位碱基发生T→C错义突变,导致其第479位氨基酸从异亮氨酸(Ⅰ)变为苏氨酸(T)(p.1479T)。家系中未受累者和100名正常对照者未检测到该突变。在该家系所有成员中未检测到KRT10和KRT9基因突变。结论:KRT1基因的错义突变(p.1479T)可能是导致该家系患者临床表型的病因。

表皮松解掌跖角化症KRT9基因突变的研究进展

表皮松解性掌跖角化症(EPPK)是一种通常由位于17q12染色体上KRT9突变导致的常染色体显性遗传性皮肤病。本文综述了目前为止,EPPK家系中KRT9突变的类型及特点。通常认为KRT9基因突变热区位于螺旋结构的杆状功能域1A区和2B区。随着EPPK家系病例的不断积累,在K9的头部也已检出突变位点,不再局限于螺旋结构杆状结构域。

弥漫性非表皮松解性掌跖角化病1例

1临床资料 患者女，18岁。双于及双足角化过度十余年。患者自婴儿期开始无明显诱四双手手指及双足足趾出现红斑，继而出现皮肤粗糙增厚，蔓延至指腹、手掌、手背、双足底及足背，皮肤增厚逐渐明显，呈蜡黄色斑块状，反复脱屑、皲裂，偶有瘙痒及疼痛，双手活动未受限，指／趾甲增厚、浑浊。其父母近亲结婚，患者弟弟7岁，无类似病史体检：双侧耳屏前各有一皮色球状结节,

表皮松解性角化过度型鱼鳞病1例

患者女，22岁。因反复全身皮肤起水疱22年，逐年龄皮肤增厚及干燥性脱屑。病史特点：患者父母亲述：该患者出生后第3天躯干部起水疱，破溃于涸愈合，愈合面粗糙脱皮。从此，全身皮肤断断续续有水疱发生，破溃疼痛,并逐渐出现皮肤呈灰泥样小片状的干燥性脱屑。特别在幼年时和季节交替时起水疱较为频繁，且数目也较多。

表皮松解性角化过度鱼鳞病伴侏儒1例

报告1例表皮松解性角化过度鱼鳞病患者伴侏儒和骨骼畸形。患者女,15岁。全身皮肤红斑、表面覆灰棕色痂皮15年,伴体形矮小、四肢畸形12年。皮肤组织病理检查显示表皮角化过度伴角化不全,棘层肥厚,表皮颗粒层下见明显裂隙,裂隙内有较多角化不良细胞,表皮和真皮内有大量中性粒细胞浸润。

表皮松解性角化过度型鱼鳞病1例

临床资料患者女，19岁。主因全身皮肤起角化增厚性斑块18年余来诊。患者于出牛后不久，全身多处皮肤出现大片状水肿性红斑，未见明显水疱形成，但红斑处皮肤受摩擦后，易形成潮湿糜烂而，因居于偏远地区，未予正规诊治，曾川当地个体诊所自制外用药物治疗数月，皮损颜色有所变暗，余无变化，

表皮松解性角化过度鱼鳞病1例

临床资料患儿男,10岁.全身皮肤干燥、脱屑,冬重夏轻9年余.患儿1岁时躯干、四肢出现干燥鳞屑,在此基础上断断续续出现黄豆至硬币大小的松弛性水疱,3～6天后可自行破溃,留有红色糜烂面,此后皮肤再次干燥脱屑.随年龄增长,四肢、臀部、阴囊等处的鳞屑不断增厚,形成沟壑状和疣状突起.患儿平素体健,智力发育正常,系第一胎足月顺产,父母非近亲结婚,家族中无鱼鳞病史.

表皮松解性掌跖角化症KRT9R163W突变表达对细胞骨架结构影响研究

目的利用siRNA靶向沉默永生化人角质形成细胞(HaCaT细胞)KRT9R163W表达,共聚焦显微镜观察转染前后细胞骨架结构变化,探讨KRT9R163W突变在表皮松解性掌跖角化症的发病机制中的作用.方法①构建KRT9野生型及KRT9R163W突变型质粒转染入HaCaT细胞过表达.②设计针对KRT9R163W基因的特异性野生型及突变型siRNA,利用脂质体转染HaCaT细胞,并设立阴性对照组、阳性对照组及空白对照组.③通过荧光定量聚合酶链反应(qPCR)及Western印迹检测HaCaT细胞KRT9基因mRNA及蛋白水平表达.④共聚焦显微镜观察siRNA转染前后细胞骨架结构变化.结果①KRT9R163WsiRNA转染HaCaT细胞48 h后,细胞的KRT9基因mRNA表达水平明显降低(0.242±0.051,P<0.05);转染72 h后,靶向siRNA对蛋白表达有统计学差异(0.289±0.036,P<0.01).②KRT9R163W高表达时,细胞骨架结构为错综复杂的网状结构,且部分细胞骨架结构消失.③siRNA特异性沉默KRT9R163W基因后,细胞骨架结构恢复正常的束状排列.结论KRT9R163W高表达可影响细胞的正常细胞结构,通过siRNA技术进一步验证KRT9R163W为表皮松解性掌跖角化症的致病突变基因,为表皮松解性掌跖角化症发病机制研究及靶点治疗提供新的理论基础.

棘层松解角化不良性表皮痣并发色素性毛表皮痣

报告1例单侧棘层松解角化不良性表皮痣并发色素性毛表皮痣。患者男,40岁。10岁时左侧胸部出现片状多毛区,其间有许多淡红色小丘疹。10年前同侧肢体出现红色疣状丘疹,部分融合。皮损冬轻夏重,伴有轻度瘙痒。皮损组织病理学检查可见表皮乳头瘤样增生,基底层上方棘层松解和裂隙,类似Darier病样改变。