抗氧化剂对表皮通透屏障功能的影响

表皮通透屏障功能对皮肤功能具有重要调节作用。增强表皮通透屏障功能已成为防治某些皮肤病和延缓皮肤老化的手段之一。研究显示,抗氧化剂可通过促进表皮细胞分化及其脂的合成而增强表皮透屏障功能。由此提示,抗氧化剂可用于防治某些皮肤病和延缓皮肤老化。

评估表皮通透屏障功能的方法及其应用

表皮通透屏障功能是指表皮防止物质通过表皮进出机体的功能。该功能对于表皮的增生分化、炎症的形成与发展以及抗微生物感染等方面都具有重要作用。而表皮通透屏障功能受体内外多种生物、物理因素的影响。因此,调节表皮通透屏障功能是皮肤保健和防治某些皮肤病的重要手段;评估表皮通透屏障功能是了解皮肤生物功能以及判断皮肤保健、治疗效果的方法。评估表皮通透屏障功能的方法很多。除测量透皮失水率外,超微示踪、透皮微量分析、同位素及荧光标记定位和定量等都是评估表皮通透屏障功能的有效方法。了解这些方法的特点对于选择恰当的手段和有效地评估表皮通透屏障功能具有重要的指导意义。

当归饮子对血虚风燥型皮炎-湿疹表皮通透屏障功能障碍调控机制研究

目的研究当归饮子对血虚风燥型皮炎-湿疹表皮通透屏障功能障碍的调控机制。方法将32只健康雄性豚鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、氯雷他定组和当归饮子组,每组8只。除正常组外,其余组豚鼠采用2,4-二硝基氯苯丙酮溶液诱导建立血虚风燥型皮炎-湿疹样病变模型。造模结束后,当归饮子组给予当归饮子水煎液6.82 g/(kg·d)、氯雷他定组给予氯雷他定0.80 mg/(kg·d)灌胃,正常组和模型组给予相应体积生理盐水灌胃,均连续灌胃14 d。观察皮损区皮肤组织形态改变,采用皮损评分评价皮损形态,检测皮肤角质层含水量、经表皮水分流失量及血清免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-17(IL-17)、CD4^(+)、CD8^(+)水平。结果皮肤病理显示正常组豚鼠皮肤组织结构基本正常;模型组豚鼠皮肤表皮角化过度,真皮浅层大量密集分布嗜酸性粒细胞;氯雷他定组和当归饮子组较模型组明显改善。模型组皮损评分、经表皮水分流失量及血清IgE、IL-17、CD8^(+)水平均明显高于正常组(P均<0.05),皮肤角质层含水量及血清IL-4、CD4^(+)水平均明显低于正常组(P均<0.05);氯雷他定组和当归饮子组皮损评分、经表皮水分流失量及血清IgE、IL-17、CD8^(+)水平均明显低于模型组(P均<0.05),皮肤角质层含水量及血清IL-4、CD4^(+)水平均明显高于模型组(P均<0.05)。结论当归饮子可通过改善皮肤组织形态而减少经表皮水分散失,降低血清IgE水平达到类抗过敏效果,改善CD4^(+)、CD8^(+)平衡状态及调节IL-4、IL-17细胞因子来修复表皮通透屏障,从而达到改善“皮毛微环境”状态。

消风散对湿热蕴肤型表皮通透屏障功能障碍调控机制研究

目的:通过建立"湿热蕴肤型"皮炎-湿疹表皮通透屏障功能障碍豚鼠模型,开展消风散对豚鼠模型皮肤角质层含水量(WCSC)、经表皮水分流失量(TEWL)、血清IgE、IL-4、IL-17浓度和皮肤、肠AQP3表达的影响实验,研究消风散调控"湿热蕴肤型"表皮通透屏障功能障碍的作用机制。方法:24只豚鼠随机抽取6只为空白对照组,其余采用2,4-二硝基氯苯(DNCB)诱导建立豚鼠"湿热蕴肤型"皮炎-湿疹样病变模型,随机分为模型对照组、阳性药物对照组(氯雷他定片)和消风散组开展对照实验。观察豚鼠皮损情况,皮肤角质层含水量(WCSC),经表皮水分流失量(TEWL)及血清IgE、IL-4、IL-17浓度和皮肤、肠AQP3表达情况。结果:与模型对照组比较,消风散组皮损评分显著降低(P<0.01),皮肤角质层含水量(WCSC)明显升高(P<0.01),经表皮水分流失量(TEWL)显著降低(P<0.01),血清IgE、IL-17浓度显著降低(P<0.01),IL-14浓度显著升高(P<0.01),皮肤、肠组织中AQP3的相对表达量显著升高(P<0.01)。结论:在"湿热蕴肤型"皮炎-湿疹动物实验中,消风散方证相应,通过调节表皮通透屏障功能水分和免疫功能,抑制促炎因子,提高AQP3在角质形成细胞中的表达而修复表皮屏障功能,改善皮毛微环境状态。

针灸对表皮通透屏障功能障碍“血虚风燥型”慢性湿疹样皮炎豚鼠模型调控机制的研究

目的:通过建立表皮通透屏障功能障碍模型—“血虚风燥型”慢性湿疹样病变豚鼠模型,研究针灸治疗对皮肤表皮通透屏障功能的作用机制。方法:普通级纯白色雄性豚鼠32只,随机分为空白组8只和造模组24只,采用2,4-二硝基氯苯(2,4-dinitrochlorobenzene,DNCB)诱导法造模,建立“血虚风燥”湿疹样病变豚鼠模型,随机数字表法分为模型组(8只)、对照组(8只)、针灸组(8只)。针灸组取双肺俞、双脾俞、双膈俞、双曲池、双足三里、双血海,双三阴交,针刺以平补平泻为主,留针15min,治疗疗程为两周。对照组给予氯雷他定片,每日一次,连续灌胃两周。观察豚鼠皮肤组织形态学改变情况、多功能皮肤测试仪检测皮肤角质层含水量(Water content of stratum corneum,WCSC)及经表皮水分流失量(Trans-epidermal water loss,TEWL)、酶联免疫法(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay,ELISA)测定血清免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-17(IL-17)浓度。结果:与模型对照组比较,针灸组皮损评分显著降低(P<0.01),皮肤角质层水分含量(WCSC)明显升高(P<0.01),经表皮水分流失量(TEWL)显著降低(P<0.01),血清IgE、IL-17浓度显著降低(P<0.01),IL-4浓度显著升高(P<0.01)。结论:在“血虚风燥型”慢性湿疹样皮炎表皮通透屏障功能障碍豚鼠模型实验中,针灸通过改善表皮水分调节,改善细胞因子表达量,发挥全身免疫作用,修复损伤的表皮通透屏障功能,进一步改善“皮毛微环境”状态。

表皮通透屏障与色素屏障相关性研究进展

皮肤具有多种屏障功能,主要包括表皮通透屏障(物理/机械屏障)、色素屏障、免疫屏障、抗菌屏障等。各屏障功能之间彼此联系、相互调控,共同维持皮肤正常生理功能的稳态。近年来,国内外大量研究表明,表皮通透屏障与色素屏障间具有密切的相关性,某些色素性异常性疾病(如黄褐斑、白癜风等)存在表皮通透屏障功能异常的现象。本文将就两者的相关性研究进展予以综述,为寻找治疗与这两种屏障功能异常相关的疾病提供新的思路。

青刺果油对特应性皮炎样小鼠模型表皮通透屏障及抗菌肽表达的影响

目的探讨青刺果油在修复表皮通透屏障功能的同时对表皮抗菌肽表达的影响。方法将BALB/c小鼠随机分为6组:正常(A)组8只、正常+2%青刺果油(B)组6只、模型(C)组8只、模型+2%青刺果油(D)组6只、模型+基质(E)组6只、模型+2%橄榄油(F)组6只。利用1-氯-2,4-二硝基苯(DNCB)和4-乙氧基亚甲基-2-苯基-2-唑啉-5-酮(OX)于C、D、E、F组小鼠背部构建特应性皮炎样模型,然后在B、D组小鼠背部涂抹2%青刺果油,在E组小鼠背部涂抹基质(辛酸/癸酸甘油三酯),在F组小鼠背部涂抹2%橄榄油。分别于干预前、干预3、7、15天用无创性皮肤生理功能测试仪测定小鼠背部受试区经表皮水分流失(TEWL)及皮肤水分,15天后取小鼠背部受试区皮损,用Western blot方法测定cathelicidin和β-防御素(MBD1、2、3、4)的表达。结果无创性皮肤生理功能测试结果显示,用2%青刺果油干预后,D组TEWL值均明显下降,皮肤水分均明显上升;与C组相比,D组TEWL值干预3、15天后明显下降;与E组相比,D组TEWL值干预3、7、15天后均明显下降;D组皮肤水分干预7、15天后明显上升;与F组相比,D组TEWL值干预7、15天后明显下降,D组皮肤水分干预7、15天后明显上升,差异均有统计学意义(P均<0.05)。Western blot结果显示,用2%青刺果油干预后,D组cathelicidin和MBD3蛋白的表达明显高于A、B、C、E、F组,D组MBD1、2、4蛋白的表达高于C、E、F组。结论青刺果油在修复表皮通透屏障功能的同时可通过增加cathelicidin和β-防御素的表达来增加表皮抗菌肽的表达,从而可用于AD的辅助治疗。

消风散及其拆方对急性湿疹模型豚鼠表皮通透屏障功能障碍的影响

目的探讨消风散治疗急性湿疹的可能作用机制及配伍意义。方法将36只豚鼠随机分为正常组、模型组、氯雷他定组、消风散组、消风散去润燥药组、消风散去解表药组,每组6只。除正常组外,其余各组豚鼠采用2,4-二硝基氯苯(DNCB)丙酮溶液背部脱毛区外涂致敏及左耳内侧激发诱导建立豚鼠急性湿疹模型。造模后消风散组给予消风散药液5.58 g/(kg·d)灌胃,消风散去润燥药组和消风散去解表药组给予相应药液3.72 g/(kg·d)灌胃,氯雷他定组给予氯雷他定溶液0.80 mg/(kg·d)灌胃,正常组和模型组给予5 ml/(kg·d)纯净水灌胃。各组均每天灌胃1次,连续7天。分别于造模前、造模后、给药后采用多功能皮肤测试仪测定皮肤角质层含水量;给药后进行皮损评分,HE染色观察皮损区皮肤组织形态并记录毛囊数量。ELISA法检测血清中免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素17(IL-17)、辅助性CD4^(+)T细胞(CD4^(+))含量。结果与正常组比较,模型组在造模后、给药后豚鼠皮肤角质层含水量下降,给药后血清IL-4含量降低,毛囊数量减少、皮损评分升高,血清IgE、IL-17、CD4^(+)含量升高(P<0.05),HE染色显示皮肤表皮棘层肥厚伴海绵水肿,真皮浅层大量嗜酸性粒细胞浸润和纤维结缔组织增生。与模型组比较,各药物干预组给药后皮肤角质层含水量均升高,血清IL-4含量升高,血清IgE、IL-17、CD4^(+)含量降低,毛囊数量增加(P<0.05);氯雷他定组、消风散组皮损评分降低(P<0.05);病理结果显示,各药物干预组皮肤病理均损害减轻。与消风散组比较,给药后消风散去润燥药组皮肤角质层含水量降低,血清IgE、CD4^(+)含量升高,IL-4含量降低(P<0.05);消风散去解表药组毛囊数量减少,血清IgE、IL-17、CD4^(+)含量升高,IL-4降低(P<0.05);氯雷他定组血清IgE、CD4^(+)含量降低,血清IL-4含量升高(P<0.05)。结论消风散能够改善急性湿疹模型豚鼠表皮通透屏障功能,从而修复皮毛“疏泄”与“润泽”状态,且辛散解表药和养血润燥药配伍具有协同作用,其作用机制可能与抑制炎症、调节免疫有关。

皮肤屏障和黄褐斑

黄褐斑是一种复杂病因的面部色素增加性皮肤病,难治愈,易复发。近来许多研究显示黄褐斑皮损处存在皮肤通透性屏障功能损伤同时伴有氧化应激和微生态的失衡,从而导致黑素细胞的活化。在这一过程中,角质形成细胞和黑素细胞的相互作用以及相关信号通路的活化起到了关键作用。虽然黄褐斑有多种治疗手段,但皮肤屏障修复,口服及外用抗氧化剂以及有效地防护紫外线应该成为必须而且最基础的治疗手段。

皮肤干燥是通透屏障功能受损的表现吗?

有学者认为,皮肤干燥是表皮通透屏障功能受损的表现,但目前尚没有足够的证据证明这一观点。实际上,皮肤干燥是角质层含水量降低的表现。角质层含水量主要由角质层天然保湿因子的量决定,而表皮通透屏障功能则主要由角质层脂质的质和量以及结构蛋白决定。如果皮肤干燥是由表皮通透屏障功能降低所致,那么,角质层含水量应当与透皮失水率呈负相关性。但是研究表明,无论是正常人皮肤、鱼鳞病皮损或皮脂腺缺乏的小鼠皮肤,角质层含水量与透皮失水率均无负相关性。相反,有研究显示,人角质层含水量与透皮失水率呈正相关性。因此,皮肤干燥似乎不是表皮通透屏障功能受损的表现。

青刺果油对角化套膜蛋白和脂质合成酶表达的影响

目的观察2%青刺果油对角化套膜蛋白及脂质合成酶的影响,进一步阐明其修复表皮通透屏障的作用机制。方法将BALB/c小鼠随机分为5组:正常对照组(A组)、模型组(B组)、2%青刺果油组(C组)、基质组(D组)及2%葵花籽油组(E组),每组6只BALB/c小鼠。构建BALB/c小鼠急性表皮通透屏障受损模型后,于C、D、E组小鼠背部受试区均匀涂抹2%青刺果油、基质、2%葵花籽油。分别在干预后4h及24h,检测各组受试区经表皮水分流失(TEWL)以及中间丝相关蛋白(FLG)、兜甲蛋白(LOR)、内披蛋白(INV)、丝氨酸棕榈酰转移酶(SPT)、脂肪酸合成酶(FASN)、三羟基三甲基戊二酰辅酶A(HMGCoA)的m RNA相对表达量。结果分别用2%青刺果油、基质、2%葵花籽油干预急性表皮通透屏障受损模型后4h,A、B、C、D、E组的TEWL分别为(6.52±1.30)、(26.54±3.75)、(24.12±6.06)、(29.21±7.31)、(29.07±6.99);干预后24h,A、B、C、D、E组的TEWL分别为(6.48±0.74)、(10.13±2.23)、(9.16±1.34)、(12.00±1.36)、(11.39±0.66),与B组比较,干预后4h及24h,C、D、E组TEWL值较B组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);C组较D、E组,TEWL值较建模后明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。2%青刺果油干预模型后4h及24h,C组FLG的mRNA相对表达量2-△△Ct分别为(1.48±0.20)、(3.09±0.05);LOR的mRNA相对表达量2-△△Ct分别为(1.52±1.52)、(2.11±0.15);FASN的mRNA相对表达量2-△△Ct分别为(13.81±0.58)、(2.20±0.52);HMGCoA的mRNA相对表达量2-△△Ct分别为(2.74±0.58)、(0.95±0.25),较B、D及E组增加;干预后4h,INV的mRNA相对表达量2-△△Ct为(1.50±0.70),SPT的mRNA相对表达量2-△△Ct为(2.23±0.12);较B、D及E组增加。结论2%青刺果油修复受损表皮通透屏障的机制与其增加角化套膜蛋白FLG、LOR和INV以及细胞间脂质合成关键酶SPT、FASN和HMGCoA的mRNA表达相关。

健康儿童皮肤透皮失水率与角质层含水量的相关性研究

目的探讨角质层含水量与透皮失水率的相关性。方法2021年10月至2022年6月在普宁市公共健康医疗中心、2所幼儿园及2所小学招募≤17岁健康儿童。用皮肤生理功能测量仪测量健康儿童左前臂屈侧和右胫前部位的透皮失水率和角质层含水量,采用Pearson相关分析法分析不同年龄、性别儿童的透皮失水率与角质层含水量的相关性。结果共招募1396例健康儿童,年龄1个月至17岁,男783例、女613例。在1~<12个月组,除男童前臂部位的皮肤透皮失水率与角质层含水量无显著相关性外,男童胫前和女童前臂及胫前部位的透皮失水率与角质层含水量均呈正相关(r值为0.283、0.404、0.420,均P<0.05);在1~2岁组,男童前臂和女童胫前部位的皮肤透皮失水率与角质层含水量无显著相关性,而男童胫前和女童前臂部位的透皮失水率与角质层含水量均呈正相关(r值为0.370、0.419,均P<0.01);在3~5岁组和6~11岁组,除6~11岁组男童胫前的透皮失水率与角质层含水量无显著相关性外,两组男女性其他部位的透皮失水率与角质层含水量均呈显著正相关(r值为0.172~0.293,均P<0.05);12~17岁组,男女性前臂及胫前部位的透皮失水率与角质层含水量均呈显著正相关(r值为0.269~0.485,均P<0.001)。结论健康儿童前臂屈侧和胫前部位的透皮失水率与角质层含水量呈正相关,且随年龄增大,此正相关性有增加趋势。

养血解毒方对银屑病角质形成细胞紧密连接的调节作用

目的:观察银屑病样小鼠皮损紧密连接蛋白中水闸蛋白(claduin-1,claudin-7),闭锁蛋白(occludin)的表达,明确养血解毒方对银屑病表皮通透屏障的修复作用,为养血解毒方治疗银屑病提供科学依据。方法:将C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、甲氨喋呤组、养血解毒方组,制备甲氨喋呤溶液、养血解毒方水煎剂对应灌胃干预,同时小鼠背部剃毛后给予咪喹莫特涂抹诱导银屑病样皮损模型。每日拍照记录皮损形态并对严重程度指数(PASI)评分;水油测试笔检测皮损表皮含水量;苏木素-伊红(HE)染色观察其病理改变、测量表皮厚度;免疫荧光法检测增殖相关的核抗原(Ki67);免疫组化法检测表皮兜甲蛋白(loricrin),真皮中CD3^+T淋巴细胞浸润和紧密连接蛋白claduin-1,claudin-7,occludin的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测皮损中claudin-7,occludin的表达。模拟银屑病皮损微环境,建立白细胞介素-17(IL-17,1 mg·L^-1)刺激的角质形成细胞(Hacat)模型,制作养血组分、解毒组分、养血解毒方喷干粉进行干预。采用细胞增殖毒性检测试剂盒-8(CCK-8)法检测药物对Hacat细胞的毒性;细胞免疫荧光法检测药物对角质形成细胞claudin-1,claudin-7,occludin表达的干预作用。结果:与模型组比较,养血解毒方可显著减轻小鼠银屑病样皮损表现,降低PASI评分及皮损表皮厚度(P<0.01),增加皮损区表皮水分含量(P<0.01),减少表皮ki67,loricrin的异常表达和真皮CD3+T细胞浸润(P<0.01),并增加紧密连接蛋白claudin-1,claudin-7,occludin的表达(P<0.05),增加紧密连接结构的完整性;体外研究发现,与模型组比较,养血解毒方组和养血组分组明显升高紧密连接蛋白claudin-1,claudin-7,occludin的表达(P<0.05);与模型组比较,解毒组分组蛋白表达水平无统计学差异。结论:养血解毒方通过调节角质形成细胞间紧密连接的表达抑制其异常的增殖分化过程,进一步恢复破坏的表皮通透屏障,可能是其治疗银屑病的作用机制之一。其中养血解毒方的养血组分对调节紧密连接的修复起主要作用。

敏感性皮肤及其处理对策

敏感性皮肤是指皮肤对多种内外因素的耐受性降低、敏感性增强。敏感皮肤的发生与年龄、性别、身体解剖部位以及种族有关。敏感性皮肤者生活质量下降。由于其病因不明，有效控制敏感性皮肤一直是个挑战。近来研究显示，表皮通透屏障功能和瞬时感受器电位香草酸受体与敏感性皮肤的发生有关。因此，改善表皮通透屏障功能和瞬时感受器电位香草酸受体抑制剂可能有助于改善敏感性皮肤。