典型水污染区环境样品的去甲基化表观遗传毒性初步研究

摘要：从去甲基化能力方面研究地表水、地下水、土壤等环境样品综合表观遗传毒性。将pEGFP—C3质粒通过人工甲基化处理获得荧光蛋白基因启动子区处于高甲基化状态的c3质粒，并将其转染进人类HepG一2肝癌细胞株，随后以该改造细胞株（EGF—PHepG2）为主要工具载体，与样品提取液进行共培养，依据细胞绿色荧光强度来定量评价样品的去甲基化功能的强弱（简称EGFP方法）。同时通过电感耦合等离子体质谱法（ICP／MS）对样品提取液的成分进行扫描检测分析。结果表明，在9个测试样中，有7个显示出可以观察到的去甲基化表观遗传毒性，占测试样品的78％。其去甲基化表观遗传毒性当量介于0．065～0257m01·L。的5-Aza．CdR之间。在4个存在超标的土壤或底泥样品中，有3个被检测出具有可以观察到的去甲基化表观遗传毒性，环境样品表观遗传毒性检测结果也与环境分析结果具有基本一致的趋势。结果初步显示，部分环境样品去甲基化能力较强，具有不容忽视的表观遗传毒性。

污染水产去甲基化表观遗传毒性EGFP评价方法

pEGFP-C3质粒经过体外人工甲基化处理后,被转染进入HepG2细胞以构建重组细胞株.以5-AZA为阳性去甲基化毒物与重组细胞共培养,通过亚硫酸氢钠测序法定量检测EGFP基因启动子区甲基化状态,通过实时定量PCR检测EGFP基因表达,借助流式细胞术和荧光摄片定量检测共培养细胞的绿色荧光强度,在DNA甲基化、EGFP基因mRNA表达、GFP蛋白等多个层次研究5-AZA染毒处理与其去甲基化能力和荧光表达改变的响应关系.对天津污染水产的去甲基化能力进行了实际样品测试.结果表明,5-AZA与重组细胞的DNA甲基化、基因表达、蛋白产物变化之间存在显著关联,具有较低的检出浓度和良好的重复性.天津污染海域的水产去甲基化能力较强.本文初步建立了一种污染物去甲基化表观遗传毒性评价方法.

外源化学物的表观遗传毒性及其安全性评价

自从1957年Waddington提出表观遗传学的概念后,表观遗传学和表观基因组学有了相当大的发展。表观基因组学是在全基因组水平上研究表观遗传学标志及其与基因表达的相互关系。这一新兴领域已对毒理学研究与实践产生重大的影响。国内,表观遗传学在毒理学研究已较深入地开展了一些研究,并发表了综述。

RNA甲基化调控细胞衰老机制的研究进展

RNA甲基化是常见的表观转录后修饰类型,其种类多样,包括1-甲基腺苷(m1A)、5-甲基胞苷(m5C)和N6-甲基腺苷(m6A)等,可作用于相应靶点,发挥特定生物学功能,且动态可逆。外源环境因素可诱导机体发生氧化应激、炎症、自噬和细胞周期失调等,并受到特定RNA甲基化修饰调控,出现表观遗传毒性效应,而这些改变作为新的关键分子事件,参与调控细胞衰老进程,影响衰老及年龄相关疾病的发生发展。RNA甲基化与细胞衰老的关联将为衰老的预防和干预提供新的理论依据和方向。