槲皮素下调人角质形成细胞内NF-κB和IL-6表达的表观遗传学修饰效应

目的探讨纳米脂质体槲皮素(nanoliposomal quercetin,Q)下调角质形成细胞内核转录因子(NF-κB)和白介素-6(IL-6)表达的表观遗传学修饰效应,并与地塞米松(dexamethasone,D)的效应进行比较。方法将培养的HaCaT角质形成细胞分为三组:①IP-10+Q组:20ng/mL IP-10+40μmol/L Q;②IP-10+D组:20ng/mL IP-10+10-7mol/L D;③对照组(C组):20ng/mL IP-10,三组细胞均培养48h。对各组细胞进行p16INK4ɑ的甲基化特异PCR(MSP),将各组细胞内提取的蛋白质进行DNA甲基化转移酶1(DNMT1),组蛋白脱乙酰化酶1(HDAC1),NF-κBp65,CyclinD1,IL-6及P16的免疫印迹并对各组细胞进行HDAC1,IL-6免疫细胞化学染色,每组实验重复3次。对获得的数据进行相应的统计学处理。结果与C组相比,p16INK4ɑ的MSP显示:①组比②组p16INK4ɑ的DNA甲基化减低显著;免疫印迹显示:①组比②组的DNMT1,HDAC1,NF-κBp65,CyclinD1及IL-6的表达下调显著,p16INK4ɑ的表达上调显著;免疫细胞化学染色显示:①组比②组的IL-6及HDAC1的表达下调显著。以上差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 Q和D通过下调p16INK4ɑ甲基化和HDAC1的表观遗传-NF-κB信号途径而下调角质形成细胞增殖的NF-κB和IL-6炎症因子的表达,且Q比D的下调作用更显著。

EGCG对A431细胞NF-κB表达的表观遗传修饰效应及对光动力的影响

目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人表皮细胞癌A431细胞内核转录因子(NF-κB)表达的表观遗传修饰效应,探讨联合5-氨基酮戊酸介导光动力疗法(ALA-PDT)的增敏作用。方法:低氧诱导培养A431细胞,用MTT比色法检测不同浓度EGCG对A431细胞增殖的影响,MS(methylation specific)-PCR检测p16INK4ɑ基因甲基化变化,免疫印迹检测NF-κBp65,DNMT1,HDAC1,Cyclin D1,HIF-1α,VEGF,p16INK4ɑ表达,并用免疫细胞化学染色观察A431细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin);用流式细胞仪检测EGCG联合ALA-PDT诱导的A431细胞凋亡。结果:EGCG具有抑制A431细胞增殖并诱导凋亡的作用,抑制效应呈浓度依赖性; p16INK4ɑ基因甲基化水平减低显著;免疫印迹显示NF-κBp65,DNMT1,HDAC1,Cyclin D1,HIF-1α,VEGF表达下调,p16INK4ɑ表达上调; E-cadherin表达上调显著,呈浓度依赖性。EGCG联合ALAPDT治疗组促凋亡作用显著。结论:EGCG对A431细胞具有抑制增殖、血管生成、侵袭的作用,通过影响NF-κB表观遗传修饰诱导细胞凋亡。EGCG联合ALA-PDT的促凋亡作用,增强了A431细胞对ALA-PDT的敏感性。

Cx32通过PI3K/AKT途径调控子宫内膜癌细胞恶性生物学行为

目的:观察间隙连接蛋白32(Cx32)与磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)在子宫内膜癌组织与细胞系中的表达情况,以探讨Cx32通过磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路调控子宫内膜癌发生发展的相关机制。方法:采用免疫组织化学方法和Western blotting(WB)法检测子宫内膜癌组织和正常子宫内膜组织以及正常子宫内膜上皮细胞系(hEEC)和两种子宫内膜癌细胞系Ishikawa(高分化)、KLE(低分化)中的Cx32和p-AKT的表达水平,分析二者的关系。采用WB、Transwell、CCK-8和划痕愈合实验检测Cx32过表达前后各组细胞中Cx32和p-AKT的表达变化情况以及对细胞增殖、侵袭与迁移能力的影响。用PI3K/AKT信号通路抑制剂处理Cx32过表达的Ishikawa和KLE细胞,采用CCK-8法检测转染前后子宫内膜癌细胞增殖活力的变化。结果:子宫内膜癌组织中Cx32的阳性表达率(62.50%)显著低于正常子宫内膜组织中Cx32的阳性表达率(100.00%);子宫内膜癌组织中p-AKT的阳性表达率(85.00%)显著高于正常子宫内膜组织中p-AKT的阳性表达率(35.00%)(P<0.05)。Cx32与p-AKT在子宫内膜癌组织中的表达呈负相关,差异有统计学意义(r=-0.325,P<0.05)。与hEEC细胞相比,Ishikawa与KLE细胞中Cx32的表达水平降低、p-AKT的表达水平升高,KLE细胞中Cx32的表达水平最低、p-AKT的表达水平最高;Ishikawa细胞的增殖、侵袭与迁移水平显著低于KLE细胞(P<0.05)。过表达Cx32后,Cx32的表达水平升高、p-AKT的表达水平降低,细胞侵袭、迁移水平显著降低(P<0.05);经过PI3K/AKT信号通路抑制剂处理的Cx32过表达的Ishikawa和KLE细胞比未经过抑制剂处理的Cx32过表达的Ishikawa和KLE的细胞活力低(P<0.05)。结论:Cx32可以通过PI3K/AKT信号通路发挥调控子宫内膜癌发生发展的作用。与正常子宫内膜组织相比,在子宫内膜癌组织中Cx32表达降低、p-AKT表达升高;在两种癌细胞中Cx32的表达均低于正常子宫内膜上皮细胞中Cx32的表达,在Ishikawa细胞中Cx32表达高于KLE细胞(P<0.05)。为进一步检验Cx32和PI3K/AKT信号通路在子宫内膜癌进展中发挥的调控作用,在Ishikawa与KLE两种癌细胞中使Cx32过表达,并用WB法测定p-AKT表达水平的变化。结果表明,在Ishikawa和KLE两种癌细胞中过表达Cx32,则p-AKT的蛋白表达水平下降,可以表明PI3K/AKT信号通路的活性降低。加入PI3K/AKT信号通路抑制剂进一步验证了Cx32可能通过PI3K/AKT信号通路对子宫内膜癌的发生发展起作用。

Nrf2-NF-κB通路轴及表观遗传学调控与中药(天然药物)治疗2型糖尿病

糖尿病是一种以高血糖为特征的代谢性疾病,也是一种终身性疾病,发病率高、危害大。如何预防和治疗糖尿病及其并发症已成为世界各国药学研究者面临的严峻挑战和艰巨任务。2型糖尿病致病机制尚不完全明确,氧化应激、Nfr2-NF-κB信号轴及相关表观遗传基因改变与2型糖尿病存在密切的联系,已成为探究其发病机制、作用机制和药物筛选的关键热点和有效途径之一。中国传统医药学治疗消渴症(糖尿病)历史悠久而常有奇效。中药及天然药物以其毒副作用小、作用温和持久、具有综合治疗作用、可延缓并发症等优点,受到医药学界越来越多的关注。在此背景下,从中药及天然植物中筛选、发现安全有效的新型抗糖尿病药物,以满足临床个性化治疗方案及药物多样化的需求,已成为治疗糖尿病药物研究的必然发展趋势。然而,究竟是具有哪些成分起到降血糖作用?其降血糖的机制又是什么?该文系统总结了现阶段各国研究者对调控Nrf2-NF-κB通路轴关键蛋白、mRNA及表观遗传基因与治疗2型糖尿病的相关研究成果,及中药及天然药物(成分)治疗2型糖尿病的作用机制等现状,希望能为从中药及天然药物中发现治疗糖尿病创新药物提供一定的研究思路。

核因子κB信号转导通路表观遗传学调控的研究进展

细胞信号通路参与调节细胞的免疫应答、炎症反应、细胞生长、分化及凋亡。核因子κB（nuclear factor kappa B,NF-κB）信号转导通路是其中最重要的信号通路之一。诸多刺激因素如肿瘤、感染等均可激活NF-κB信号转导通路,从而产生重要的调控作用。

植物高温信号转导途径研究进展

温度是控制植物生长、发育和地理分布的关键因素.植物整个生命周期都受到环境温度变化的影响.随着工业化革命进程加快,全球变暖日益严重,近几年极端高温天气频繁出现,对农业生产和粮食安全造成严重影响.本团队从上世纪八十年代开始着力于植物高温胁迫的信号传导机制研究,针对植物耐热机制进行长期深入的探究.系统地解析了植物感知高温胁迫的钙离子-钙调素(Ca^(2+)-CaM)热激信号转导途径,揭示了高温引起的植物细胞钙离子原初反应的机制.近年来团队深入拓展表观遗传修饰调控植物耐热机制的研究,发现了多个调控植物耐热性的关键基因和分子开关.团队的系列工作加深了对植物适应高温胁迫环境的分子机制理解,为培育耐热作物品种奠定了理论基础.

微型核糖核酸对植物生长形态的调控

光作为一种信号会刺激植物,并在经过一系列光信号受体和信号转导途径让植物结构形态发生变化以此来适应环境。在此过程中,微型核糖核酸(即microRNAs)会在多条途径中作为信号来调节植物生长和发育。因此,有必要研究在不同的光环境条件下,各种表现型的拟南芥在不同发育阶段中microRNA的表达情况。该研究有助于揭示自然植物种群应对胁迫环境的生存策略,深入理解表观遗传在植物—环境互动中的作用,对开发更高效和合理的作物种植方法有重要的指导意义。

内毒素耐受的分子机制及临床应用研究进展

内毒素耐受是指机体或细胞提前经低剂量脂多糖连续刺激后,对大剂量脂多糖的再刺激呈低反应甚至是无反应的一种现象。内毒素耐受是一个复杂的病理生理过程,涉及多个细胞信号通路、生物分子和受体改变。到目前为止,确切的机制尚不十分清楚。最近的研究表明内毒素耐受现象与一些疾病有关,如脓毒症、糖尿病、囊性纤维化和癌症等。本文就内毒素耐受的体内和体外模型、Toll样受体家族及其下游信号转导途径、表观遗传学及其对内毒素耐受机制的调控及临床应用研究进展做一综述。